يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول العلاج القائم على الخلايا الجذعية للأمراض العصبية الطرفية، وخاصة بالنسبة للاعتلال العصبي الحنجرة المتكررة Equine. المزايا الرئيسية لهذه التقنية هي أن حصاد الخلايا الجذعية هو الحد الأدنى من الغازية، وأنه يمكن أيضا أن يتم نقل طريقة الحقن إلى الأعصاب الطرفية الأخرى. الآثار المترتبة على هذه التقنية تمتد إلى دراسات أخرى لأنواع الخلايا الأخرى، كما يمكن تمييز الخلايا الجذعية في خلايا أخرى ذات فائدة قبل الحقن.
إن البرهان المرئي لهذه الطريقة أمر بالغ الأهمية، حيث أن التحكم بالمنظار بالفيديو في حركات الحنجرة والتلاعب بتقنيات تحفيز الأعصاب قد يكون من الصعب تعلمه. تحديد موقع العينة في الرأس الطويل من العضلات ثلاثية الرؤوس عن طريق الفحص البصري والجس، حول خط الوسط بين نقطة الكوع ونقطة الكتف. استخدم المقصات الكهربائية لحلاقة منطقة سنتيمترين تقريبًا ، وتطبيق فرك جراحي يتكون من الصابون السائل متعدد اليودد وكمادات الكحول لمدة دقيقة واحدة على الجلد المكشوف.
باستخدام إبرة قياس 25 ، يحقن تحت الجلد ملليلتر واحد من محلول 2٪ ليدوكاين في وسط المنطقة المطهرة. بعد تطهير مع صابون اليد المضادة للبكتيريا نظيفة، وارتداء قفازات معقمة، ووضع إبرة خزعة قياس 14 شبه التلقائي على الستائر العقيمة المتاح، وسحب على آلية الربيع لتسليح الإبرة. تجميع قنية ومزيل في موقف مغلق لتشكيل trochar، وإدخال trochar عموديا من خلال الجلد desensitized، ما يقرب من 1.5 سم في الأنسجة العضلية تحتية.
ثم إزالة trochar، ووضع المُزخرف على ستارة معقمة. أدخل الإبرة من خلال القنية. بعد ذلك ، أدخل الإبرة والعنب من خلال شق الجلد في العضلات ، حتى تكون طرف الإبرة في منتصف الرأس الطويل للعضلات الثلاثية.
ثم حرر إبرة الخزعة، واسحب الإبرة والقنية من العضلة معًا، وأزل الإبرة من القنية. سحب الربيع بيد واحدة في حين عقد الإبرة مع اليد الأخرى، حتى يصبح العينة مرئية في غيض من إبرة خزعة. مع مساعدة من مساعد، وفتح أنبوب عينة تحتوي على متوسط عينة، واستخدام 19 قياس hypodermic إبرة لنقل قطعة العضلات الصغيرة من إبرة خزعة في المتوسطة أخذ العينات.
أغلق الأنبوب بغطاء المسمار، وإمالة الأنبوب مرتين بلطف للتأكد من أن العينة تطفو في الوسط. ثم إعادة تسليح إبرة الخزعة وإعادة إدخال القنية من خلال شق الجلد لجمع اثنين إلى ثلاث عينات أخرى حتى تم الحصول على ما يقرب من 20 ملليغرام من الأنسجة العضلية. لحقن الخلايا، بعد تسخين تعليق الخلية إلى درجة حرارة الغرفة، يتبخر مليلتر واحد من الخلايا في حقنة مليلتر وتأكيد أن الحصان هو في وضعية الرأس إلى الأسفل التي تدل على التدفير الكامل.
بعد ذلك، مقطع منطقة 20 في عشرة سنتيمترات على منطقة الحنجرة اليسرى، وتطبيق فرك الجراحية من الصابون متعدد يوديد والكحول إلى المنطقة المعرضة. ضع منظار فيديو قياسي مرن عبر النار الأيسر للحصان نحو البلعوم الأنفي ، وضبط موضع المنظار حتى يتم الحصول على رؤية كاملة لكل من الغضاريف الأهرئية وepiglottis. قم بتوصيل إبرة حقن التحفيز بالأقطاب الكهربائية السلبية للمحفز العصبي.
قم بتوصيل الحقنة التي تحتوي على تعليق الخلية بخط الحقن، وملء الأنبوب مسبقًا لطرد الهواء من النظام. قم بتوصيل القطب الموجب للأعصاب المحفز إلى رقعة القطب التي سيتم التمسك بها في منطقة الجلد المكشوف. تحميل حقنة مع حجم من محلول ملحي عقيم يساوي حجم المعبأة مسبقا من الأنبوب، وإدخال إبرة حقن التحفيز نحو الجانب الظهرية من الحنجرة، بدءا من محفز العصب في وضع التحفيز هيرتز واحد، مع تيار من milliamps اثنين عند الاقتراب من الجانب الجانبي الظهرية من الحنجرة.
حرك الإبرة بلطف نحو عصب الحنجرة المتكرر. بمجرد أن تكون حركة اختطاف الغضروف الارئيئي الأيسر مرئية ، قلل من التيار ، حتى تختفي الحركة ، مع الحفاظ على الإبرة في مكانها. عندما لوحظ فقدان الاستجابة الحركية في 0.5 مللي امبيبس, الحفاظ على موقف إبرة, وحقن ملليلتر واحد من الخلايا الجذعية الذاتية, تليها كامل حجم المالحة المعدة مسبقا.
الحفاظ على الإبرة في وضع مستقر خلال هذه العملية، كما يتم التحكم في المسافة إلى الأعصاب من قبل التيارات التي تنتج استجابة حركية وحركات صغيرة من الإبرة قد تنتج فقدان مفاجئ للاستجابة. ثم إزالة الإبرة والمنظار، والسماح للحصان لاسترداد مع الرصد. في الدراسات السابقة، لم تلاحظ أي ردود فعل سلبية أثناء أو بعد أخذ العينات، كما لم يلاحظ أي التهاب أثناء أو بعد التحفيز أو حقن الخلايا الجذعية.
علاوة على ذلك، لم يتم قياس أي اختلافات بين درجات ما قبل الحقن لوظائف الحنجرة، والعشرات التي تم الحصول عليها في الأيام الأولى والسابعة والثامنة والعشرين بعد حقن الخلايا الجذعية. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن نتذكر أن إجراء جمع الخلايا الجذعية غير باضعة ويسمح بثقافة عدد كبير من الخلايا الجذعية الميسينشية الذاتية في فترة قصيرة من الزمن. بعد هذا الإجراء، يمكن تنفيذ طرق أخرى، مثل حقن الخلايا المتمايزة مسبقًا، للإجابة على أسئلة إضافية حول ما إذا كانت خلايا شوان أكثر عرضة للمساهمة في تحديد الأعصاب.
بعد تطورها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في الطب التجديدي لاستكشاف استخدام الخلايا الجذعية في اعتلال الأعصاب الحنجرة المتكررة Equine.
