使用微透析系统实时动态收集意识大鼠的海马细胞外液

通过脑微透析技术对海马细胞外液和人群的监测有助于监测中枢神经疾病的特异性微。脑微透析技术实现了对非麻醉大鼠特定脑区域的间质脑液的动态和连续探究。首先将麻醉的大鼠固定在立体定位脑定位器上，并在手术前用聚维酮碘和乙醇拭子擦拭剃光的手术区域三次。

然后用手术剪刀在中间做一个1.5厘米的颅面切口，用手术剪刀和眼科钳取出骨膜。将前膛作为基底位置，使用颅钻刺穿颅内膜，在海马CA1区域钻出两毫米的孔径。现在将导管细高跟鞋固定在立体定位脑定位器的夹具上，并调整微透析肠衣在前后、中外侧和背腹位置的位置。

调整脑立体定位器的背腹瓣，并将微透析外壳植入CA1区域，深度为3.5毫米。再钻三个直径为2毫米的孔，使三个孔形成一个三角形，探头孔径位于其中的中心。将螺钉植入深度为一毫米的孔中，并用牙科水泥固定探针导管。

然后使用4-O手术缝合线闭合皮肤。根据制造商的说明将微透析泵微量注射器与ACSF清醒活动装置和低温样品收集器连接。接下来，要排出管道中的空气，请将微透析泵设置为每分钟一微升的速度。

然后连接管道和脑微透析探头，以每分钟一微升的速度操作微透析泵，将ACSF注入探头，直到探头表面略微湿润。将探针浸入肝素钠注射溶液中以供后续使用。为了从清醒的大鼠中收集HECF，将脑微透析探针插入探针导管中，并将大鼠放置在带有衬垫的腔室中，以确保大鼠可以自由移动。

打开多通道旋转控制器，以避免在大鼠自由运动期间缠绕微透析管道。然后打开微量注射器泵并以每分钟一微升的速度泵送ACSF。在微透析HECF收集系统平衡60分钟后，定期收集HECF。

取样终止后，将脑微透析探针从探针导管中取出。将探头浸入去离子水中，并用去离子水灌洗 12 小时，以去除管道和探头上的搁浅盐沉积物。取下探头并将其放入 4 摄氏度的 0.05% tripsin 溶液中。

通过脑微透析技术获得的海马细胞外液在设定的采样速率下呈水状、无色和透明。最重要的程序是将微透析小心地植入CA1区域，并将探针插入弹出导管。微透析简单技术可以协助特定大脑区域的疾病标志物的动态变化，药物功效的物质以及药物成分的组织分解代谢。