纳米材料和其他难物质藻类毒性试验的小型装置

当一家化工公司想要将一种新的化学品或其他材料推向市场时，他们需要提供一系列生态毒性测试的数据。藻类测试是需要执行的三个强制性测试之一。藻类试验受到这样的事实影响，即执行起来相当具有挑战性。

因此，我们开发了LEVITATT测试平台。LEVITATT 使用 LED 灯，以避免产生过多的热量问题。此外，它确保了均匀的光场。

它具有紧凑的尺寸，这意味着您不需要太多的空间来执行藻类测试，但与此同时，它允许使用足够的样本量在测试之前、期间和测试后执行化学分析和表征。在测试纳米材料时，这一点尤其重要。本视频将演示使用 LEVITATT 对纳米材料和其他困难物质进行藻类毒性测试。

演示包括以下四个步骤。首先，描述莱维特的组件。第二步是为藻类生长介质准备解决方案。

第三步是概述如何进行藻类毒性试验的过程。最后一步是用荧光计测量藻类生物量的增加。LEVITATT 可放置在温度控制的房间柜中。

这允许在整个暴露过程中保持稳定的温度。该设置放置在轨道摇床上，以便测试期间样品旋转。测试在含有4毫升暴露介质的20毫升闪烁小瓶中进行。

带钻孔的螺钉盖允许在暴露期间与空气交换 CO2。LED 源夹在两个塑料板之间，位于每个外壳的中心。该位置将创建一个均匀的光场，并最小化样本之间的阴影。

每个外壳都装有夹子，最多可以容纳五个样品。紧凑的尺寸可最大限度减少执行实验所需的空间。要准备库存解决方案，请权衡每种化合物的适当量。

库存溶液由对藻类生长至关重要的各种盐组成。当适当数量的盐被称重时，它们被超纯水稀释。库存溶液通过过滤或高压灭菌进行灭菌。

灭菌后，库存溶液可以储存在4摄氏度的黑暗中。准备一系列暴露浓度。暴露浓度之间的系数不应超过3.2。

在每个测试浓度中加入指数级生长藻类的适当体积。最终的细胞密度应该是每毫升大约10，000个藻类细胞。要达到测试的有效性标准，关键是预培养成倍增长。

测量小瓶混合，允许藻类和化合物在取样前均匀分布。样品倒入烧杯中，四毫升被移入20毫升的闪烁小瓶中。闪烁小瓶现在被封顶了。

从每个浓度移液 0.4 毫升。加入1.6毫升丙酮，扰乱细胞壁，将叶绿素释放至液相。现在每个玻璃瓶都紧闭，以避免在储存过程中丙酮蒸发。

封顶闪烁小瓶现在随机分布在LEVITATT中，并孵育72小时。测量孵育开始和结束的光强和温度，以确保符合所需的准则。通过将每个闪烁小瓶中 0.4 毫升的移液到玻璃小瓶中，在 24 小时间隔内进行分采样。

加入160万丙酮，破坏细胞壁，将叶绿素释放至液相。添加丙酮后，拧紧盖子，将样品留在黑暗中，直到分析。使用荧光计量化整个测试期间采集的样品中的生物量。

荧光仪上的设置应为 420 纳米作为激励波长，发射波长为 671 纳米。每个样本被测量三次，并注意到相对值。荧光计的相对值用于计算将用于进一步数据处理的增长率。

使用统计软件将非线性回归曲线拟合到计算的增长率数据中。非线性回归曲线的一个示例可能是可行函数的日志逻辑。关联的 95% 置信区间与模型拟合一起显示。

定期有效浓度值（如 10、20 和 50% 低效）用于报告生态毒性测试的结果。总之，LEVITATT为符合国际标准化准则的常规化学品的藻类毒性测试提供了一个紧凑的平台。此外，该装置为测试干扰光向藻类传递的困难物质（如纳米材料或彩色物质）提供了一个强大的平台。