ومن الصعب إعادة إنتاج النظم الوُوتيكية العميقة الموجودة في المؤلفات عندما يتم تجاهل محتوى المياه. يوفر هذا الأسلوب بروتوكول توحيد لتطوير هذه الأنظمة. وستتيح هذه التقنية إمكانية استنساخ إعداد نظام اتمليكي عميق، مما يسهم في تحقيق نتائج متسقة فيما بين الأوساط العلمية.
وقد أثبتت أنظمة الأوتيك العميق تطبيقاتها في العديد من المجالات المختلفة، بما في ذلك العلاجات والهندسة الطبية الحيوية، والتحليل الحيوي، والاستخراج، والتقاط ثاني أكسيد الكربون. من خلال مظاهرة بصرية، نسلط الضوء على الاختلافات التي تمت مواجهتها في الأساليب المختلفة التي تم الإبلاغ عنها في الأدبيات لإعداد أنظمة eutectic العميقة. ولا يتم الإبلاغ عن ذلك في كثير من الأحيان في المخطوطات التقليدية.
ومن خلال هذا الإجراء، ستكون آنا ريتا جاميرو، زميلة ما بعد الدكتوراه في مختبري. لإعداد DES الطبيعية عن طريق تجميد التجفيف، أولا إضافة غرامين من مونوهيدرات حمض الستريك و 0.9530 غرام من مونوهيدرات الجلوكوز في حاويات منفصلة. إضافة 10 ملليلتر من المياه ديوند إلى كل حاوية ويحرك حتى يتم حل المركبات تماما.
امزج الحلين معًا واضمن تجانس الحل النهائي. ضع الحل في قارورة مستديرة القاع. تجميد العينة باستخدام النيتروجين السائل.
ضع القارورة في مجفف التجميد لمدة 48 ساعة لضمان إزالة جميع المياه من العينة. لإعداد DES الطبيعية عن طريق تبخر فراغ، مرة أخرى تزن غرامين من حمض الستريك أحادية الهيدرات و 0.9530 غرام من مونوهيدرات الجلوكوز في حاويات منفصلة. إضافة 10 ملليلتر من المياه الأيونية إلى كل ويحرك حتى يتم حل المركبات تماما.
امزج الحلين معاً وتأكّد من تجانس الحل. ضع الحل المشترك في قارورة مستديرة القاع. باستخدام المبخر الدوار ، يجف العينة حتى يتم تشكيل سائل لزج واضح.
ويمكن أيضا أن تكون عينة DES الطبيعية التي أعدت عن طريق التدفئة والتحريك. للقيام بذلك، تزن غرامين من حمض الستريك أحادية الهيدرات، 0.9530 غرام من مونوهيدرات الجلوكوز في حاويات منفصلة. ضعي المواد الصلبة في نفس القارورة.
إضافة 278 ميكرولترات من الماء. ضع القارورة مع شريط مثير مغناطيسي في حمام مائي 50 درجة مئوية. اترك العينة حتى يتم تشكيل سائل لزج واضح.
لتوصيف DES الطبيعية عن طريق المجهر البصري المستقطب، ضع قطرة من DES الطبيعية على شريحة زجاجية المجهر للمراقبة. ويمكن أن تتميز عينة DES الطبيعية كذلك من قبل كارل فيشر المعايرة، وقياسات التفحص التفاضلي، والرنين المغناطيسي النووي كما هو موضح في بروتوكول النص. عند استخدام طريقة التجميد والتجفيف لإعداد DES الطبيعية ، يجب أن تكون النتيجة عجينة صلبة أو كثيفة للغاية منذ إزالة جميع المياه من النظام.
على العكس من ذلك، ينبغي أن يؤدي أسلوب التبخر في سائل واضح ولزج. استخدام طريقة التدفئة والتحريك مع إضافة كميات صغيرة من الماء وينبغي أيضا أن يؤدي إلى سائل واضح ولزج جدا. يتم عرض صور المجهر البصري المستقطبة مع المستقطبات المتقاطعة.
تم إعداد عينات DES الطبيعية بواسطة طريقة التدفئة والتحريك ، وطريقة تبخر الفراغ ، وطريقة التجميد والتجفيف. كما تظهر صور المجهر البصري المستقطبة لعينات DES الطبيعية مع المستقطبات المتوازية. وتستخدم تقنية NMR لتأكيد وجود تكوين رابطة الهيدروجين، وهو السمة الرئيسية لنظم DES الطبيعية.
ويمكن تأكيد ذلك من خلال مراقبة التغير والتحولات الكيميائية لكل إشارة في عينة DES الطبيعية نسبة إلى الجلوكوز وحمض الستريك وحده. يُظهر تحليل أطياف NOESY الارتباطات المكانية والبين الجزيئات، مما يؤكد تكوين رابطة الهيدروجين في نظام DES الطبيعي. عند محاولة تكرار تجربة لا يتم فيها الإبلاغ عن محتوى الماء، استخدم منهجية التبخر الدوارة وحدد محتوى المياه بواسطة معايرة كارل فيشر.
عندما يتم معرفة كمية الدقيق من الماء، اتبع طريقة التدفئة والتحريك لأن هذا هو أسهل وأسرع. من المهم دائماً قياس كمية المياه الموجودة في هذه الأنظمة والإبلاغ عنها في المخطوطات. وهذا يضمن للقراء استنساخ دقيق للنتائج.
هذه التقنية تمهد الطريق لمنهجية التنمية متسقة في إعداد المذيبات eutectic عميق الطبيعية ولا يقتصر على أي نظام معين. وينبغي النظر إلى النظم المعروضة هنا على أنها أمثلة.
