إن استخدام الطب التكميلي والبديل لمراقبة التغيرات المبكرة بعد زرع أنسجة المبيض له ميزة كبيرة على النماذج في المختبر ، لأنه يسمح بالتحقيق في الآلية التي تؤثر على عملية الأوعية الدموية المبكرة وفقدان الجريب. هذه التقنية غير مكلفة ، ويمكن إجراؤها دون أي خطر من رفض الكسب غير المشروع بسبب نقص المناعة الطبيعي للجنين خلال ال 17 يوما الأولى. علاوة على ذلك ، لا يثير هذا النهج أي مخاوف أخلاقية أو قانونية من حيث القانون الأوروبي.
يمكن الوصول إلى أفضل استراتيجية لتطوير المهارات اليدوية اللازمة لمعالجة البيض من خلال التدريب على البويضات غير الجنينية قبل التجربة الفعلية. للبدء ، قم بتسمية اليوم الذي يتم فيه استلام صفر بيض من Louvain فراخ بيضاء مختارة باستخدام علامة. احتضان البيض في حاضنة محددة عند 37 درجة مئوية ، مع توجيه الأطراف المدببة لأسفل.
قم بتدوير البيض بمقدار 180 درجة ، مرتين إلى ثلاث مرات يوميا يدويا. في الظلام ، ضع شمعة البيض على قشر البيض وحدد مركز الجيب الهوائي على قشر البيض باستخدام علامة. قم بتشغيل الأضواء وقم بتدوير دبوس مستقيم معقم في الموضع المحدد لعمل فتحة تبلغ حوالي ملليمتر واحد.
حدد موقع كيس الصفار في الظلام باستخدام شمعة البيض. ثقب البيضة بإبرة معقمة قياس 19 ، بزاوية 45 درجة باتجاه قاع البويضة ، دون تعطيل كيس الصفار. نضح 1.5 إلى 2 ملليلتر من الألبومين لفصل CAM عن القشرة.
ثم أغلق الفتحة بشريط لاصق. قم بتشغيل الأنوار وارسم نافذة مستطيلة بقياس واحد × 1.5 سم على البيضة الموضوعة أفقيا. امسك البيضة بيد واحدة ، وقم بقص نافذة برفق في قشر البيض ، باستخدام شفرة منشار التمرير ، دون تكسير القشرة.
انفخ بانتظام لإزالة غبار القشرة والحطام. حرك ملقط معقم تحت قطعة الغلاف المستطيلة ، وقم بإزالته بشكل نظيف دون إتلاف CAM. ثم تخلص من غشاء الغلاف الخارجي الأبيض لرؤية الجنين و CAM.
في البويضات الجنينية القابلة للحياة ، يظهر الألبومين الصافي ، وحلقة وعائية حول الجنين ، وأحيانا قلب ينبض ، في اليوم الثالث من تطور جنين الفرخ. تحت غطاء التدفق الصفحي ، ضع البيضة على رف البيض بحيث تكون النافذة متجهة لأعلى وتقشر الشريط. ضع برفق وأزل على الفور شريطا مربعا يبلغ طوله سنتيمترا واحدا من ورق العدسة المعقم المستخرج من الأثير على السطح الظهاري ، لصدمة منطقة صغيرة من CAM.
ثم أمسك شريطا قشريا مذابا متجمدا باستخدام ملقط جراحي مجهري ، وضعه على الطب التكميلي والبديل المصاب بالصدمة مع الجانب النخاعي ضد CAM. قم بتقييم الكسب غير المشروع مجهريا ، وانتبه بشكل خاص إلى رد الفعل الوعائي للطب التكميلي والبديل تجاه الكسب غير المشروع قبل التقاط الصور الرقمية أو مقاطع الفيديو. بمجرد الانتهاء من ذلك ، قم بحصاد الكسب غير المشروع عن طريق إمساك الأنسجة أو الطب التكميلي والبديل المحيط بالملقط ، واستئصال الكسب غير المشروع بعناية من الطب التكميلي والبديل باستخدام المقص.
كانت الطعوم قابلة للحياة في 100٪ من الحالات بعد اليوم الأول من التطعيم. كانوا بالفعل ملتزمين جزئيا ب CAM ، وأظهروا نمط تحدث العجلة للأوعية الدموية اللازمة لوعائهم. بعد ستة أيام من التطعيم ، تم لصق الغرسات ب CAM.
في اليوم الثالث تقريبا بعد الزرع ، تمت تغطية الطعوم بطبقة ثانية من الطب التكميلي والبديل وأصبحت مغلفة. أظهر الكسب غير المشروع توعيا جيدا ، حيث اخترقت 80٪ من عمليات الزرع البويضة. لم يلتصق اثنان من الطعوم بالطب التكميلي والبديل واتخذا مظهرا نخريا ، مما أدى إلى معدل بقاء الأنسجة المطعمة بنسبة 83٪ بعد ستة أيام.
في التقييم النسيجي لعملية الزرع ، لوحظت بصيلات صحية في جميع النقاط الزمنية. بعد عملية الزرع ، لوحظ انخفاض ضئيل في كثافة الجريب. تم الحفاظ على معدلات بقاء الجريب خلال فترة التطعيم عند 95٪ في اليوم الأول ، و 83٪ في اليوم السادس.
الجزء الأكثر تحديا هو عمل الثقب الصغير المطلوب لاستنشاق الألبومين ، لفصل CAM عن قشر البيض ، قبل إنشاء نافذة تطبيق. يمكن أن يؤدي الضغط المفرط إلى الإفراط في التحفيز ، أو قد يؤدي إلى تكسير البويضة وتدميرها ، مما يتسبب في تلف لا رجعة فيه للطب التكميلي والبديل أو الأوعية الدموية. هذا النموذج مثالي لاختبار العديد من جوانب فترة ما بعد التطعيم المبكرة لأنسجة المبيض ، بما في ذلك تأثير العوامل المؤيدة لتولد الأوعية ، والعوامل المضادة للأكسدة الوقائية ، والسيتوكينات ، والهرمونات ، والعوامل الأخرى التي تتحكم في تنشيط الجريب والنمو المبكر.
أشار هذا النموذج إلى العلاقة بين الأوعية الدموية المبكرة وتعديل تنشيط الجريب ، وهما الحدثان الرئيسيان اللذان يؤديان إلى انخفاض احتياطي المبيض بعد زراعة أنسجة المبيض.
