مختبرنا مخصص لتطبيق النقاط للتقنيات القائمة على الموجات فوق الصوتية لدراسة وظائف المخ ومعالجة اضطرابات الدماغ. يدور بحثنا الحالي بشكل أساسي حول خطأين رئيسيين: التصوير بالموجات فوق الصوتية الوظيفية والتعديل العصبي بالموجات فوق الصوتية المركزة. يعتبر التركيز على التعديل العصبي بالموجات فوق الصوتية نهجا محتملا لتدخل الدماغ لدى البشر ، ومع ذلك ، فإن آلياته غير واضحة.
في الآونة الأخيرة ، تمت الموافقة على دمج قياس البصريات الليفي والتركيز على التعديل العصبي بالموجات فوق الصوتية ليكون مفيدا للمعلمات الفعالة للفحص لتعديل أنواع عصبية معينة في مناطق مختلفة قابلة للتطوير. يهدف هذا البروتوكول إلى اكتشاف النشاط العصبي المعدل بالموجات فوق الصوتية في الفئران التي تتحرك بحرية دون تخدير أو تثبيت إطار تجسيمي باستخدام تقنية البصريات الليفية طفيفة التوغل لالتقاط ديناميكية الكالسيوم كمقياس للنشاط العصبي تحت الغرسة. إنه يخفف من الآثار المربكة المحتملة للاهتزاز الصوتي للمسبار نفسه.
هذا البروتوكول مناسب لدراسة الإدراك والتنسيق والسلوك. إنه يتيح التحقيق في إنزيمات المطابقة المعنية بالتعديل العصبي بالموجات فوق الصوتية وتطوير مواقع معلمات جديدة لعلاج اضطرابات الدماغ. للبدء ، قم بإعداد لوحة كهرضغطية.
باستخدام معجون الفضة الإيبوكسي ، قم بتوصيل السلك بجانبي اللوحة الكهروإجهادية. بمجرد أن يصلب معجون الايبوكسي ، استخدم مقياسا متعددا لقياس المقاومة على طرفي السلك للتأكد من أنه صفر تقريبا. ثم ضع طبقة من الشريط على الوجهين على سطح لوح زجاجي نظيف.
قم بلصق اللوحة الكهروإجهادية والحلقة النحاسية بإحكام على الصفيحة الزجاجية. أدخل أنبوب البولي بروبلين بقطر خارجي يبلغ ثلاثة ملليمترات بإحكام في وسط اللوحة الكهروإجهادية وألصقه بإحكام باللوح الزجاجي. الآن ، قم بتفريغ غراء راتنجات الايبوكسي المحضر.
باستخدام حقنة يمكن التخلص منها ، استخرج الإيبوكسي وحقنها ببطء في الحلقة النحاسية. باستخدام مكواة لحام إلكترونية ، قم بلحام الأطراف السائبة لسلكين على موصل صامولة الحربة. بعد إزالة الصفيحة الزجاجية ، قم بتنظيف سطح محول الطاقة بالكحول.
للبدء ، ضع الهيدروفون ومحول الطاقة في خزان مياه مملوء بالماء منزوع الأيونات. اكتشف الحد الأقصى للمجال في المستوى البؤري من خلال المسح الضوئي ثنائي الأبعاد. ثم حدد الحد الأقصى للحقل في مستوى آخر بحد أقصى واضح.
بعد مقارنة إحداثيات X و Y للحد الأقصى ، اضبط موضع واتجاه محول الطاقة إذا لزم الأمر. اضبط طرف الهيدروفون ليكون ملليمترا واحدا من سطح محول الطاقة ، وضعه في منتصف الحافة اليمنى. ثم ابدأ برنامج المسح الضوئي لالتقاط المجال الصوتي الحر في مستوى XC.
حرك الهيدروفون على طول المحور Z لتحديد الأعماق المرتبطة بضغط الذروة المكاني. بعد ذلك ، انقل الهيدروفون إلى الزاوية اليمنى السفلية من محول الطاقة في المستوى XY. قم بتشغيل برنامج المسح الضوئي وتشغيله لالتقاط المجال الصوتي الحر في المستوى XY.
بعد وضع محول الطاقة على جمجمة الفأر المحضر ، احصل على XC في المجال الصوتي عبر الجمجمة لطائرة XY من خلال المسح المائي. اقرأ اتساع الضغط. اقرأ الأبعاد البؤرية عند 3 ديسيبل والموضع على المستويين XY و XC داخل المجال الصوتي عبر الجمجمة ، وأبلغ عن معلمات توقيت النبض ، بما في ذلك Amax ، ومدة النبض ، وفاصل تكرار النبض ، ومدة قطار النبض ، والمغلف.
للبدء ، استخدم خافت لقص الشعر على رأس المخدر وتطهير المنطقة بنسبة 70٪ من الإيثانول واليود البوفيدون. ضع الماوس في وضع الانبطاح على الإطار التجسيمي. قم بعمل شق على طول الخيط السهمي ، بدءا من العظم القذالي إلى بداية عظم الأنف.
بمجرد إزالة الجلد الذي يغطي نصفي الكرة الأرضية ، استخدم محلول ملحي معقم لتنظيف الجمجمة والقضاء على أي سمحاق متبقي. باستخدام قطعة قطن ، ضع 3٪ بيروكسيد الهيدروجين على الجمجمة المكشوفة لمدة ثانيتين إلى ثلاث ثوان تقريبا لإنشاء مسام دقيقة. بعد ذلك ، اشطفها جيدا بمحلول ملحي معقم وتأكد من جفاف المنطقة تماما.
بعد ذلك ، قم بإنشاء حج قحف بقطر 0.6 ملليمتر. اغسل أي حطام بمحلول ملحي معقم. أدخل حلقة الألياف الضوئية في حامل المسبار وقم بتوصيلها بالذراع التجسيمي.
استخدم الذراع التجسيمية لمحاذاة الغرسة مباشرة فوق منطقة الاهتمام وإدخالها في منطقة الاهتمام. استخدم الآن عود أسنان معقم لنشر طبقة رقيقة من أسمنت الأسنان المحضر على الجمجمة وعلى الجزء السفلي من الزرع. افصل حامل المسبار بعناية.
قم بإعداد أنبوب بولي بروبلين وقصه طوال طوله. باستخدام الملقط ، قم بتوصيل الأنبوب بالجزء السفلي من الغرسة. بعد صب مسحوق أسمنت الأسنان في الأنبوب ، أضف السائل المطلوب واترك بضع دقائق حتى يتجمد أسمنت الأسنان.
حدد موقع فتحة الأنبوب وقم بتثبيتها بعناية لإزالتها باستخدام الملقط. بعد تحضير خليط أسمنت الأسنان للتطبيق ، تأكد من انتشار طبقة متساوية ورقيقة عبر الجمجمة. ثم حفر ثلاثة ثقوب في الحلقة المطبوعة ثلاثية الأبعاد.
قم بتثبيت البراغي في الفتحات الخاصة بها. أدخل الجزء العلوي من الغرسة في فتحة محول الطاقة المصنع مسبقا. تأكد من أن الجدار الداخلي للحلقة المطبوعة ثلاثية الأبعاد ناعم.
ثم ضعه حول محول الطاقة الموجود على جمجمة الماوس. ضع أسمنت الأسنان على التقاطع بين الحلقة والجمجمة. ثم انتظر بضع دقائق حتى يتجمد أسمنت الأسنان.
قم بإزالة محول الطاقة بعناية وشد البراغي بإحكام. بعد وضع الماوس المخدر على الإطار التجسيمي ، قم بتنظيف السطح العلوي للغرسة بالكحول. حقن الماء وعامل اقتران في الفراغ بين الغرسة والحلقة المطبوعة ثلاثية الأبعاد.
أدخل سلك تصحيح الألياف البصرية في وسط محول الطاقة المجهز. ثم قم بتوصيل الغرسة بسلك تصحيح الألياف البصرية. أدخل محول الطاقة بعناية في المنطقة.
بعد ذلك ، ضع الماوس في حقل مفتوح واتركه يستيقظ. قم بتوصيل محول الطاقة بنظام الإثارة بالموجات فوق الصوتية وقم بتوصيل سلك تصحيح الألياف البصرية بنظام تسجيل الألياف الضوئية. قم بتنشيط كل من جهاز الإثارة بالموجات فوق الصوتية ونظام تسجيل الألياف الضوئية.
تم تسجيل إشارات الألياف الضوئية تحت التعديل العصبي بالموجات فوق الصوتية المركزة مع كون الأظرف مربعة وجيبية على التوالي. استمرت الإشارة المربعة 300 مللي ثانية ، بينما استمرت الإشارة الجيبية المستمرة 471 مللي ثانية.
