该措施建立了没有复杂生化法规的细胞最小模型。所使用的技术可以产生高产量的脂质体，并对细胞骨架蛋白具有很高的包封效率。该措施可应用于各种蛋白质和大型物体（如微粒和自准备的微型游泳者）的封装。
一个人正在努力提高前几次尝试的脂质体产量。建议定期讨论稿件部分，了解更多细节，提高产量。首先，通过混合0.1毫摩尔CACL二，10毫摩尔HEPES，1毫摩尔DTT，0.5毫摩尔DAPCO，320毫摩尔蔗糖和0.2毫摩尔ATP，制备总体积为5毫升的水性内部非聚合缓冲液。
通过将蛋白质添加到 4 摄氏度的内部非聚合缓冲液中来制备蛋白质混合物。为了形成肌动蛋白层，向蛋白质混合物中加入100纳摩尔凝胶钙蛋白，4微摩尔咳嗽素和2.2微摩尔VCA HEZ。作为对照实验，用每毫升100微克的荧光染料代替蛋白质混合物。
通过混合100毫摩尔氯化钾来制备总体积为5毫升的水性内部聚合缓冲液。4毫摩尔氯化镁，10毫摩尔HEPES，1毫摩尔DTT，0.5毫摩尔DABCO，10毫摩尔ATP和80毫摩尔蔗糖。通过以一比一的体积比混合内部非聚合缓冲液和内部聚合缓冲液来制备最终缓冲液，以产生总体积为30微升的内部水溶液，该溶液将被封装在脂质体中。
通过混合10毫摩尔HEPES，50毫摩尔氯化钾，2毫摩尔氯化镁，0.2毫摩尔氯化钙，2毫摩尔ATP，1毫摩尔DTT，0.5毫摩尔DAPCO，212毫摩尔葡萄糖和0.1毫克/毫升β肠衣，制备总体积为150微升的水性外部缓冲液。要制备脂质油混合物，首先将 100 微升每毫升 25 毫克 EGGPC 加入玻璃小瓶中。用氩气蒸发氯仿，在小瓶底部留下干燥的固体脂质膜。
为了形成肌动蛋白层，在氯仿蒸发之前，以 EGGPC 与镍脂质的 10:1 比例加入镍脂质并混合。加入两毫升矿物油。蒸发氯仿并在室温下将脂质油混合物在浴中超声处理一小时，以重悬脂质。
在油乳液中制备最终缓冲液，用于制备含有目标蛋白质的单层脂滴。首先在塑料管中取100微升脂质油混合物，并向脂质油混合物中加入10微升最终缓冲液。确保最终缓冲液位于一滴中。
使用玻璃注射器首先抽取少量脂质油混合物，然后通过将注射器的尖端放在液滴的外围将其分解成微小的液滴来抽取最终的缓冲液滴。轻轻上下吸出多次，直到形成浑浊的乳液。将30微升外部缓冲液放入单独的塑料管中。
将30微升脂质油混合物放在外部缓冲液的顶部，静置约10分钟，以在界面处形成脂质单层。为了制备脂质体，小心地将50微升最终缓冲油乳液添加到管的顶部油相中。将塑料管以 100 倍 G 在 4 摄氏度下离心 15 分钟。
改变时间和离心速度，以优化脂质体的形成。如果需要，通过移液器吸出额外的体积小心地去除油相。确保不要将移液器吸头放在试管的侧面，以避免在脂质体相顶部产生半月板油。
使用新移液器，切开移液器的尖端。慢慢将移液管插入剩余的底相并吸出水体积以收集脂质体。将100微升外部缓冲液倒入培养室的孔中。
轻轻地将收集的脂质体沉积到外部缓冲液中，然后将另一张盖玻片放在腔室顶部。使用63 x油浸物镜用共聚焦显微镜观察脂质体。使用 488、647 和 561 纳米激光线。
为了观察荧光标记的脂质，分别封装荧光染料和封装的荧光标记肌动蛋白。捕获感兴趣的帧并以TIF格式保存图像。处理和分析图像J中的图像首先使用图像J软件打开TIF文件。
转到图像，然后单击调整。其次是亮度对比度，通过调整最小和最大设置以及亮度和对比度滑块，将图像的亮度和对比度调整到所需的比例。单击工具栏中的矩形选择工具，然后选择感兴趣的区域。
转到图像，然后单击裁剪以裁剪投资回报率。转到分析，然后单击设置比例。在弹出窗口中，在像素长宽比字段中输入 1.0，并将千分尺设置为长度单位。
在距离（以像素为单位）字段中，输入图像宽度（以像素为单位）。在已知距离字段中，输入以微米为单位的实际图像宽度。要测量脂质体的大小，请使用工具栏中的椭圆形选择工具，沿着脂质体的边缘画一个圆。
去分析，然后点击测量，测量圆的面积，从中可以计算脂质体的直径。通过薄圆形环（绿色荧光脂质双层）的可视化验证了脂质体的成功生成。在488纳米激光下使用共聚焦显微镜确认荧光染料的包封。
脂质体的内部环境应在647纳米激光下均匀荧光。脂质体的形成可以通过薄的绿色圆环来观察。脂质体内部网络中的重建影响是异质的，表现为肌动蛋白丝的分支网络结构。
分支结构是由引入ARP两个三个复合物触发的，它同时控制肌动蛋白丝的成核和分支，以及VCA HEZ。在脂质体双层的内小叶处形成薄但密集支链的肌动蛋白层，其可可视化为荧光应。脂质音频最终缓冲混合物通常必须通过玻璃注射器来回泵送，以避免引入气泡。
处理后混合物必须是白色的。这项技术为建立细胞的最小模型铺平了道路，没有复杂的生化法规。通过这种细胞模拟系统，研究人员可以探索细胞骨架蛋白、成核器和分子马达的机械和动力学特性。
