墨西哥河鱼睡眠和睡眠活动的自动测量

该协议可用于量化任何鱼类种群的睡眠和活动，并有可能扩大用于研究睡眠调节的模型系统的数量。这种技术的优点是它的灵活性。例如，鱼可以跟踪在各种竞技场大小或单独安置或组住的实验。

测量该系统睡眠的强度是高通量药物或基因筛选方法的适用性。我们应用这种方法研究两种不同种群的睡眠进化，这些洞穴鱼表现出截然不同的睡眠表型。虽然建立行为成像系统可能很困难，但我们的系统为研究幼虫和成年鱼类提供了一种经济高效的方法。

为了建立系统，以准确跟踪幼虫A.mexicanus的睡眠和昼夜节律，使用0.33厘米厚的白色标志丙烯酸为幼虫跟踪系统构建平台。将录制平台放在光亮的方形散热器的顶部，在行为跟踪实验期间，含鱼竞技场将驻留在该散热器上，并在动物壳体的灯光之间放置第二个丙烯酸，以散射红外线，以实现最佳的照明和对比度。将整个幼虫跟踪台和照明装置放在封闭的塑料管内。

使用旋转工具将镜头从实验合适的网络摄像头中卸下。拆下相机背面的小螺钉以拆下内部壳体，并拆下相机机身内的小螺钉以松开镜头的其余部分。使用小螺丝刀拆下切割镜头后留下的镜头壳体的任何部分。

并拆下电荷耦合器件或 CCD 外壳顶部的蓝色发光二极管。接下来，将内壳体返回到其原始方向，然后再将两个外部螺钉拧回其原始位置。使用小锯将摄像机内部布线，使摄像机能够安装圆形塑料布线位，使多余的塑料平滑，直到它可以伴随镜头适配器。

在不直接接触摄像机的情况下，在摄像机内部尽可能靠近 CCD 安装红外通滤波器，并拧入镜头背面的 35 毫米固定镜头适配器。然后将相机和镜头放入钻入管子顶部的孔中，该孔容纳舞台和灯光，并将 USB 连接到记录动物的计算机。要为成年鱼类构建睡眠系统，首先每隔约46厘米切割红外线条。

并放置一个46由5由0.32厘米9%光通过白色标志丙烯酸板直接在每一个红外光条前，以分散红外光。然后将所有储罐放在支持后置红外照明的机架上，并使用不透明的塑料分压器和 10 升玻璃储罐创建单独的竞技场。记录墨西哥四孔鱼的运动活动，将第4至6条受精后鱼放入24孔组织板的单个井中，在6孔组织板的单个井中记录20至30天受精后。

记录成人四分之四睡眠和活动在社会设置的房子最多五个成人每10升坦克有或没有分隔线。在这个具有代表性的实验中，来自三种独立洞穴鱼类种群的幼虫鱼与表层鱼相比，睡眠明显减少。这种睡眠生产在所有测试年龄是一致的，因为与表鱼相比，成年帕琼、莫利诺和蒂娜雅洞穴鱼的睡眠也显著减少。

值得注意的是，社会住房有力地减少了表面鱼类的睡眠，而不影响帕乔洞穴鱼的睡眠，很可能是由于洞穴鱼群的地下室效应。记录鱼时，应注意确保相机照明最佳，以增强鱼相对于背景的信号。此协议需要一些基本命令行编码，这些代码在文本中已完全描述，并且应适合任何实验室设置。

该协议已经导致许多有关睡眠演变的问题，目前正在用于药物屏幕，跟踪睡眠行为，并了解社会行为如何影响睡眠。