Gen fonksiyonunun analizi için soya fasulyesi tüylü kök transformasyonu

Soya fasulyesi tüylü kök transformasyon yöntemimiz, birkaç genin veya ağın işlevlerini aynı anda incelemek için yeterlidir ve uzun vadeli kararlı dönüşüm yaklaşımlarına geçmeden önce en uygun mühendislik stratejilerini belirleyebilir. Soya fasulyesi tüylü kök dönüşümü, soya fasulyesi bitkilerinde gen fonksiyonunun analizi için yararlı bir araçtır. Şu anda kullanılan teknoloji, CRISPR-Cas9 genom düzenleme, RNA girişimi, transkriptomik ve proteomik ve görüntüleme teknolojilerini içerir.

Fonksiyonel genomiğin model çağındaki en büyük zorluk, sayısız genin işlevini analiz etmek yeterlidir. Çoğu gen polijeniktir ve birçok genin etkileşimi ile elde edilir. Tüylü kök protokolümüz, poligenik ağların anlaşılmaya başlayabilmesi için yeterli verim ile gen fonksiyon analizini kolaylaştıracaktır.

Agrobacterium rhizogene suşlarında Ti plazmidinin önemini belirledik. Ti plazmidi için tarama yapılmadan, dönüştürülmüş soya fasulyesi kotiledonunun herhangi bir renk üretememe riskini artırdığını bulduk. Sonuç olarak, plazmid taraması dönüşümden önce hayati bir adım haline geldi.

Diğer gen ekspresyon teknikleriyle karşılaştırıldığında, saç kökü ekspresyon sistemimizin kullanımı kolaydır, daha az zaman alır ve uygun maliyetlidir. Ayrıca, yeni protokolümüz, kotiledon dönüşümünden önce Ti plazmid ve agrobakteriyi kontrol ederek tüylü kök dönüşüm oranını% 50'ye kadar iyileştirmiştir. Bir düzineden fazla transkripsiyon faktörü geninin işlevini karakterize ederek, son sonuçlarımız bitkilerde değerli fitoaleksin metabolitlerinin biyosentezinin kilidini açmayı amaçlayan çok genli mühendislik çalışmalarının yolunu açmıştır.

Gelecekte, fitoaleksinlerin biyosentezini düzenleyen transkripsiyon faktörü gen ağlarını incelemek için bu tüylü kök dönüşüm yöntemini kullanacağız. Bu yaklaşım, farmasötik ve tarımsal endüstriler için bu özel metabolitlerin üretimini arttırmak için kullanılabilir.