الإعاقة الإدراكية هي واحدة من أكثر الاعتلالات المشتركة شيوعاً في صرع الفص الصدغي. سنقدم بروتوكولًا يصف كيفية تقييم ضعف الذاكرة باستخدام نموذج ماوس للصرع المزمن. موقع الكائن رواية، رواية التعرف على الكائن واختبار فصل نمط هي الاقنان بسيطة وقصيرة التي يمكن أن تجهد الحيوانات.
يجعل هذا الاختبار الأمثل لتقييم وظيفة الذاكرة في الفئران الصرع، دون مشغلات إضافية لنوبات متكررة عفوية. للبدء ، التأقلم مع الحيوانات إلى الضوء المنخفض في أقفاصها المنزلية ، لمدة 30 دقيقة على الأقل. إعداد مربع حقل مفتوح.
في اليوم الأول من التعود، مكان ومقياس الإضاءة في وسط مربع حقل مفتوح. وضبط الإضاءة إلى 60 لوكس. لتقييم النشاط الحركي لكل فأرة، استخدم برنامج تتبع الفيديو السلوك الحيواني.
بمجرد فتح برنامج تتبع الفيديو، معايرة حجم مربع الحقل المفتوح. ثم ضع برفق فأر تجريبي في مربع الحقل المفتوح الذي يواجه الجدار. افتح البرنامج الذكي، انقر على مخصص وقبول.
انقر فوق مصدر الصورة. بعد تحديد الكاميرا المثبتة، اضغط على الزر تعيين. اضبط دقة الكاميرا واضغط على قبول.
بعد نقرة المعايرة، اسحب ماوس الكمبيوتر ليناسب حجم المربع. وملء حجم مربع الداخلية. انقر فوق تعريف المنطقة لحفظ كل حجم مربع ثم ثم انقر فوق حفظ.
المربع الأحمر هو النطاق المتعقب ، لذلك يتناسب مع حجم المربع الداخلي ، في حين أن المربع الوردي يناسب المخطط التفصيلي. اضغط على إعداد الكشف. انقر فوق لقطة، ثم اضغط ابدأ اختبار، للتحقق ما إذا كان يتم تعقب منطقة معينة ثم pres إيقاف الاختبار، ثم قبول.
انقر فوق إعدادات الوقت. بعد تحديد وقت الإعداد المسبق، قم بتعيين وقت زمن الوصول، في وقت الاستحواذ لمدة ثلاث ثوانٍ على 15 دقيقة واضغط على قبول. اضغط على مواضيع لتعيين الاسم الرمزي.
انقر فوق جدولة، لحذف التفاصيل الموجودة واسحب اسم الرمز المعدل في المواضيع إلى جلسة واحدة. انقر على الحصول على البيانات. انقر فوق الزر تسجيل وانقر فوق ابدأ.
وضع الماوس في المربع وتتبع لمدة 15 دقيقة. بعد 15 دقيقة من تسجيل العودة الماوس إلى قفصها المنزل. استعادة الضوء الساطع.
انقر فوق الحصول على البيانات. ثم انقر فوق التحليل النشط سحب اسم الرمز الشام إلى النافذة المجاورة له. انقر فوق الزر تعريفات التقرير.
انقر فوق الزر تعريفات التقرير الجديد ثم تقرير الملخص ثم اضغط قبول. انقر فوق اسم الموضوع والمسافة في المنطقة، ثم أرسله إلى الجانب. ثم اضغط على الزر قبول.
انقر على علامة الاختيار الحمراء وانقر فوق تحليل. تحقق من النتائج. في اليوم الثاني واليوم الثالث، كرر جلسات التعود.
في اليوم الرابع تنفيذ جلسة التعريف. في الضوء الخافت، ضع كل فأرة في الحقل المفتوح الفارغ لمدة ثلاث دقائق. بعد هذا التعود وجيزة عودة الحيوان إلى قفص منزله.
ضع جسمين متطابقين، دمى مطاطية، في ساحة الميدان المفتوحة، على بعد خمسة سنتيمترات من الجدران المجاورة. إصلاح الكائنات مع الشريط من جانبين. إدخال الماوس التجريبي، في مربع حقل مفتوح تواجه الجدار أبعد من الكائنات.
السماح الاستكشاف مجانا لمدة 20 دقيقة وقياس يدويا الوقت الذي يقضيه استكشاف كلا الكائنين باستخدام ساعتي إيقاف. لا تحدد كمقد الوقت الاستكشافي، أي سلوك، الذي خطم الحيوان لا يشير نحو الكائن. بمجرد أن يصل الماوس إلى الحد الأدنى لوقت الاستكشاف 30 ثانية ، بالنسبة للكائنين ، أوقف جلسة F1 ونقل الماوس إلى قفصها المنزلي.
إذا فشل الماوس لاستكشاف الكائنات لمدة 30 ثانية خلال 20 دقيقة، قم بإزالة الماوس من مربع الحقل المفتوحة، ثم استبعاده من جلسات عمل إضافية. في اليوم الخامس، تنفيذ جلسة اختبار موقع الكائن رواية. نقل الماوس إلى منطقة الحقل المفتوحة لإعادة التأهيل لمدة ثلاث دقائق.
ثم إعادته إلى قفصه المنزل. نقل كائن واحد إلى موضع قطري ووضع الماوس التجريبية التي تواجه جدار مربع حقل مفتوح. السماح 10 دقائق من الاستكشاف المجاني وتسجيل مع نظام تتبع الفيديو.
قياس، والوقت الذي يقضيه استكشاف كل كائن، وذلك باستخدام ساعتي إيقاف. المقبل، نقل الماوس إلى قفص منزله، عن طريق الاستيلاء على الذيل. لمدة ثلاثة أيام، اسمحوا الماوس بقية مع حرية الوصول إلى الطعام والماء.
في اليوم التاسع أداء جلسة التعود 15 دقيقة، لماوس واحد. في اليوم 10 أداء جلسة إعادة التأهيل وجيزة، لمدة ثلاث دقائق. ثم إعادته مؤقتا إلى قفصها المنزل.
ضع جسمين متطابقين، 50 ملليلتر أنابيب بلاستيكية مملوءة بـ 40 ملليلتر من الماء، في الحقل المفتوح، على بعد خمسة سنتيمترات من الجدران المجاورة. إدخال الماوس التجريبي في مربع حقل مفتوح، تواجه الجدار أبعد من الكائنات. كما سيتم تعريض الماوس إلى كائنين مختلفين في اختبار NO، أنبوب بلاستيكي 50 ملليلتر مليئة 40 ملليلتر من الماء، وجرة كوبلين الزجاج الجرار.
موازنة الكائن خلال جلسة التعود، من خلال تقديم اثنين من الكائنات متطابقة، الزجاج كوبلين الجرار الجرار، لنصف الحيوانات في المجموعة. ثم مع اثنين من الكائنات المختلفة، والسماح للاستكشاف مجانا لمدة 20 دقيقة وقياس الوقت الذي يقضيه يدويا استكشاف كلا الكائنات باستخدام ساعتين توقيت. بمجرد وصول الماوس إلى الحد الأدنى من وقت انتهاء الصلاحية 30 ثانية لكلا الكائنين، إيقاف جلسة عمل التعريف.
في اليوم التالي، قم بإجراء جلسة اختبار التعرف على كائن الرواية. أولاً، نقل الماوس إلى حقل مفتوح لإعادة التأهيل، لمدة ثلاث دقائق، ثم إعادته إلى قفص المنزل. في خمسة سنتيمترات بعيدا عن الجدران المجاورة، استبدال أنبوب مع جرة كوبلين الزجاج الجرار، بحيث تتعرض الفئران إلى أنبوب واحد والزجاج كوبلين جرة الجرار.
لنصف الحيوانات التي تعرضت للزجاج كوبلين الجرار الجرار خلال الدورة الأولى التعود، استبدال الزجاج كوبلين الجرار الجرار مع أنبوب بلاستيكية 50 ملليلتر مليئة 40 ملليلتر من الماء. بحيث تتعرض الفئران إلى أنبوب واحد والزجاج كوبلين جرة الجرار. السماح 10 دقائق من الاستكشاف مجانا أثناء تسجيله باستخدام نظام تتبع الفيديو.
ثم الاستيلاء على ذيل الماوس التجريبية، ونقله إلى قفص المنزل. لمدة ثلاثة أيام، والسماح للماوس بقية مع حرية الوصول إلى الطعام والماء. لتحليل NL، افتح برنامج البدء المخصصة وقبول.
انقر فوق مصدر الصورة. بعد تحديد الكاميرا المثبتة، اضغط على الزر تعيين. فقط دقة الكاميرا واضغط على قبول.
انقر على زر مجلد فتح مقاطع الفيديو لفتح الفيديو المحفوظ. شاهد الفيديو المحفوظ لمدة 10 دقائق من الوقت الذي يدخله الماوس ويقيس الوقت الذي يقضيه في استكشاف كل كائن. في اليوم 15 لأول مرة تنفيذ جلسة التعريف الأولى لاختبار PS.
هذا من أجل الماوس إلى منطقة الحقل المفتوحة لإعادة التأهيل، لمدة ثلاث دقائق. ضع لوحة الأرضية مع الشبكة الواسعة ، وكائنين متطابقين. قارورة من البلاستيك T مليئة 50 ملليلتر من الماء، في مربع حقل مفتوح.
ثم قدم الماوس التجريبي في مربع حقل مفتوح تواجه الجدار أبعد من الكائنات. السماح استكشاف مجاني لمدة 20 دقيقة. وقياس الوقت الذي يقضيه يدويا استكشاف كل من الكائنات باستخدام ساعتي إيقاف.
بمجرد أن يصل الماوس إلى الحد الأدنى لوقت الاستكشاف 30 ثانية لكلا الكائنين ، أوقف جلسة التعرف الأولى ونقل الحيوان إلى قفصه المنزلي. لموازنة الكائن ونمط اختبار الفصل لنصف الحيوانات وضع لوحة أرضية مع الشبكة واسعة واثنين من الكائنات متطابقة، والزجاجات لتجربة موازنة العداد في مربع حقل مفتوح. ثم أدخل الماوس التجريبي إلى مربع الحقل المفتوح والسماح بالاستكشاف المجاني لمدة 20 دقيقة.
بمجرد أن يصل الماوس إلى الحد الأدنى لوقت الاستكشاف 30 ثانية للكائنين ، أوقف جلسة التعرف الأولى ونقل الحيوان إلى قفصه المنزلي. في اليوم التالي، نقل الماوس إلى منطقة الحقل لإعادة التأهيل لمدة ثلاث دقائق. ثم إعادته إلى قفصه المنزلي.
التالي تنفيذ جلسة التعرف الثاني مع زجاجتين على أرضية الشبكة الضيقة. بالنسبة للتجارب المقابلة، قم بإجراء جلسة التعرف الثانية على قاررتين T مملوءتين بالماء في أرضية الشبكة الضيقة. في اليوم التالي تنفيذ جلسة اختبار فصل النمط.
نقل الماوس إلى منطقة الحقل المفتوح مع عدم وجود كائن لإعادة التأهيل لمدة ثلاث دقائق. ثم إعادته إلى قفصه المنزلي. المقبل، وضع قارورة تي مليئة بالماء وزجاجة على أرضية الشبكة الضيقة.
جعل تي القارورة مليئة بالماء، في كائن رواية. للتجارب موازنة، ضع كل كائن على أرضية الشبكة الضيقة لجعل زجاجة كائن جديد في هذه الحالة. ثم للماوس التجريبي إلى منطقة الحقل المفتوح لمدة 10 دقائق لاستكشاف.
السماح 10 دقائق من الاستكشاف المجاني والتسجيل باستخدام نظام تتبع الفيديو. الاستيلاء على ذيل الماوس التجريبي ونقله إلى قفص المنزل. قياس الوقت الذي يقضيه في استكشاف كل كائن باستخدام ساعتي إيقاف.
وحساب نسبة التمييز التي تساوي الفرق بين الوقت الذي يقضيه بين الكائن الرواية والكائن المألوف مقسوما على الوقت الإجمالي لاستكشاف الكائنين. ستة أسابيع بعد إدخال المضبوطات الحادة التي تسببها بيلوكربين. سوف تخضع أجهزة الماوس لاختبار موقع الكائن الجديد.
اختبار التعرف على الكائن الجديد واختبار فصل النقش. في هذا الترتيب يفصلها ثلاثة أيام فترات راحة بين الاختبارات. 11- وجرى التأكيد على عدم وجود تفضيل كبير بين الجسمين اللذين عُرضا معا.
وأظهرت الفئران الصرع انخفاضا كبيرا، في نسبة التمييز في الاختبارات الثلاثة مقارنة مع الضوابط الشام. إظهار ضعف الذاكرة المكانية. قياس النشاط الحركي، وأظهرت زيادة كبيرة في الحيوانات الصرع.
في حين أن الدافع لاستكشاف الأشياء كان مشابها بين الشام والحيوانات الصرع. وأخيرا تم تقييم موت خلايا فرس النهر بعد مرض الصرع الناجم عن pilocarpine باستخدام تلطيخ البنفسجي الكريستال لتأكيد الضرر العصبي الناجم عن النوبات. أظهرت الحيوانات المعالجة ال pilocarpine لخلايا بيكنوتيك في وCA3 subfield من قرن آمون، على عكس ضوابط الشام.
عد في اختبار NO و PS أمر بالغ الأهمية للحد من التحيز الكامنة الممكنة في هذا الجهاز كائنات محددة. وبالإضافة إلى ذلك الفئران الصرع المزمن مفتوحة تظهر القلق المتزايد، الأمر الذي يتطلب خطوات التعود متعددة للأمة ما يكفي من الثناء إلى الإعدادات التجريبية. يمكن أن توفر التعديلات الزمنية مثل رقم أو موقع الكائنات في البروتوكول لدينا اختبارات الذاكرة.
والتي يمكن أن تكون مفيدة لوضع آليات معقدة من الصرع المرتبطة التدهور المعرفي. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تقييم الجوانب المختلفة لضعف الذاكرة في الصرع.
