Herztransplantation bei Maus ist ein wertvolles Modell für die Untersuchung der alloimmune Reaktion Hier stellen wir eine neue Operationstechnik der heterotopen abdominalen Herztransplantation bei Mäusen vor. Bei der traditionellen Mausherztransplantation werden die Spenderaorta und die Empfänger-Bauchaorta anastomosiert. Die Lungenarterie ist anastomosiert zum Empfänger der Vena cava inferior.
Bei dieser neuen Mausherztransplantation. Die Spenderaorta wird an die abdominale Aorta des Empfängers anastomosiert und die intrathorakische Vena cava inferior des Spenders wird anastomosiert gegenüber der Vena cava inferior des Empfängers. Nun starten wir mit der experimentellen Demonstration.
Nachdem Sie die Maus in die Box zur Isofluraninhalation und Anästhesie gegeben haben, wiegen Sie die Maus. Entsprechend dem Gewicht der Maus, um intraperitoneale Injektion von Ketamin Xylazin Acepromazin zu geben, um Maus zu betäuben. Fixieren und Desinfizieren Maus auf dem Operationstisch, wenn die Anästhesie erfolgt ist.
Schneiden Sie die Haut vom Hals bis zum Unterbauch. Schneiden Sie die Muskeln der Bauchdecke ab und entfernen Sie sanft die Eingeweide auf der linken Seite. Als nächstes legen Sie die untere Hohlvene frei.
Injizieren Sie 0,4 Milliliter der Heparinlösung langsam in die untere Hohlvene und warten Sie eine Minute, bevor Sie die Nadel herausziehen. Ziehen Sie die Nadel heraus und schneiden Sie sowohl die Vena cava inferior als auch die Bauchaorta mit einer Schere ab, um die Exsanguination zu beschleunigen. Öffnen Sie die Brusthöhle, indem Sie einen U-förmigen Schnitt durchführen.
Legen Sie das Herz, die Lunge und alle Blutgefäße der Brust vollständig frei. Legen Sie die thorakale Aorta frei. Schneiden Sie die Hälfte des Lumens.
Führen Sie das Bewässerungsrohr in die Öffnung der thorakalen Aorta ein. Schneiden Sie die Lungenvene ab, um die Bewässerung und Drainage zu erleichtern. Injizieren Sie mindestens zwei Millimeter vier Grad HTK-Lösung.
Das Herz hört vollständig auf zu schlagen, bis der Lungenvenenabfluss vollständig klar ist. Ziehen Sie das Bewässerungsrohr heraus und lösen Sie das Brustbein. Entfernen Sie den Thymus.
Entfernen Sie das Fett leicht um den Aortenbogen. Legen Sie den Stamm der Arteria pulmonalis mit einer 10-Null-Naht frei und ligatieren Sie sie. Trennen Sie die Tatsache und das Bindegewebe, das an der intrathorakischen unteren Hohlvene befestigt ist, legen Sie die obere Hohlvene mit sieben Nullnähten frei und ligatieren Sie sie hinter der Ligatur.
Machen Sie eine Sieben-Null-Naht um die Basis des Herzens unter dem Aortenbogen. Vena cava inferior und die beiden Ohrmuscheln, dann ligaieren die Lungenarterienäste und venösen Lungengefäße. Transektieren Sie den Aortenbogen so distal wie möglich, aber stellen Sie sicher, dass Sie ein klares Lumen ohne die Öffnungen der Seitenäste haben.
Die Lungengefäße unter der Ligatur und intrathorakale Vena cava inferior in der Nähe des Zwerchfells. Entfernen Sie nun das Herz aus der Brust. Legen Sie das explantierte Spenderherz in 4 Grad kalte HDK-Lösung und bewahren Sie es vorübergehend auf.
Achten Sie darauf, eine kalte Ischämiezeit nicht länger als 60 Minuten zu verlängern. Jetzt beginnen wir, die Rezeptoroperation zu demonstrieren. Die ersten Operationsschritte ähneln denen, die zuvor für die Spendermaus gezeigt wurden, einschließlich Anästhesie und Sterilisation.
Bauchhaut quer geschnitten. Nach der Darmdissektion die Bauchorgane mit einer nassen Gaze mit Kochsalzlösung bedecken. Legen Sie die Vena cava inferior und die Bauchaorta frei und befreien Sie sie vom umgebenden Fettgewebe.
Bei Bedarf ligieren oder elektrokauterisieren Sie seitenseitige Zweiggefäße unter den Nierengefäßen. Setzen Sie die erste mikro-hämostatische Zette von rechts in den oberen Teil des Gehirns und die Aorta unter den Nierengefäßen ein. Setzen Sie die zweite mikro hämostatische Reibkraft von rechts in den unteren Teil des Gehirns und der Aorta ein.
Es gibt mehr als einen Zentimeter für Aorta und Vene Raum für Anastomose zwischen zwei hämostatischen Zwergen. Machen Sie einen Schnitt in die Aorta, etwas näher an der unteren Klemme als an der oberen Klemme. Sie können auch eine 30G-Nadel verwenden, um ein kleines Loch zu machen und es mit einer Mikroschere zu öffnen.
Legen Sie das Herz in die Bauchhöhle. Die Aorta in Sicht und die Hohlvene auf der anderen Seite und bedecken Sie sie mit einem kleinen nassen Mullkissen. Passen Sie die Spenderaorta an die Empfängeraorta an und nähen Sie sie, beginnend kaudal.
Machen Sie einen Knoten und fahren Sie mit einer laufenden Naht an der Spitze dieses Schnitts fort, etwa vier bis fünf Stiche. Als nächstes drehen Sie das Herz nach rechts, bedecken es erneut und setzen Sie die Naht auf der linken Seite fort, bis Sie das kaudale Ende erreichen und es knoten. Verwenden Sie eine Mikroschere, um ein rundes Loch auf der abdominalen unteren Hohlvene des Empfängers zu schneiden, die die gleiche Größe wie das intrathorakische vena cavalumen inferior des Spenders haben sollte.
Der Schnitt sollte kranial zur geplanten Aortenaneastomose lokalisiert werden. Machen Sie den Venenschnitt größer als den Aortenschnitt. Spülen Sie die intrathorakische Vena cava inferior des Spenders.
Nähen Sie den Spender intrathorakische Vena cava inferior an die Vena cava des Empfängers, beginnend kaudal. Binden Sie einen Knoten und führen Sie eine laufende Naht durch, bis die Oberseite des Schnitts erreicht ist. Verwenden Sie fünf Stiche und setzen Sie die Naht auf der linken Seite fort.
Zum Schluss einen Knoten in einer Schwanzecke binden und vorsichtig festziehen. Achten Sie darauf, nicht zu fest zu ziehen. Legen Sie kleine Teile des hämostatischen Schwammes um die Vene und Aortensanastomose.
Entfernen Sie zuerst die unteren und dann die oberen mikro-hämostatischen Klemmen und spülen Sie die Bauchhöhle mit warmem 0,9% Natriumchlorid aus. Nehmen Sie den hämostatischen Schwamm weg. Beobachten Sie den Herzschlag des transplantierten Herzens.
Wenn alles stimmt, wird sich das Herz wieder zusammenziehen. Legen Sie den Darm zurück in die Bauchhöhle und schließen Sie ihn mit vier Nullnähten. Bieten Sie eine warme und sauerstoffreiche Umgebung für die transplantierten Mäuse, um sich zu erholen.
In unserer früheren Forschungsarbeit berichteten wir über einen Vergleich von insgesamt 40 Fällen von Vena cava zu vena cava mit 40 Fällen der traditionellen Lungenarterie zu Vena cava Anastomose Verfahren. Die Operationszeit für die Gefäßanastomose in einer Vena cava to vena cava Gruppe war signifikant kürzer im Vergleich zur konventionellen Lungenarterie zu Vena Cava Gruppe. Die Operationstechnik der heterotopen abdominalen Herztransplantation bei Mäusen stellt ein Standardmodell für die Forschung in der Transplantationsimmunologie dar.
Diese neuartige Technik zur Rekonstruktion des Blutkreislaufs, die hier vorgestellt wird, erleichtert die abdominale Herztransplantation bei Mäusen. Und dies wird als begleitin mit reduzierter warmer Ischämie und Rebeating-Zeit des transplantierten Herzens bezeichnet, wodurch die Erfolgsrate dieses Modells verbessert wird.
