Cette technique d’ovariectomie emploie une procédure chirurgicale récupérable pour obtenir des ovocytes amphibiens pour notre recherche médicale ou une autre application pour surmonter l’état pathologique des oeufs retenus. Il n’est pas nécessaire d’euthanasier pour obtenir des ovocytes amphibiens à des fins de recherche. En fait, après une ovariectomie partielle, le sujet amphibien peut être actif sur le plan reproducteur après la récupération.
Après avoir confirmé un manque de réponse au pincement des membres pelviens, placez un anuran femelle anesthésié dans une position dorsale couchée, et utilisez de la gaze humide et stérile pour essuyer le champ chirurgical avec la solution povidone-iode pendant 10 à 15 secondes. Placez un drapé en plastique clair et stérile sur la zone chirurgicale et réduisez l’évaporation en gardant la peau environnante humide, avant d’utiliser une lame de scalpel numéro 15 ou 11 pour faire une incision périmédia de la peau de 3 millimètres dans le coelom moyen entre les épaules et le cloaque. Utilisez des applicateurs à pointe de coton pour appliquer une pression localisée sur tous les petits vaisseaux autour de l’incision au besoin, et élever la membrane abdominale pour une incision membranaire successive.
Utilisez des rétracteurs de paupières pour rétracter les incisions céolomic, et exciser une partie de la masse d’oeufs sans ligating aucun vaisseau sanguin. Pour une ovariectomie complète, cautériser les vaisseaux sanguins environnants, et utiliser une suture mono-filament pour fermer l’incision de céoliotomie avec un modèle de suture everting interrompu. Différentes espèces d’amphibiens, comme ces Necturus et la grenouille de verre, présentent des degrés variables de transparence cutanée, affectant la capacité de visualiser leur statut reproducteur transdermiquement.
Chez certaines espèces, des différences morphologiques peuvent être détectées entre les femelles gravid, par rapport aux animaux récemment oviposited. Dans cet exemple, une femelle Rana muscosa qui a récemment oviposited peut être distinguée d’une femelle gravid par la flasque de sa peau et son aspect plus mince. Les étapes comportementales de l’oviposition dans Rana muscosa incluent la cour, dans laquelle un mâle poursuit activement une femelle et amplexus, pendant lesquels le mâle rana muscosa monte et serre fermement sur le dos de la femelle.
Pendant amplexus, le mâle serre la femelle d’une manière douce de pompage. Rana muscosa femelle se déplacer et afficher des comportements intermittents handstand, éventuellement appuyé contre les surfaces que les œufs peuvent être collés sur, tandis que le mâle pompe son abdomen vigoureusement. Immédiatement après l’oviposition, les ovaires féminins reviennent à une catégorie de stade 1.
Pendant ce temps, les follicules sont difficiles à visualiser lors de l’échographie. La deuxième étape est représentée par l’apparition de points échogéniques dispersés dans tout l’ovaire. La troisième étape est déterminée par la présence de points échogéniques plus gros et plus ronds avec des centres sombres, indicatifs de follicules jaunes et matures.
Dans cette évaluation représentative de quatre ans du Necturus femelle captif, le développement d’oeufs était élevé, mais l’oviposition n’a pas été assurée. Certaines femelles avec des oeufs retenus concomitant avec le gain de liquide dans la cavité du corps, ont montré la circonférence excessive et le gonflement, avec quelques signes des vaisseaux sanguins éclatés, tels que ceux montrés dans ces Rana et Necturus affectés. Bien que l’approche chirurgicale puisse être employée pour la gestion de la pathologie ovarienne, cette technique peut également être impliquée dans la recherche gamet et ombilicale.
Après la chirurgie, le praticien peut revenir au premier protocole décrit dans ce manuscrit pour surveiller la santé globale continue du sujet amphibien.
