我们的研究重点是自闭症谱系障碍 (ASD) 的病理生理学。具体来说,我们研究了 ASD 所涉及的分子机制以及导致行为障碍的原因。这些将共同涉及与 ASD 相关的特定治疗,并将改善 ASD 患者的生活。
我们研究的挑战之一是改进 ASD 相关行为的研究,并在不同的实验室之间进行沟通。不同的实验室之间有很多差异,他们如何进行行为评估,这是将治疗推进到该领域的一个大问题。因此,我们希望通过我们的协议,我们将帮助这些进步和世界各地实验室之间的沟通。
通过优化和详细说明梳理和三室测试方案,我们建立了一个一致的框架,研究人员可以依靠该框架从 ASD 小鼠模型中获得可靠且可重复的结果。这种标准化将有助于更好地合作和解释来自不同实验室的结果,从而更好地了解 ASD 和潜在疗法的开发。我们的实验室对解释自闭症样行为中的细胞类型特异性翻译过程感兴趣。
此外,我们还研究了 ASD 小鼠模型中的潜在治疗应用,例如二甲双胍。首先,打开调暗的灯。清洁桌子并布置房间。
为每个测试笼准备一层薄薄的新鲜垫料。在桌子上放置一到两个笼子,用白色塑料遮罩将彼此和房间环境隔开。然后,在每个笼子前放置一个摄像头以捕获测试鼠标。
用布片盖住笼子,并将所有小鼠转移到房间内,以避免在转移过程中受到压力。将小鼠放入测试室后,取下片材。在实验开始之前,将它们放在灯光昏暗的房间里至少 30 分钟。
在测试开始时,在白板上写下鼠标标识号和测试信息。将测试鼠标放入装有新床褥的笼子中。开始录制并将测试鼠标放入测试笼中。
在 20 分钟的录制会话期间离开会议室。20 分钟后,返回房间。将白板呈现给摄像头并停止录制。
将测试鼠标放回原壳中并重复实验。实验结束后,将小鼠送回它们的饲养室。自我梳理测试显示,与对照小鼠相比,Eif4ebp2 敲除小鼠的梳理时间增加。
Eif4ebp2 敲除小鼠表现出比对照小鼠更多的梳理次数。首先,清洁桌子,然后打开调暗的灯。将三腔有机玻璃仪器放在桌子上,周围环绕着隐私百叶窗。
将一台摄像机放在头顶上,确保所有三个暗室都在摄像机的录制帧中。然后,将测试小鼠和陌生小鼠转移到房间中,在转移过程中用布片覆盖笼子。一旦他们进入房间,就把床单拿走。
实验开始前,将小鼠留在房间内至少 30 分钟,并调暗灯光。在习惯期间保持三个腔室空置。选择测试鼠标后,在白板上写下标识号。
将测试鼠标放在中央隔间中,同时滑动门保持关闭状态。打开门并开始录制,让测试鼠标探索三个空腔室 10 分钟。10 分钟后,返回房间。
轻轻地将测试鼠标引导至中央隔间并关闭滑动门。显示白板并停止相机。将两个线笼放置在左右腔室中,在每个腔室的角落中彼此对角线相对。
测量笼子和腔室壁之间的距离。确保笼子不直接面向腔室门。选择一只陌生老鼠并将其引入其中一个铁丝笼中,让另一个笼子空着。
要开始测试,请按 Record 并在离开房间之前移除两个滑动门。让测试鼠标探索一个腔室中的空金属丝笼和另一个腔室中装有陌生老鼠的笼子 10 分钟。10 分钟后,返回房间。
将白板显示到摄像头并结束录制。将鼠标重新插入中央隔间并关闭互连门。将一只从未遇到过的新鼠标放入以前空的电线笼中。
开始录制并打开互连门,让测试鼠标在离开房间前探索设备 10 分钟。测试鼠标将探索两个金属丝笼,一个是之前遇到的 S1 鼠标,另一个是新引入的 S2 鼠标,持续 10 分钟。10 分钟后,返回房间。
将白板显示到摄像头并结束录制。将所有老鼠放回它们的家笼中。使用无异味消毒剂彻底清洁腔室和金属丝笼,并在下次实验前擦干设备。
测试后,将小鼠送回饲养设施。小鼠更喜欢与 S1 互动,而不是新颖的无生命物体。同样,C57BL/6J 小鼠对新引入的 S2 比熟悉的 S1 更感兴趣。