يمكن أن توفر pdECM bioink بيئة صغيرة مفيدة لجزيات البنكرياس باستخدام مكونات وبنية خاصة بالأنسجة ولها خصائص عصبية مثالية تقلل من وفيات الخلايا وتزيد من إمكانية طباعتها. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن الحفاظ على تكوين الأنسجة المحددة داخل بيوكينك pdECM تعزيز talk البناءة بين 3D البنائية البنكرياسية والنباتات الصغيرة المغلفة. ويمكن تطبيق تطوير تغليف جزيرة في بيميكم bioink لتصنيع الأنسجة البنكرياسية القابلة للزراعة لبناء لعلاج مرض السكري من النوع الأول.
يمكن استخدام هذا bioink لتوسيع نطاق تطبيق الانشاءات القابلة للزراعة وكذلك نماذج الأنسجة في المختبر لمرض السكري ، والمضاعفات المرتبطة بالسكري وسرطان البنكرياس. لفك الخلية من العينة المجمدة البنكرياس بورسين الأنسجة، واستخدام مبشرة لشريحة البنكرياس المجمدة إلى قطعة سميكة ملليمتر واحد ونقل 50 غراما من الأنسجة شرائح في حاوية بلاستيكية 500 ملليلتر. اغسل الأنسجة بـ 300 ملليلتر من الماء المقطر عند أربع درجات مئوية على شاكر مداري رقمي بمعدل 150 دوران في الدقيقة لمدة 12 ساعة تقريبًا.
عندما يختفي الماء الغائم، استبدال الماء مع 400 ملليلتر من 1٪ تريتون-X 100 في برنامج تلفزيوني لمدة 84 ساعة. في نهاية معالجة المنظفات، احتضان الأنسجة مع 400 ملليلتر من الايزوبروبانول لمدة ساعتين لإزالة الدهون المتبقية من البنكرياس، تليها غسل على مدار 24 ساعة في 400 ملليلتر من برنامج تلفزيوني. في نهاية الغسيل، تعقيم الأنسجة منزوعة الخلايا مع 400 ملليلتر من 0.1٪ حمض peracetic في 4٪ الإيثانول لمدة ساعتين قبل غسل العينة مع 400 ملليلتر من برنامج تلفزيوني جديد لمدة ست ساعات لإزالة أي المنظفات المتبقية.
في نهاية الغسيل، استخدم ملقط لنقل قطع الأنسجة إلى أنبوب مخروطي 50 ملليلتر وإعادة تجميد العينة عند ناقص 80 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة. ثم تغطية أنبوب مخروطي مع مسح خالية من الوبر ثابتة مع شريط مطاطي وlyophilize الأنسجة decellularized في ناقص 50 درجة مئوية لمدة أربعة أيام. لإعداد bioink، نقل 200 ملليغرام من تجميد المجفف pdECM إلى أنبوب مخروطي جديد 50 ملليلتر وإضافة 20 ملليغرام من البيبسين و 8.4 ملليلتر من حمض الخليك المولر 0.5 إلى عينة الأنسجة.
ثم ضع شريط حركية مغناطيسية في الأنبوب لاحتضان مثير لمدة 96 ساعة بمعدل 300 دوران في الدقيقة. في نهاية الحضانة، استخدم مصفاة خلية 40 ميكرومتر وماصة إزاحة إيجابية لتصفية الحل في أنبوب جديد على الجليد لتصفية أي جزيئات غير مهضومة وإضافة ملليلتر واحد من PBS 10X إلى الأنبوب. بعد دوامة، واستخدام هيدروكسيد الصوديوم لضبط درجة الH من الحل إلى سبعة.
لإعداد bioink للطباعة 3D خلية من بناء البنكرياس مع هيكل منقوشة، وصمة عار واحد aliquot من bioink pdECM مع 0.4٪ Trypan الأزرق و aliquot واحد مع حل روز البنغال في نسبة واحد إلى 20. ثم استخدام ماصة النزوح إيجابية لخلط بلطف كل حل بيوينك مع حل متوسطة معلقة الجزر في نسبة ثلاثة إلى واحد إلى تركيز 1.5٪ الحيوية النهائية وكثافة الخلايا من ثلاثة أضعاف 10 إلى ثلاثة الجزر المكافئ لكل ملليلتر. بالنسبة لطباعة الخلايا ثلاثية الأبعاد من ثوابت أنسجة البنكرياس ذات القاعدة الـ multimaterial، قم بتحميل كل خليط جزري بيونك في محاقن معقمة فردية مجهزة بـ 25 فوهات قياس وطباعة 3D لكل بيونينك تحت ظروف الطباعة المثلى في 18 درجة مئوية في شكل شعرية مع خطوط بالتناوب من الأزرق والأحمر.
لربط عبر bioink، ضع البناء المطبوع في حاضنة ثقافة الخلايا ثاني أكسيد الكربون 5٪ و 5٪ من الخلايا الكربونية لمدة 30 دقيقة. ثم تزج في بناء المطبوعة في RPMI 1640 المتوسطة تكملها مع 10٪ مصل الأبقار الجنين و 100 وحدة لكل ملليلتر من البنسلين وstreptomycin. بعد عملية إزالة الخلايا، تتم إزالة 97.3٪ من الحمض النووي المزدوج الذي تقطعت به السبل ومكونات المصفوفة خارج الخلية التمثيلية مثل الكولاجين والجليسومينوغلوكان تبقى عند 1278.1٪و 96.9٪ مقارنة بالأنسجة البنكرياسية الأصلية على التوالي.
في هذا التحليل التمثيلي، أظهر pdECM bioink سلوكًا لرقق القص بقيمة 10 باسكال تقريبًا في الثانية بمعدل القص بمعدل واحد في الثانية يشير إلى أن bioink أظهر الخصائص الريولوجية المناسبة للبثق من خلال فوهة. وعلاوة على ذلك، بدأ معامل معقدة من bioink زيادة عندما وصلت درجة الحرارة 15 درجة مئوية وارتفعت بسرعة عندما تم الحفاظ على درجة الحرارة في 37 درجة مئوية مما يدل على انتقال سول هلام من الحل. تم التحقيق في رئيس الوزراء G الديناميكي و G المزدوجة لـ pdECM bioink في درجات الحرارة ذات الصلة من الناحية الفسيولوجية لضمان استقرارها بعد عملية الطباعة مما أدى إلى تحقيق معامل مستقر في ظل حالة اكتساح التردد.
باستخدام نظام الطباعة متعددة الرؤوس، يمكن بعد ذلك أن تكون مصنوعة أنواع مختلفة من 3D الناشئة كما هو موضح باستخدام pdECM المتقدمة مما يدل على براعة pdECM لغرض الطباعة البيولوجية 3D لمواءمة نوعين أو أكثر من الأنسجة الحية في ترتيب يشبه الأنسجة. يكون لطيفا عند خلط bioink مع الخلايا لتجنب موت الخلية وتشكيل فقاعة وجود فقاعات يقلل من دقة الطباعة ويقلل من صلاحية الخلية. يمكن تقييم وظيفة الجزر المغلفة البنكرياس داخل 3D بناء أنسجة البنكرياس من خلال تلطيخ المناعة أو اختبار تحمل الجلوكوز.
يمكن أن تستخدم هذه bioink pdECM و 3D تقنية الطباعة الحيوية لتطوير بناءات الأنسجة البنكرياسية الوظيفية في مجال هندسة الأنسجة. يجب على الباحثين ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة لمنع الإصابات عند التعامل مع مبشرة حادة والكواشف.
