猪静脉移植病模型的建立与评价

该模型为建立冠状动脉移植疾病的动物模型提供了标准方案。该方法建立的动物模型程序是标准的，结果稳定。首先，将三个月大的雄性迷你猪体重30至35公斤分为假和静脉移植疾病组，每组五只动物。

麻醉动物后，通过将留置静脉导管插入边缘耳静脉来建立耳通路。现在，将猪以仰卧位转移到手术台上。使用 7.0 至 7.5 法式规格插管进行气管插管，并将其连接到麻醉呼吸回路。

用绷带固定四肢，并用无菌窗帘抬高头部。静脉注射维库溴铵以松弛肌肉后，使用心电图监测心率、血氧水平和体温。剃须并消毒手术区域后，在其周围放置无菌手术单。

如文所述切开并露出乳内静脉后，将乳内静脉和左侧乳内动脉定位在胸骨左侧，并用血管钳对乳内静脉进行钝性解剖。通过用电刀电凝左内乳静脉分支进行止血。如果止血不完全，使用棉线，在收获时结扎并标记静脉的两端。

一旦静脉被移除，将肝素，生理盐水注射到静脉中进行预处理。然后，将静脉放入生理盐水中，保留备用，并同样切开假组的乳腺内静脉。然后，打开心包，闭合胸壁，使用乳内静脉进行病理控制，无需冠状动脉旁路移植。

用电刀在心包上做一个大约七厘米的切口，露出右冠状动脉干。暂停心包，并用1-0手术缝合线缝合同侧的皮肤。现在，将右冠状动脉干与周围组织分开。

接下来，使用线钩绕过主动脉附近孤立的右冠状动脉近端下方的阻断带。然后，通过收紧和放松阻断带，用两个分钟缺血和五个分钟再灌注的三个周期治疗心肌。此外，在缺血再灌注预处理期间用心电图监测心脏的电活动。

接下来，在收紧束带后切开覆盖血管的心外膜，以阻断右冠状动脉血流。暴露冠状动脉壁，用手术刀片的尖端纵向切开血管前壁的中心。切开管腔并扩大切口并放置冠状动脉分流后，用线圈将分流的一端通过撕裂插入远端冠状动脉。

现在，将冠状动脉中的血液分流到空心冠状动脉分流器中，以确保手术区域畅通，并使用6-0聚丙烯缝合线在乳腺内静脉和主动脉壁之间进行端到端连续缝合。在升主动脉的中间，用半闭塞夹住升主动脉的左前外侧壁。在切开外膜的主动脉壁上用手术刀片做一个小切口后，通过这个切口将冲头头端的滑动轴的头端插入主动脉腔。

然后，向外收缩滑动轴，圆刀切断一块动脉壁。一旦分流器被拉出，用 6-0 聚丙烯缝合线在乳内静脉和右冠状动脉之间进行端到端连续缝合。打开半闭塞夹后，使用超声记录右冠状动脉干近端吻合部位的旁路流量。

如前所述，为动物准备手术。并用电刀在手术后 30 天用电刀做一个 10 厘米的胸骨正中切口以分割胸骨并收获静脉。分离时，避开主要血管、心脏，将移植的血管逐层分离。

迅速切断连接心脏的大血管，将心脏和升主动脉放在冰片上。一旦移植血管桥、连接的主动脉和右冠状动脉被移除，用生理盐水在 4 摄氏度下冲洗所有样本。取整个移植容器约三到四厘米并将其分成四到五个相等的部分后，将其转移到冷冻管中，在液氮中快速快速冷冻。

为了进行分析，将冰冷的盐水冲洗的移植物固定在4%多聚甲醛溶液中。组织固定12小时后，将切片染色在50毫升苏木精水溶液中三分钟。然后，用50毫升0.5%盐酸-乙醇和0.2%氨水洗涤各10秒钟，将切片分开。

用流水冲洗切片一小时后，将它们浸泡在蒸馏水中三分钟来清洁它们。在70%和90%乙醇中脱水10分钟后，将它们放入50毫升0.5%酒精曙红染色溶液中2至3分钟。一旦染色部分在纯乙醇中脱水，将样品浸泡在纯二甲苯中10分钟，使其透明。

最后，用中性胶水滴下透明部分，然后用盖玻片覆盖它们。在光学显微镜下以40倍放大倍率观察病理切片。超声检查显示，移植血管近端、血管腔、远端整体血流方向正常。

然而，移植血管的近端和远端显示出一些逆行的血液流动。乳内静脉的组织学分析显示，假组的被膜内膜、被膜中层和静脉移植物的静脉壁正常。然而，冠状动脉移植后30天，血管内膜增厚，管腔变窄。

假移植物和静脉移植物病组中，天冬氨酸氨基转移酶、血清胆红素、总胆红素、肌酐4项生化指标变化有统计学意义。外科医生应完全暴露乳腺内部静脉，并确保它没有附着在周围组织上。该技术为研究动物模型中的静脉移植疾病提供了标准化的建模过程。