Piroptozun Flow Sitometri ile İncelenmesi

Araştırma ekibimizin amacı, kuş hücrelerinin memeli hücrelerine benzer bir piroptoz geçirip geçirmediğini belirlemektir. Ayrıca, piroptozu daha doğru ve daha kolay yollarla belirlemeyi amaçlıyoruz. Kuş türlerindeki birçok gen, memelilerdekinden önemli ölçüde farklıdır, bu da memeli hücre çalışmalarında kuş hücresi ölümü araştırmaları için yaygın olarak kullanılan reaktiflerin kullanılmasını zorlaştırır.

Bu nedenle, kuş hücresi ölümü üzerine yapılan araştırmalar, insan veya fare hücreleri üzerinde yapılan araştırmalardan çok daha zordur. Piroptozun belirlenmesi için akış sitometrik tabanlı bir strateji geliştirmek için gasdermin N-terminal fragmanları tarafından oluşturulan piroptotik hücrelerdeki karakteristik plazma membran gözeneklerini kullanıyoruz. Bu yeni yaklaşımla, kuş hücrelerinde enfeksiyöz-bursal hastalığa bağlı piroptoz oluşumunu gözlemledik.

Western blot veya AFM analizi gibi önceki yöntemlerin aksine, protokolümüz piroptotik hücrelerin yüzdesini aynı anda iki parametre ile doğru bir şekilde ölçebilir: plazma zarı gözenek oluşumu ve plazma zarı yırtılması, piroptozlu hücreleri diğer hücre ölümü formlarından ayırt etmeyi kolaylaştırır.