使用二甲基苯甲酸酯和12-O-Tetradecanyl Phorbol-13-醋酸酯（DMBA-TPA）的化学诱导皮肤致癌模型

这两步皮肤癌模型使研究炎症在皮肤癌中的作用，并允许研究肿瘤启动作为一个单独的过程，从肿瘤进展。该模型中的肿瘤形成是化学诱导的，允许使用敲除菌株来研究环境因素或治疗候选因素的影响。该模型非常适合研究免疫系统和血管生成在癌症中的作用。

它展示了一种类似的疾病病理学，在人类患者鳞状细胞癌。虽然这种方法相对容易进行，但准确的计时是必不可少的。在处理 DMBA 时，采取适当的安全措施也很重要，DMBA 是一种致癌物质。

在开始实验之前，将任何七到九周大的侵略性老鼠关在单独的笼子里，以避免打架和皮肤病变。对于皮肤教皇诱导，首先剃掉实验动物的后皮，并单独称量小鼠。剃须后 48 小时，使用移液器将 50 微克 DMBA 在 200 微升丙酮中涂抹在每只麻醉小鼠的剃光区域。

对于皮肤教皇的促进，在DMBA应用7天后，在实验结束之前，每周两次用5微克TPA在200微升丙酮中治疗皮肤。检查动物的教皇和照片，并记录每个单独的辣椒的大小在地图上每周。如果明显质量大于一毫米直径，如果保持超过一周，将被视为教皇。

当肿瘤反应到达高原时，在上次TPA应用后24小时从动物身上采集适当的样品材料，并收集全厚度的皮肤片，用于免疫组织化学分析。使用活检冲床从教皇和非乳腺皮肤样本中收集皮肤片段，用于基因表达和/或蛋白质分析，并使用手术刀从教皇和非辣椒瘤皮肤中收集片断，用于免疫组织化学分析。然后根据需要收集皮肤排出淋巴结和一块脾脏，进行流动细胞测量分析。

在DMBA TPA肿瘤模型中，通常观察到在DMBA TPA肿瘤模型中，在子宫内自由时间和实验组之间的子宫颈病数上存在统计学上显著的差异。组织学分析适用于研究教皇的结构、皮肤形态或感兴趣的免疫细胞的渗透。必须均匀地涂抹 DMBA 和 TPA 在皮肤上，并在一致的时间间隔内应用 TPA。

定期计算教皇也非常重要。影响肿瘤形成数量和时间的机制可以采用不同的方法研究，包括免疫组织化学、流细胞学、定量PCR和蛋白质分析。这种传统技术可以很容易地适应和应用，以研究不同基因，环境因素，或治疗感兴趣的肿瘤启动和进展的影响。

由于 DMBA 具有致癌性，丙酮迅速蒸发，因此在执行该技术时需要小心谨慎。建议使用合适的呼吸面罩和使用流量柜。