Nöronal Hücre Modellerinde Mitokondriyal İç Membran Üst Yapısını Görselleştirmek için Canlı Hücre STED Görüntülemenin Kullanılması

Araştırma programımız, özellikle yaşlanmaya bağlı işlev bozukluğu ile ilgili olarak mitokondrinin yapısal ve işlevsel yönlerine odaklanmaktadır. Bu amaçla, mitokondriyal yaşlanmanın temel mekanizmalarını keşfetmek ve mitokondriyal sağlığı korumak ve eski haline getirmek için terapötik müdahaleler geliştirmek için çok çeşitli biyofiziksel, biyokimyasal ve yapısal teknikler kullanıyoruz. Mitokondriyal fonksiyon ve yapı ayrılmaz bir şekilde ilişkilidir.

Standart ışık mikroskobu teknikleri, temel morfoloji ve ağ yapıları gibi büyük ölçekli mitokondriyal özellikleri ölçmek için uygundur. Geleneksel optik mikroskopi tarafından sağlanandan daha yüksek çözünürlük gerektiren mitokondriyal ultra yapı veya özelliklerin analizi, tipik olarak sabit numuneler üzerinde elektron mikroskobu veya tomografi kullanılarak yapılır. Süper çözünürlüklü mikroskopi, kırınım sınırının ötesindeki özellikleri ölçen floresan tabanlı bir görüntüleme tekniğidir.

Mitokondri için bu, nano ölçekli protein dağılımı ve cristae mimarisinin ölçümlerini içerir. Burada açıklanan sabit görüntüleme protokolü, araştırmacıların canlı hücrelerdeki iç zarın ayrıntılı yapısını ölçmelerine olanak tanır. Canlı hücre görüntüleme, numune fiksasyonuna gerek kalmadan fizyolojik olarak ilgili koşullar altında cristae'nin karmaşık özelliklerini gözlemlememize ve kantitatif olarak analiz etmemize olanak tanır.

Bu, araştırmacılara ultra yapısal özelliklerde meydana gelen dinamik değişiklikler ve bunların stresörlere ve farmakolojik bileşiklere zamansal tepkileri hakkında yeni bilgiler verecektir.