通过再生轴虫中通过显微外科拉米切口进行损伤的脊髓损伤

该协议是首次引入标准化的挫伤型损伤在轴角脊髓再生研究中。这种技术的主要优点是，它模仿在日常诊所看到的创伤，增加了未来发现能够被翻译的可能性。挫伤装置可用于脊髓损伤的其他小型动物模型。

手术技术是困难的，尤其是拉明切除术。因此，建议在进入体内手术之前，对大量动物进行活体外手术。首先，在手术纺织品布上放置一个标准培养皿，在立体显微镜下设置手术台。

将麻醉斧头放在 Petri 盘上的易用位置，用纸巾包裹，使尾巴露出来。识别后肢，并使用一把微型剪刀，使第一个切口只是对它们。从龙骨进行垂直切口，直到感觉到旋转过程的骨质突出。

横向延伸切口，使切口遍历尾部的整个宽度，并抓住带钳子的旋转过程，以确保适当的深度。然后将垂直切口在两侧的旋转过程下方延伸一毫米。将动物放在一边，从垂直切口的腹口开始，为体重为 10 到 20 克的动物进行大约 15 毫米的水平切口。

使用剪刀立即通过水平切口解剖，直到椎柱在中线感觉到。然后将动物打开另一边，然后重复这个过程。从两侧解剖后，通过中线解剖，连接两个水平切口。

然后，将自由的尾巴和龙骨移动到一侧，以暴露旋转过程。将动物放在容易的位置，头部朝向外科医生的非占力侧，并使用一对钳子抓住旋转过程，只是对后肢的侧身。向动物的头部轻轻抬起。

将一把微型剪刀的刀片水平放在工艺周围，轻轻切割，露出脊髓。抓住旋转过程，将过程抓到刚刚拆下的流程，然后重复该过程。在旋转过程中，您必须保持恒定的提升，以确保它不会在切除时对脊髓造成伤害。

如果暴露区域不够宽，使用两对钳子抓住脊髓两侧的层，然后用温和的运动横向扭动它们。删除旋转过程时，可能需要在多个步骤中完成此操作。因此，暴露脊髓可能需要几分钟。

要引入挫伤型损伤，请使用培养皿将动物转移到创伤单元，并在脊髓上照上手电筒。然后，使用微调节器将挫伤性创伤单元圆柱放在暴露的脊髓上方，并降低气缸，直到它与层压水平。将落杆连接到磁铁上，将所需的下降高度调节油缸放在创伤装置上。

接下来，将落杆放在气缸上，关闭电磁铁将杆掉落在裸露的脊髓上，并使用高度调节螺钉将杆向上抬起。如果引入剧烈损伤，在完美的垂直切口中切割脊髓，然后重复切割两毫米到身体的肌肉侧。感觉剪刀的刀片沿着脊髓管的腹部刮擦，以确保切口完成，并解除脊髓从运河。

要关闭手术伤口，请从水平切口的最多刻部分放置 10 点 O 尼龙缝合线，将伤口合上一层，然后向切口的垂直部分工作。当达到一个角度时，转动培养皿并缝合其他水平切口，然后在垂直切口上设置缝合线。在终止麻醉之前，使用高频超声波获取损伤图像。

将传感器的尖端与动物的长度轴对齐，将其淹没到苯并凯恩溶液中，直到它仅比动物后肢后面的龙骨高出几毫米。识别受伤地点，并根据手稿指示获取图像。完成后，将斧头返回到麻醉液，将 Petri 盘淹没在五厘米深的淡水中，让动物滑走。

使用此协议创建的脊髓损伤在受伤和假斧弓上使用血氧素染色进行验证。为了确认再生，组织学科在受伤后九周准备。图像显示受伤动物的脊髓连接重新建立。

受伤和再生，我们其次是检查神经功能。动物对尾部刺激的反应得分较高，表示触觉和触觉功能较高。在受伤的动物中，受伤后三周神经功能丧失，九周内逐渐恢复。

脊髓损伤也使用超声波图形成像进行可视化，从而能够可视化后动脉作为血管完整性的标志。高场MRI扫描在受伤后立即进行，在三、六和九周。这些扫描能够可视化水肿和恢复脊髓完整性。

扫描后立即受伤后，容易发出噪音。耐心细致的手术将为在切除术后成功完成手术铺平道路，而不会过早地损伤脊髓。按照这个程序，可以应用几种体内方法，如成像和电生理技术。