Yazarlar Dr Robert Dotson Tulane Üniversitesi bölümü hücre ve moleküler biyoloji el yazması düzenleme'onun yardım ve Dr James Bollinger, Tulane Üniversitesi Kimya bölümü onun yardım için yardım kabul Kütle spektrometresi protokol tasarımı ile. Yazarlar ayrıca, Tulane Üniversitesi bölümü hücre ve moleküler biyoloji ve kimya Tulane Üniversitesi bölümü verdikleri destek ve uzay ve ekipman kullanımı için kabul. Bu eser Tulane Üniversitesi Okulu bilim ve mühendislik C. Anderson için bir tütün ürünü yasal bilim araştırma bursu tarafından desteklenmiştir.

1. cihazın montajı
<ol><li>100 Buchner şişesi (şekil 1, #4) çelik yüzük için stand ve Kalsiyum klorür bir kurutucu hizmet etmek için 50 g ile doldurarak bir vakum bindirme oluşturma mL güvenli. Şişeye bir kauçuk ile delikli tıpa ile mühür, stoper kavşak parafin film ile sarın ve bir pipet delikten çalıştırın.</li>
	<li>Vinil tüp kullanarak, pipet tıpa t-kavşak hortum bağlayıcıyı uzanan bağlayın.</li>
	<li>Vinil tüp kullanarak, iki darbe ölçer (şekil 1, #2 ve #3) birbirine bağlanmak ve ikinci Darbe ölçer çıkışını t-kavşak hortum konektörüne bağlayın.</li>
	<li>Vinil tüp kullanarak, inhalasyon bağlantı noktası (şekil 1, #1) olarak hizmet etmek için ilk darbe ölçer giriş bağlayınız.</li>
	<li>Vinil tüp, kullanarak bağlan Buchner şişeye yan kol bir hava akımı regülatörü (şekil 1, #7) giriş portuna ve bir vakum pompası hava akımı Regülatöre çıkış bağlantı noktası.</li>
	<li>Devre şeması şekil 2Aiçinde göre bir araya getirin.</li>
	<li>BS1 mikroişlemci (şekil 1, #6) için PBASIC program SVL.bs1 (şekil 2B, https://github.com/ChastainAnderson/SVL da mevcuttur) seri bir adaptör ve üretici yazılımı aracılığıyla yüklemek.</li>
	<li>Yer 510 dişli Bankası (şekil 1 #8) bir halka ayağa kelepçe.</li>
	<li>Vinil tüp kullanarak, solenoid valfi (şekil 1, #5) t-kavşak hortum bağlayıcı ücretsiz ucunu bağlayın. Not: Cihazın tam ve işlem için hazır, onlar sıkı hava vardır ve hortum kelepçeleri ve gerektiği gibi vakum gres uygulayın emin olmak için tüm eklemleri kontrol.</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56709/56709fig2.jpg"> Şekil 2: Elektrik şematik ve PBASIC kod. Şekil 2A görüntüler normalde açık solenoid Vana etkinleştirmek için gereken elektrik devresi montaj için elektrik şematik ve Isıtma bobin düğmesinin elektronik sigara aktif (510 dişli elektronik Sigara tank temel). Elektrik parametreleri Isıtma bobin (P: güç; R: direnç; ve ı: akım) tahmin ediliyor ve ampirik bir multimetre sonrası derleme ile doğrulanmış olmalıdır. Şekil 2B şekil 2A (Ayrıca https://github.com/ChastainAnderson/SVL kullanılabilir) devrede kontrol için gerekli PBASIC zamanlama programı görüntüler. Zamanlama sabitler SVT & IPT (#5 & #6) ms birimleridir ve bir etkinleştirme süresinin 2 saniye ve 28 devre dışı kaldığında sağlamak için küme s. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56709/56709fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
2. örnek depolama ve hazırlama
<ol><li>Tüm açılmamış geleneksel ve elektronik sigara örnekleri karanlık oda sıcaklığında hava geçirmez plastik torbalarda saklayın.</li>
	<li>Bir kez açıldı, örnekleri, 4 ºC, aşırı nem absorbe kağıt havlu ile hava geçirmez plastik torbalarda saklayın.</li>
	<li>Oda sıcaklığında humidor ~ %60 nem, tüm örnekleri için en az 30 dakika kullanmak için önceden önceden equilibrate.</li>
</ol>3. genel işleyişi sigara duman/elektronik sigara Aerosol ayıklama aygıtı
<ol><li>Her e-sigara cartomizer/tank pre-vaping bir analitik denge kullanarak kitle belirlemek. Öncesi/sonrası sonrası vaping ağırlık farkı uygun dozaj belirlemek için kullanılır. Not: 3R4F başvuru sigara 0.7 mg nikotin içeren varsayılır ve ticari sigara markaları nikotin içeriğini geleneksel analitik yöntemleri13tarafından belirlenebilir.</li>
	<li>Örnek uygulama 1 için birincil darbe ölçer rezervuarı endotel hücre kültür orta 4.3 mL ile doldurulması. Örnek uygulama 2 için aseton ile 5 mL rezervuar doldurun.</li>
	<li>
Elektronik sigara veya geleneksel sigara çıkarılması için hazırlayın:
	<ol>
<li>Geleneksel sigara kullanıyorsanız, filtre etrafında net bant parçası uygulamak ve sigara kağıdı filtre ile birleştiği kolayca görünür bir işareti koymak.</li>
		<li>Bir sigara gibi e-sigara kullanıyorsanız, pil de doludur ve cartomizer sıkı bir şekilde pil için vidalı emin olun.</li>
		<li>Bir elektronik sigara tankı kullanıyorsanız, uygun bir elektronik sigara sıvı hacmi içinde belgili tanımlık tank yüklendiğinden emin olun ve tank 510 dişli Bankası üzerine vida.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Geleneksel ya da elektronik sigara ucu (şekil 1, #1) inhalasyon portuna takın ve bir hortum kelepçesi ile güvenli.</li>
	<li>Vakum pompası açmak.</li>
	<li>Debimetre 1.65 M/dakika 2 saniye içinde 55 mL puf sağlamak için çekmek için ayarlayın.</li>
	<li>Mikrodenetleyici üzerinde açın. Geleneksel sigara kullanıyorsanız, ilk puf üzerinde sigara yak.</li>
	<li>Öngörülen kadar çalışma istenilen konsantrasyonu (parçalar milyon veya % başına ağırlık/hacim) elde edilir.</li>
	<li>
Her e-sigara cartomizer/tank kitle sonra buharlaşma bir analitik denge kullanarak belirleyin. Bu ölçüm kitle tüketilen toplam belirlemek için adım 3.1 geçen ölçüme karşılaştırın. Tüketilen kütle/solvent hacmi konsantrasyonu hesaplayın. Tüketilen nikotin molar konsantrasyonu ürünler arasında normalleştirmek için kullanın.
	<ol>
<li>Yetersiz bir kütle tüketilen varsa, aygıta elektronik sigara dönüp daha fazla tüketmek.</li>
		<li>Yeterli veya aşırı kitle tüketilen, devam edin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. filtrasyon ve depolama
<ol><li>Özü hücre kültürü için kullanılmak üzere, 0,22 µm PES şırınga filtre ile filtre.</li>
	<li>Özler hemen kullanın veya-80 ºC saklayabilirsiniz. Anderson, et al. hazırlıkları kapsamında 8, elektronik sigara aerosol en az iki hafta boyunca istikrarlı olması için gösterilmiştir ve iki yıla kadar dumanı kararlılığını Crooks, et al. kurulmuş olup 13.</li>
</ol>5. cihaz Temizleme
<ol><li>Her çıkarma sonra tüp durulama ve rezervuar % 70 etanol ve önlemek için deiyonize su ile cihazın örnekleri arasında taşımak.</li>
	<li>Durulama, kısaca kurutma hatları yardımcı olmak için hava akımı sağlamak için boş aygıtı çalıştırmak takip.</li>
</ol>6. örnek uygulama 1: Nötr kırmızı alımını hücre canlılığı tahlil
<ol><li>Özü endotel hücre büyüme ortamının 4.3 mL içine yukarıdaki gibi gerçekleştirin.</li>
	<li>Bir gün önce insan göbek damar endotel hücreleri, 1 x 104 hücreleri wellin/100 µL endotel hücre büyüme ortamının yoğunluğu 96 iyi tabak içine tohum.</li>
	<li>Ya 100 µL bir denetim olarak hizmet etmek için taze endotel hücre kültür ortamının veya 75 µL endotel hücre büyüme orta 2 mM tüketilen nikotin konsantrasyon özü (1,4 mg 25 µL ile karışık ile eski endotel hücre kültür orta değiştirerek hücreleri tedavi nikotin 4.3 mL endotel hücre büyüme orta tüketilen) için tedavi olarak hizmet etmek için 500 µM son bir konsantrasyon.</li>
	<li>Her iki sigara duman ve elektronik sigara aerosol bileşenlerin çoğu uçucu olduğundan, bir folyo mühür kuyuları hava geçirmez tutmak için kullanın.</li>
	<li>18-24 h plaka kuluçkaya 37 ° C ve % 5 CO2.</li>
	<li>
Tarafsız kırmızı çözüm boyama hazırlayın:
	<ol>
<li>33 mg 10 mL tamponlu tuz çözeltisi içine tarafsız kırmızı boya çözülerek 100 x nötr kırmızı hisse senedi çözüm oluşturun.</li>
		<li>Kısa bir süre önce kullanma, 1 x nötr kırmızı çözüm boyama oluşturmak için hücre kültürü ortamında hisse senedi çözüm 1: 100 x 100 oranında seyreltin.</li>
		<li>Tarafsız kırmızı çözüm en az 30 dk önce kullanım ve kullanım için 37 ° C'de hemen boyama kuluçkaya. Not: Bazı kristaller kuluçka sırasında çökelti normaldir. Bu kristaller hücre kültür wells uygulamaktan kaçının için özen gösterilmelidir. Gerekirse, bir 22'lik µm filtre tarafsız kırmızı stok ve boyama çözümleri filtre uygulamak için kullanılabilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Özü kaldırın ve tarafsız kırmızı çözüm de, en az üç boş kuyular için uygun miktar oluşturmak için aşırı kullanım başına boyama 100 µL ekleyin.</li>
	<li>2-4 h 37 ° C ve % 5 CO2plaka kuluçkaya.</li>
	<li>Tarafsız kırmızı çözüm boyama kaldırmak ve 3 x tarafından PBS batma yıkayın.</li>
	<li>Tarafsız kırmızı geçerli çözüm (%50 deiyonize su, % 49 etanol, % 1 Asetik asit) de-leke.</li>
	<li>En az 10 dk sallayarak ile oda sıcaklığında kuluçkaya.</li>
	<li>540 Absorbans okumak nm.</li>
	<li>Boş wells ortalama değeri çıkarılarak ve boş ayarlanan kontrol iyi değeri ortalama normalleştirme tarafından veri analiz.</li>
</ol>7. örnek uygulama 2: Gaz Kromatografi Kütle spektrometresi
<ol><li>Çıkarma olarak yukarıda içine 5 mL aseton gerçekleştirin.</li>
	<li>~ 100 parça son bir konsantrasyon ulaşmak için aygıtı çalıştırmak milyon (e-sıvı tüketilen/hacmi aseton ağırlığını), örnek.</li>
	<li>Hassas cam şırınga kullanarak, 1 µL GC-MS aygıtı enjektör enjekte. 1:20 oranı ZB-5 sütun aşağıdaki fırın protokolü ile donatılmış bir eşleşmiş gaz Kromatograf/quadrupole Spektrometre sistemi içine split ile 250 ° C'de enjekte: 1 min 50 ° c; 10 ° C/140 ° C min rampa; 20 ° C/min 300 ° C için rampa ve 10 dakikadır tutun.</li>
	<li>Aerosol bileşenlerini tanımlamak için hedef kitaplığı için elde edilen kitle spectra aynı.</li>
</ol>

<ol>
	<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> WHO Report on the Global Tobacco Epidemic, 2011. , (2011).</li><li>Weaver, S. R., Majeed, B. A., Pechacek, T. F., Nyman, A. L., Gregory, K. R., Eriksen, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+electronic+nicotine+delivery+systems+and+other+tobacco+products+among+USA+adults,+2014:+results+from+a+national+survey.">Use of electronic nicotine delivery systems and other tobacco products among USA adults, 2014: results from a national survey.</a> Int. J. Public Health. 61 (2), 177-188 (2016).</li><li>Singh, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tobacco+Use+Among+Middle+and+High+School+Students+-+United+States,+2011–2015.">Tobacco Use Among Middle and High School Students - United States, 2011–2015.</a> MMWR Morb. Mortal. Wkly. Rep. 65 (14), 361-367 (2016).</li><li>Corey, C. G., Ambrose, B. K., Apelberg, B. J., King, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flavored+Tobacco+Product+Use+Among+Middle+and+High+School+Students--United+States,+2014.">Flavored Tobacco Product Use Among Middle and High School Students--United States, 2014.</a> MMWR Morb. Mortal. Wkly. Rep. 64 (38), 1066-1070 (2015).</li><li>Pisinger, C., D&#248;ssing, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+of+health+effects+of+electronic+cigarettes.">A systematic review of health effects of electronic cigarettes.</a> Prev. Med. 69, 248-260 (2014).</li><li>Callahan-Lyon, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electronic+cigarettes:+human+health+effects.">Electronic cigarettes: human health effects.</a> Tob. Control. 23 (Suppl 2), ii36-ii40 (2014).</li><li>Dinakar, C., O'Connor, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Health+Effects+of+Electronic+Cigarettes.">The Health Effects of Electronic Cigarettes.</a> N. Engl. J. Med. 375 (14), 1372-1381 (2016).</li><li>Anderson, C., Majeste, A., Hanus, J., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=E-cigarette+aerosol+exposure+induces+reactive+oxygen+species,+DNA+damage,+and+cell+death+in+vascular+endothelial+cells.">E-cigarette aerosol exposure induces reactive oxygen species, DNA damage, and cell death in vascular endothelial cells.</a> Toxicol. Sci. Off. J. Soc. Toxicol. , (2016).</li><li>U.S. Department of Health and Human Services. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Health Consequences of Smoking: 50 Years of Progress. A Report of the Surgeon General. , (2014).</li><li>Farsalinos, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+Cytotoxic+Potential+of+Cigarette+Smoke+and+Electronic+Cigarette+Vapour+Extract+on+Cultured+Myocardial+Cells.">Comparison of the Cytotoxic Potential of Cigarette Smoke and Electronic Cigarette Vapour Extract on Cultured Myocardial Cells.</a> Int. J. Environ. Res. Public. Health. 10 (10), 5146-5162 (2013).</li><li>Schweitzer, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+disruptive+proinflammatory+effects+of+nicotine+and+e-cigarette+vapor+exposures.">Endothelial disruptive proinflammatory effects of nicotine and e-cigarette vapor exposures.</a> Am. J. Physiol. - Lung Cell. Mol. Physiol. 309 (2), L175-L187 (2015).</li><li>Putzhammer, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vapours+of+US+and+EU+Market+Leader+Electronic+Cigarette+Brands+and+Liquids+Are+Cytotoxic+for+Human+Vascular+Endothelial+Cells.">Vapours of US and EU Market Leader Electronic Cigarette Brands and Liquids Are Cytotoxic for Human Vascular Endothelial Cells.</a> PLOS ONE. 11 (6), e0157337 (2016).</li><li>Crooks, I., Dillon, D. M., Scott, J. K., Ballantyne, M., Meredith, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+long+term+storage+on+tobacco+smoke+particulate+matter+in+in+vitro+genotoxicity+and+cytotoxicity+assays.">The effect of long term storage on tobacco smoke particulate matter in in vitro genotoxicity and cytotoxicity assays.</a> Regul. Toxicol. Pharmacol. 65 (2), 196-200 (2013).</li><li>Roemer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mainstream+Smoke+Chemistry+and+in+Vitro+and+In+Vivo+Toxicity+of+the+Reference+Cigarettes+3R4F+and+2R4F.">Mainstream Smoke Chemistry and in Vitro and In Vivo Toxicity of the Reference Cigarettes 3R4F and 2R4F.</a> Beitr. Zur Tab. Contrib. Tob. Res. 25 (1), (2014).</li><li>International Organization for Standards. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> ISO 3088:2012 Routine analytical cigarette smoking machine – Definitions and standard conditions. , (2012).</li><li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Standard Operating Procedure for Intense Smoking of Cigarettes. , (2012).</li><li>Brown, C. J., Cheng, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electronic+cigarettes:+product+characterisation+and+design+considerations.">Electronic cigarettes: product characterisation and design considerations.</a> Tob. Control. 23 (Suppl 2), ii4-ii10 (2014).</li><li>Cooperation Centre for Scientific Research Relative to Tobacco. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CRM No. 81 - Routine Analytical Machine for E-Cigarette Aerosol Generation and Collection - Definitions and Standard Conditions. , (2015).</li><li>Thorne, D., Adamson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+in+vitro+cigarette+smoke+exposure+systems.">A review of in vitro cigarette smoke exposure systems.</a> Exp. Toxicol. Pathol. 65 (7-8), 1183-1193 (2013).</li><li>Klus, H., Boenke-Nimphius, B., M&#252;ller, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cigarette+Mainstream+Smoke:+The+Evolution+of+Methods+and+Devices+for+Generation,+Exposure+and+Collection.">Cigarette Mainstream Smoke: The Evolution of Methods and Devices for Generation, Exposure and Collection.</a> Beitr. Zur Tab. Contrib. Tob. Res. 27 (4), (2016).</li><li>Baker, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Development+and+Significance+of+Standards+for+Smoking-Machine+Methodology.">The Development and Significance of Standards for Smoking-Machine Methodology.</a> Beitr. Zur Tab. Contrib. Tob. Res. 20 (1), (2014).</li><li>Thorne, D., Crooks, I., Hollings, M., Seymour, A., Meredith, C., Gaca, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mutagenic+assessment+of+an+electronic-cigarette+and+reference+cigarette+smoke+using+the+Ames+assay+in+strains+TA98+and+TA100.">The mutagenic assessment of an electronic-cigarette and reference cigarette smoke using the Ames assay in strains TA98 and TA100.</a> Mutat. Res. Toxicol. Environ. Mutagen. 812, 29-38 (2016).</li><li>Thorne, D., Larard, S., Baxter, A., Meredith, C., Ga&#1195;a, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+comparative+in+vitro+assessment+of+e-cigarette+and+cigarette+smoke+aerosols+using+the+&#947;H2AX+assay+and+applied+dose+measurements.">The comparative in vitro assessment of e-cigarette and cigarette smoke aerosols using the &#947;H2AX assay and applied dose measurements.</a> Toxicol. Lett. 265, 170-178 (2017).</li><li>Herrington, J. S., Myers, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electronic+cigarette+solutions+and+resultant+aerosol+profiles.">Electronic cigarette solutions and resultant aerosol profiles.</a> J. Chromatogr. A. 1418, 192-199 (2015).</li><li>Yu, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electronic+cigarettes+induce+DNA+strand+breaks+and+cell+death+independently+of+nicotine+in+cell+lines.">Electronic cigarettes induce DNA strand breaks and cell death independently of nicotine in cell lines.</a> Oral Oncol. 52, 58-65 (2016).</li><li>Ji, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+Electronic+Cigarette+Aerosol+and+Its+Induction+of+Oxidative+Stress+Response+in+Oral+Keratinocytes.">Characterization of Electronic Cigarette Aerosol and Its Induction of Oxidative Stress Response in Oral Keratinocytes.</a> PLOS ONE. 11 (5), e0154447 (2016).</li><li>Morgan, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+Reactivity+and+Respiratory+Toxicity+of+the+-Diketone+Flavoring+Agents:+2,3-Butanedione,+2,3-Pentanedione,+and+2,3-Hexanedione.">Chemical Reactivity and Respiratory Toxicity of the -Diketone Flavoring Agents: 2,3-Butanedione, 2,3-Pentanedione, and 2,3-Hexanedione.</a> Toxicol. Pathol. 44 (5), 763-783 (2016).</li><li>Cooperation Centre for Scientific Research Relative to Tobacco. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CRM No. 84 - Determination of Glycerin, Propylene Glycol, Water, and Nicotine in the Aerosol of E-Cigarettes by Gas Chromatographic Analysis. , (2017).</li></ol>

Tulane Üniversitesi tarafından yönetilen tütün ürünü yasal bilim araştırma bursu programı Altria müşteri hizmetleri düzenleyici işleri tarafından finanse edilmektedir.

Bu iletişim kuralı en kritik unsurları cihaz temiz başında olduğunu kontrol ettikten ve her çıkarımı bitirmek ve tüm mühürler kadar korunmasını sağlamak bu hava akımı tutarlı kalır. Aygıt düzgün temizlenir değil ise, taşıma riski üzerinde örnekleri arasında. Ayrıca, cihazın zaman sıkıştırılmış aerosol uzun bir süre için kirli yaptı ve kurutulmuş solvent sistem engelleyebilirsiniz. Orada geleneksel sigara ve hava akımı şişirme bir basınç düşüşü olmak metre cihazı Oda h...

Sağlık kuruluşları tarafından yoğun bir çaba rağmen Sigara İçilmeyen1' e atfedilen bu ölümlerin çoğunluğu ile dünya çapında, önlenebilir ölüm önde gelen nedenidir tütün ürün kullanımı kalır. 2003'te pazara girme beri elektronik sigara tütün ürünü kullanıcıları arasında popülaritesi artıyor. Şu anda, elektronik sigara geleneksel sigara arasında Amerikan gençlerinin (~ %5)2 ve orta (% ~ 5.3) ve yüksek okul (~ %16)3arasında en popüler nikotin teslim sistemi için en popüler bir alternatif vardır. Eğer mevcut eğilimler devam, elektronik sigara geleneksel sigara gelecek nesiller için değiştirmek için beklenebilir. Ancak, elektronik sigara kullanımının sağlık sonuçları belirsiz kalır.
Elektronik sigara popülerlik hızla 20133,4' te arttı kadar elektronik sigara araştırmaya ciddi olarak başlatılmadı. O zamandan beri farklı modeller bir dizi onların toksisite soru adresi için istihdam edilmiştir. Ancak, birçok çalışma sonuçlarını çakışıyor ve elektronik sigara genellikle orada geleneksel sigara daha az toksik gibi görünüyor olsa da elektronik sigara sağlık sonuçları geçerli hiçbir birliğine kullanın5, 6 , 7. elektronik sigara damar endotel önemli ölçüde daha az toksik kıyasla, DNA hasarı ve oksidatif stres ve hücre ölüm8 indüksiyon neden yeteneklerini rağmen önceki araştırma gösterir . Ancak, elektronik sigara kullanımının sağlık sonuçları hakkında kesin sonuçlar sürükleyebilirsin önce daha fazla araştırma gereklidir.
Geleneksel sigara önlenebilir damar hastalığı9önde gelen nedenidir gibi işte elektronik sigara vasküler sağlık riski artan bir ilgi10,11,12kullanın. Damar sistemi elektronik sigara etkilerini incelemek amacıyla işletilen Mikrodenetleyici yasaktır/vaping aygıt (şekil 1)8laboratuarımıza geliştirdi. Sulu ya da organik çözücüler ya da geleneksel sigara duman ya da elektronik sigara sprey sıvı özleri üretme yeteneğine sahip bir cihazdır. Hava akımı bir ayarlanabilir hava akışı Regülatörü ve bir PBASIC zamanlama programı kombinasyonu tarafından kontrol edilir gibi cihazın özleri herhangi bir dizi kullanıcı tanımlı protokolü göre oluşturmak için kullanılabilir. Burada biz ayrıntılı olarak montaj ve işletme bu cihaz aynı zamanda iki potansiyel uygulamalar: vitro hücre canlılığı değerlendirme ve Gaz Kromatografi Kütle spektrometresi.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56709/56709fig1.jpg"> Şekil 1: yasaktır/Vaping cihaz. Şematik yasaktır/vaping aygıt içinde sigara/sigara elektronik sigara (e-cig) yapılandırma(a)gibi ve tank elektronik sigara yapılandırma (B) fiziksel Meclisi. Bileşen anahtarı: 1) inhalasyon bağlantı noktası; 2) birincil koleksiyonu darbe ölçer; 3) taşma darbe ölçer; 4) Buchner şişesi vakum tuzak; 5) normalde açık solenoid Vana; 6) BS1 Mikrodenetleyici; 7) hava akım regülatörü; 8) 510 elektronik sigara tank baz akıtılan. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56709/56709fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

<table><tbody><tr><td>12 V AC/DC Wall Mount Adaptor</td><td>Digi-Key</td><td>T1099-P5P-ND</td><td></td></tr><tr><td>2.2 Ohm Resistors</td><td>Digi-Key</td><td>A105635-ND</td><td>Used in tandem to generate the 4.4 Ohm resistance in Figure 2A</td></tr><tr><td>330 Ohm Resistors</td><td>Digi-Key</td><td>330QBK-ND</td><td></td></tr><tr><td>510 Threaded Base</td><td>NJoy</td><td>N/A</td><td>Recovered by dismantalling a second generation NJoy electronic cigarette</td></tr><tr><td>Acetic Acid, Glacial</td><td>Sigma-Aldritch</td><td>A6283</td><td></td></tr><tr><td>Acetone (Chromatography Grade)</td><td>Sigma-Aldritch</td><td>34850</td><td></td></tr><tr><td>Basic Stamp Project Board</td><td>Digi-Key</td><td>27112-ND</td><td>This board contains the BS1 Microcontroller, serial adaptor, power switch, and a barrel pin connector for the AC/DC Wall Mount Adaptor</td></tr><tr><td>Basic Stamp USB to Serial Adapter</td><td>Digi-Key</td><td>28030-ND</td><td>An optional component to allow the BS1 serial adaptor to communicate through USB</td></tr><tr><td>Buchner Flask (Vacuum Flask) 250 mL</td><td>VWR</td><td>10545-854</td><td></td></tr><tr><td>Clear Tape</td><td>3M</td><td>S-9783</td><td></td></tr><tr><td>Clear Vinyl Tubing, 3/8&quot; ID</td><td>Watts</td><td>443064</td><td></td></tr><tr><td>EGM-2 Endothelial Cell Culture Medium</td><td>Lonza</td><td>CC-3162</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Pharmco-Aaper</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>Flow Regulator</td><td>Dwyer</td><td>VFA-23-BV</td><td></td></tr><tr><td>Gas Chromatograph</td><td>Varian</td><td>450-GC</td><td></td></tr><tr><td>Glass Syringe, 10 mL</td><td>Sigma-Aldritch</td><td>Z314552</td><td></td></tr><tr><td>Glass Syringe, 10 &amp;micro;L</td><td>Hamilton</td><td>80300</td><td></td></tr><tr><td>High Vacuum Silicon Grease</td><td>Dow Corning</td><td>146355D</td><td></td></tr><tr><td>Hose Clamp</td><td>Precision Brand</td><td>35125</td><td></td></tr><tr><td>Human Umbilical Vein Endothelial Cells</td><td>ATCC</td><td>PCS-100-013&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Mass Spectrometer</td><td>Varian</td><td>300-MS</td><td></td></tr><tr><td>Midget Impinger</td><td>Chemglass</td><td>CG-1820-01</td><td></td></tr><tr><td>Neutral Red</td><td>Sigma-Aldritch</td><td>N4638</td><td></td></tr><tr><td>Paraffin Film</td><td>3M</td><td>PM-992</td><td></td></tr><tr><td>Plate Seal Roller</td><td>BioRad</td><td>MSR0001</td><td></td></tr><tr><td>Plate Seal; Foil</td><td>Thermo</td><td>276014</td><td></td></tr><tr><td>Ring Stand 20&quot;</td><td>American Educational Products</td><td>7-G15-A</td><td></td></tr><tr><td>Solenoid Valve (normally open)</td><td>US Solid</td><td>USS2-00081</td><td></td></tr><tr><td>Solid State Relay</td><td>Digi-Key</td><td>CLA279-ND</td><td></td></tr><tr><td>Stand Clamp</td><td>Eisco</td><td>CH0688</td><td></td></tr><tr><td>Syringe Filter, PES, 0.22 um</td><td>Millipore</td><td>SLGP033RS</td><td></td></tr><tr><td>Syringe, 10 mL</td><td>BD Syringe</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>Through Hole Stopper, Size 6</td><td>VWR</td><td>59581-287</td><td></td></tr><tr><td>Vacuum Pump</td><td>KNF Neuberger</td><td>N86KTP</td><td></td></tr></tbody></table>

a microcontroller operated device for the generation of liquid extracts from conventional cigarette smoke and electronic cigarette aerosol

Elektronik sigara orta ve yüksek okul arasında en popüler tütün ürünüdür ve yetişkinler arasında en popüler alternatif tütün ürünüdür. Yüksek kalite, tekrarlanabilir araştırma sonuçları elektronik sigara kullanımının kamu sağlık sorunları ortaya çıkan ve kanıt işçiliği düzenleyici İlkesi temelinde anlamak için önemlidir. Kağıtları, giderek artan sayıda elektronik sigara komisyonda görüşürken, işte küçük tutarlılık yöntemleri grupları ve sonuçları üzerinde çok az fikir birliği arasında. Burada, geleneksel sigara duman ve elektronik sigara aerosol özleri oluşturmak için kullanılan bir programlanabilir laboratuvar cihaz açıklayın. Bu protokol, ve ve detayları yönergeleri derleme ve işletme dedi aygıt için oluşturulan hulâsa iki örnek uygulamalar içinde kullanımını gösterir: bir vitro hücre canlılığı tahlil ve Gaz Kromatografi Kütle spektrometresi. Bu yöntem geleneksel sigara ve elektronik sigara arasında doğrudan karşılaştırmalar yapmak için bir araç sağlar ve elektronik sigara araştırma içine erişilebilir giriş noktasıdır.

24 saat içinde insan Umbilikal ven maruz kalma geleneksel sigara dumanı özü (CSE) veya elektronik sigara aerosol endotel hücreleri (EAE) özü, önemli bir şey (ÖAM P vs denetimi < 0,001 EAE P vs denetimi; < 0,01; n = 6) hücre canlılığı (şekil 3A) azalma. Özler 2, 2 saniye, dakika başına 55 mL puffs şişirme bir profil ile oluşturulan ve nikotin aygıt tarafından tüketilen temel alınarak molar konsantrasyonu normalleşti...

Watch this Scientific Journal Video about A Microcontroller Operated Device for the Generation of Liquid Extracts from Conventional Cigarette Smoke and Electronic Cigarette Aerosol at JoVE.com

A Microcontroller Operated Device for the Generation of Liquid Extracts from Conventional Cigarette Smoke and Electronic Cigarette Aerosol

Burada, geleneksel sigara duman ve elektronik sigara aerosol özleri oluşturmak için kullanılan bir programlanabilir laboratuvar cihaz açıklayın. Bu yöntem geleneksel sigara ve elektronik sigara arasında doğrudan karşılaştırmalar yapmak için yararlı bir araç sağlar ve elektronik sigara araştırma içine erişilebilir giriş noktasıdır.

Sıvı özleri geleneksel sigara duman ve elektronik sigara Aerosol gelen nesil için aygıt mikroişlemci işletilen

Electronic cigarettes are the most popular tobacco product among middle and high schoolers and are the most popular alternative tobacco product among ...

a-microcontroller-operated-device-for-generation-liquid-extracts-from

Research

JoVE Journal

Bioengineering

8.3K Görüntüleme.  Tulane University. Burada, geleneksel sigara duman ve elektronik sigara aerosol özleri oluşturmak için kullanılan bir programlanabilir laboratuvar cihaz açıklayın. Bu yöntem geleneksel sigara ve elektronik sigara arasında doğrudan karşılaştırmalar yapmak için yararlı bir araç sağlar ve elektronik sigara araştırma içine erişilebilir giriş noktasıdır.

Video: A Microcontroller Operated Device for the Generation of Liquid Extracts from Conventional Cigarette Smoke and Electronic Cigarette Aerosol

Isolation of Mouse Respiratory Epithelial Cells and Exposure to Experimental Cigarette Smoke at Air Liquid Interface

Pulmonary epithelial cells can be isolated from the respiratory tract of mice and cultured at air-liquid interface (ALI) as a model of differentiated respiratory epithelium. A protocol is described for isolating and exposing these cells to mainstream cigarette smoke (CS), in order to study epithelial cell responses to CS exposure. The protocol consists of three parts: the isolation of airway epithelial cells from mouse trachea, the culturing of these cells at air-liquid interface (ALI) as fully differentiated epithelial cells, and the delivery of calibrated mainstream CS to these cells in culture. The ALI culture system allows the culture of respiratory epithelia under conditions that more closely resemble their physiological setting than ordinary liquid culture systems. The study of molecular and lung cellular responses to CS exposure is a critical component of understanding the impact of environmental air pollution on human health. Research findings in this area may ultimately contribute towards understanding the etiology of chronic obstructive pulmonary disease (COPD), and other tobacco-related diseases, which represent major global health problems.

Pulmonary epithelial cells can be isolated from the respiratory tract of mice and cultured at air-liquid interface as a model of differentiated respiratory epithelium. A protocol is described for isolating, culturing and exposing these cells to mainstream cigarette smoke, in order to study molecular responses to this environmental toxin.

Hava Sıvı Arabirimi Fare Solunum Epitel Hücreleri ve Deneysel sigara dumanına maruz kalma izolasyonu

Pulmonary epithelial cells can be isolated from the respiratory tract of mice and cultured at air-liquid interface (ALI) as a model of differentiated ...

Tıp

A Protocol for Detecting and Scavenging Gas-phase Free Radicals in Mainstream Cigarette Smoke

Cigarette smoking is associated with human cancers. It has been reported that most of the lung cancer deaths are caused by cigarette smoking 5,6,7,12. Although tobacco tars and related products in the particle phase of cigarette smoke are major causes of carcinogenic and mutagenic related diseases, cigarette smoke contains significant amounts of free radicals that are also considered as an important group of carcinogens9,10. Free radicals attack cell constituents by damaging protein structure, lipids and DNA sequences and increase the risks of developing various types of cancers. Inhaled radicals produce adducts that contribute to many of the negative health effects of tobacco smoke in the lung3. Studies have been conducted to reduce free radicals in cigarette smoke to decrease risks of the smoking-induced damage. It has been reported that haemoglobin and heme-containing compounds could partially scavenge nitric oxide, reactive oxidants and carcinogenic volatile nitrosocompounds of cigarette smoke4. A 'bio-filter' consisted of haemoglobin and activated carbon was used to scavenge the free radicals and to remove up to 90% of the free radicals from cigarette smoke14. However, due to the cost-ineffectiveness, it has not been successfully commercialized. Another study showed good scavenging efficiency of shikonin, a component of Chinese herbal medicine8. In the present study, we report a protocol for introducing common natural antioxidant extracts into the cigarette filter for scavenging gas phase free radicals in cigarette smoke and measurement of the scavenge effect on gas phase free radicals in mainstream cigarette smoke (MCS) using spin-trapping Electron Spin Resonance (ESR) Spectroscopy1,2,14. We showed high scavenging capacity of lycopene and grape seed extract which could point to their future application in cigarette filters. An important advantage of these prospective scavengers is that they can be obtained in large quantities from byproducts of tomato or wine industry respectively11,13

Spin-trapping ESR spectroscopy was used to study the effect of plant antioxidants lycopene, pycnogenol and grape seed extract on scavenging gas-phase free radicals in cigarette smoke.

Serbest Radikaller Mainstream Sigara Duman algılama ve gaz faz Atma Protokolü

Cigarette smoking is associated with human cancers. It has been reported that most of the lung cancer deaths are caused by cigarette smoking 5,6,7,12.  ...

Biyomühendislik

Bridging the Bio-Electronic Interface with Biofabrication

Advancements in lab-on-a-chip technology promise to revolutionize both research and medicine through lower costs, better sensitivity, portability, and higher throughput. The incorporation of biological components onto biological microelectromechanical systems (bioMEMS) has shown great potential for achieving these goals. Microfabricated electronic chips allow for micrometer-scale features as well as an electrical connection for sensing and actuation. Functional biological components give the system the capacity for specific detection of analytes, enzymatic functions, and whole-cell capabilities. Standard microfabrication processes and bio-analytical techniques have been successfully utilized for decades in the computer and biological industries, respectively. Their combination and interfacing in a lab-on-a-chip environment, however, brings forth new challenges. There is a call for techniques that can build an interface between the electrode and biological component that is mild and is easy to fabricate and pattern.
Biofabrication, described here, is one such approach that has shown great promise for its easy-to-assemble incorporation of biological components with versatility in the on-chip functions that are enabled. Biofabrication uses biological materials and biological mechanisms (self-assembly, enzymatic assembly) for bottom-up hierarchical assembly. While our labs have demonstrated these concepts in many formats 1,2,3, here we demonstrate the assembly process based on electrodeposition followed by multiple applications of signal-based interactions. The assembly process consists of the electrodeposition of biocompatible stimuli-responsive polymer films on electrodes and their subsequent functionalization with biological components such as DNA, enzymes, or live cells 4,5. Electrodeposition takes advantage of the pH gradient created at the surface of a biased electrode from the electrolysis of water 6,7,. Chitosan and alginate are stimuli-responsive biological polymers that can be triggered to self-assemble into hydrogel films in response to imposed electrical signals 8. The thickness of these hydrogels is determined by the extent to which the pH gradient extends from the electrode. This can be modified using varying current densities and deposition times 6,7. This protocol will describe how chitosan films are deposited and functionalized by covalently attaching biological components to the abundant primary amine groups present on the film through either enzymatic or electrochemical methods 9,10. Alginate films and their entrapment of live cells will also be addressed 11. Finally, the utility of biofabrication is demonstrated through examples of signal-based interaction, including chemical-to-electrical, cell-to-cell, and also enzyme-to-cell signal transmission. 
Both the electrodeposition and functionalization can be performed under near-physiological conditions without the need for reagents and thus spare labile biological components from harsh conditions. Additionally, both chitosan and alginate have long been used for biologically-relevant purposes 12,13. Overall, biofabrication, a rapid technique that can be simply performed on a benchtop, can be used for creating micron scale patterns of functional biological components on electrodes and can be used for a variety of lab-on-a-chip applications.

This article describes a biofabrication approach: deposition of stimuli-responsive polysaccharides in the presence of biased electrodes to create biocompatible films which can be functionalized with cells or proteins. We demonstrate a bench-top strategy for the generation of the films as well as their basic uses for creating interactive biofunctionalized surfaces for lab-on-a-chip applications.

Biofabrication ile Bio-Elektronik Arayüz Bridging

Advancements in lab-on-a-chip technology promise to revolutionize both research and medicine through lower costs, better sensitivity, portability, and ...

Generation of Electronic Cigarette Aerosol by a Third-Generation Machine-Vaping Device: Application to Toxicological Studies

Electronic-cigarette (e-cig) devices use heat to produce an inhalable aerosol from a liquid (e-liquid) composed mainly of humectants, nicotine, and flavoring chemicals. The aerosol produced includes fine and ultrafine particles, and potentially nicotine and aldehydes, which can be harmful to human health. E-cig users inhale these aerosols and, with the third-generation of e-cig devices, control design features (resistance and voltage) in addition to the choice of e-liquids, and the puffing profile. These are key factors that can significantly impact the toxicity of the inhaled aerosols. E-cig research, however, is challenging and complex mostly due to the absence of standardized assessments and to the numerous varieties of e-cig models and brands, as well as e-liquid flavors and solvents that are available on the market. These considerations highlight the urgent need to harmonize e-cig research protocols, starting with e-cig aerosol generation and characterization techniques. The current study focuses on this challenge by describing a detailed step-by-step e-cig aerosol generation technique with specific experimental parameters that are thought to be realistic and representative of real-life exposure scenarios. The methodology is divided into four sections: preparation, exposure, post-exposure analysis, plus cleaning and maintenance of the device. Representative results from using two types of e-liquid and various voltages are presented in terms of mass concentration, particle size distribution, chemical composition and cotinine levels in mice. These data demonstrate the versatility of the e-cig exposure system used, aside from its value for toxicological studies, as it allows for a broad range of computer-controlled exposure scenarios, including automated representative vaping topography profiles.

Electronic cigarette (e-cig) users are increasing worldwide. Little, however, is known about the health effects induced by inhaled e-cig aerosols. This article describes an e-cig aerosol generation technique suitable for animal exposures and subsequent toxicological studies. Such protocols are required to establish experimentally reproducible and standardized e-cig exposure systems.

Elektronik Sigara Aerosol üçüncü nesil makine-Vaping aygıt tarafından nesil: toksikolojik çalışmalar uygulamaya

Electronic-cigarette (e-cig) devices use heat to produce an inhalable aerosol from a liquid (e-liquid) composed mainly of humectants, nicotine, and ...

Kimya

Use of Capillary Aerosol Generator in Continuous Production of Controlled Aerosol for Non-Clinical Studies

The capillary aerosol generator (CAG) is operated with the principal of thermal liquid evaporation through heating of e-liquid in the initial phase, followed by nucleation and condensation regulated through a mixture of airflow to generate aerosols, such as in an electronic cigarette (EC). The CAG is particularly useful in generating aerosols of large volumes in a continuous manner, for instances such as in vivo inhalation toxicology studies, where usage of ECs is not feasible. The thermal effects of generating aerosol from the CAG are similar in terms of temperature applied in an EC, thus allowing investigators to assess the vapors of e-liquids at scale and reproducibility. As the operation of the CAG allows users to control critical parameters such as the flow rate of e-liquid, heating temperatures and dilution air flows, it allows investigators to test various e-liquid formulations in a well-controlled device. Properties, such as aerosol particle size, are demonstrated to be regulated with the air flow rate with respect to the e-liquid flow and e-liquid composition. The CAG, however, is limited in assessing common EC-related issues, such as overheating of its elements. We seek to demonstrate that the CAG can generate aerosol that is reproducible and continuous, by assessing the chemical and physical aerosol characteristics with a chosen e-liquid formulation. The protocol describes the operating parameters of liquid flow rate, dilution air-flow rates and operating procedures needing to optimize the aerosol concentration and particle size required for an in vivo toxicology study. Presenting the representative results from the protocol and discussing the challenges and applications of working with a CAG, we demonstrate that CAG can be used in a reproducible fashion. The technology and protocol, that has been developed from prior work, serve as a foundation for future innovations for laboratory-controlled aerosol generation investigations.

The protocol describes the settings and use of a capillary aerosol generator for continuous production of controlled aerosol from a multispecies liquid solution, suitable for steady large-volume aerosol delivery (e.g., in vivo inhalation studies).

Klinik Olmayan Çalışmalar için Kontrollü Aerosolün Sürekli Üretiminde Kapiler Aerosol Jeneratörünün Kullanımı

The capillary aerosol generator (CAG) is operated with the principal of thermal liquid evaporation through heating of e-liquid in the initial phase, ...

Mühendislik

A Versatile Kit Based on Digital Microfluidics Droplet Actuation for Science Education

This paper describes an educational kit based on digital microfluidics. A protocol for luminol-based chemiluminescence experiment is reported as a specific example. It also has fluorescent imaging capability and closed humidified enclosure based on an ultrasonic atomizer to prevent evaporation. The kit can be assembled within a short period of time and with minimal training in electronics and soldering. The kit allows both undergraduate/graduate students and enthusiasts to obtain hands-on experience in microfluidics in an intuitive way and be trained to gain familiarity with digital microfluidics.

We describe an educational kit that allows users to execute multiple experiments and gain hands-on experience on digital microfluidics.

Bilim Eğitimi için Dijital Mikroakışkanlar Damlacık Aktüasyonuna Dayalı Çok Yönlü Bir Kit

This paper describes an educational kit based on digital microfluidics. A protocol for luminol-based chemiluminescence experiment is reported as a ...

Automated Measurement of Pulmonary Emphysema and Small Airway Remodeling in Cigarette Smoke-exposed Mice

COPD is projected to be the third most common cause of mortality world-wide by 2020(1). Animal models of COPD are used to identify molecules that contribute to the disease process and to test the efficacy of novel therapies for COPD. Researchers use a number of models of COPD employing different species including rodents, guinea-pigs, rabbits, and dogs(2). However, the most widely-used model is that in which mice are exposed to cigarette smoke. Mice are an especially useful species in which to model COPD because their genome can readily be manipulated to generate animals that are either deficient in, or over-express individual proteins. Studies of gene-targeted mice that have been exposed to cigarette smoke have provided valuable information about the contributions of individual molecules to different lung pathologies in COPD(3-5). Most studies have focused on pathways involved in emphysema development which contributes to the airflow obstruction that is characteristic of COPD. However, small airway fibrosis also contributes significantly to airflow obstruction in human COPD patients(6), but much less is known about the pathogenesis of this lesion in smoke-exposed animals. To address this knowledge gap, this protocol quantifies both emphysema development and small airway fibrosis in smoke-exposed mice. This protocol exposes mice to CS using a whole-body exposure technique, then measures respiratory mechanics in the mice, inflates the lungs of mice to a standard pressure, and fixes the lungs in formalin. The researcher then stains the lung sections with either Gill&#8217;s stain to measure the mean alveolar chord length (as a readout of emphysema severity) or Masson&#8217;s trichrome stain to measure deposition of extracellular matrix (ECM) proteins around small airways (as a readout of small airway fibrosis). Studies of the effects of molecular pathways on both of these lung pathologies will lead to a better understanding of the pathogenesis of COPD.

The goal of this protocol is to provide automated methods to quantify chronic lung pathologies in a murine model of COPD. The protocol includes exposing mice to cigarette smoke (CS), measuring pulmonary function, inflating the lungs, and using morphometry methods to measure emphysema and small airway remodeling in mice.

Sigara Duman maruz kalan Fare Akciğer Amfizem ve Küçük Havayolu Yaptırma otomatik ölçüm

COPD is projected to be the third most common cause of mortality world-wide by 2020(1).  Animal models of COPD are used to identify molecules that ...

Comparing the Effects of Electronic Cigarette Vapor and Cigarette Smoke in a Novel In Vivo Exposure System

Electronic cigarettes (E-cigarettes) are being widely used, and growing in popularity. It is estimated that more than 9 million adults use them regularly. The potential adverse health effects of electronic cigarette vapor (E-vapor) exposure are poorly defined. While several animal models of E-vapor exposure have been developed, few models expose rodents to clinically relevant quantities of nicotine and make direct comparisons to cigarette smoke within the same exposure system. Here, we present a method for constructing and operating an E-vapor chamber and cigarette smoke chamber. The chambers are constructed by outfitting anesthesia chambers with a computer controlled pumping system that delivers consistent amounts of E-vapor or cigarette smoke to rodents. Nicotine exposure is measured indirectly by quantifying pre and post-exposure serum cotinine levels. This exposure system can be modified to accommodate various types of E-cigarettes&#160;and tobacco cigarettes, and can be used to compare the effects of E-vapor&#160;and cigarette smoke in vivo.

Comparing the Effects of Electronic Cigarette Vapor and Cigarette Smoke in a Novel In Vivo Exposure System

This protocol describes a method for exposing rodents to electronic cigarette vapor (E-vapor) and cigarette smoke. Exposure chambers are constructed by modifying anesthesia chambers with an automated pumping system that delivers E-vapor or cigarette smoke to rodents. This system can easily be modified to accommodate many experimental endpoints.

Bir Elektronik Romanda Elektronik Sigara Buharı ve Sigara Dumanının Etkilerinin Karşılaştırılması<emIn vivo</em&gt; Pozlama Sistemi

Electronic cigarettes (E-cigarettes) are being widely used, and growing in popularity. It is estimated that more than 9 million adults use them regularly. ...

Cigarette Smoke Exposure in Mice using a Whole-Body Inhalation System

Close to 14% of adults in the United States were reported to smoke cigarettes in 2018. The effects of cigarette smoke (CS) on lungs and cardiovascular diseases have been widely studied, however, the impact of CS in other tissues and organs such as blood and bone marrow remain incompletely defined. Finding the appropriate system to study the effects of CS in rodents can be prohibitively expensive and require the purchase of commercially available systems. Thus, we set out to build an affordable, reliable, and versatile system to study the pathologic effects of CS in mice. This whole-body inhalation exposure system (WBIS) set-up mimics the breathing and puffing of cigarettes by alternating exposure to CS and clean air. Here we show that this do-it-yourself (DIY) system induces airway inflammation and lung emphysema in mice after 4-months of cigarette smoke exposure. The effects of whole-body inhalation (WBI) of CS on hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) in the bone marrow using this apparatus are also shown.

This protocol demonstrates the study of the pathophysiologic effects of cigarette smoke (CS) with a whole-body inhalation (WBI) exposure system (WBIS) built in-house. This system can expose animals to CS under controlled repeatable conditions for research of CS-mediated effects on lung emphysema and hematopoiesis.

Tüm Vücut Soluma Sistemi Kullanan Farelerde Sigara Dumanına Maruz Kalma

Close to 14% of adults in the United States were reported to smoke cigarettes in 2018. The effects of cigarette smoke (CS) on lungs and cardiovascular ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

A Technique to Generate and Deliver Drug Aerosols Directly to Mouse Lungs

Source: Phillips, J. E. et al., <a href="https://appjove.unicartagenaproxy.elogim.com/v/55454">Dry Powder and Nebulized Aerosol Inhalation of Pharmaceuticals Delivered to Mice Using a Nose-only Exposure System.</a>&#160;J. Vis. Exp. (2017)
This video demonstrates the generation of drug aerosols and the targeted nose-only delivery of these aerosols to mice using an inhalation unit equipped with an aerosol generator. The mouse is restrained in a nose-only restrainer and connected to the inhalation unit, which delivers the drug directly into the mouse&#39;s nasal cavity. Subsequently, the drug passes through the trachea and enters the lungs.

İlaç aerosollerini doğrudan fare akciğerlerine üretmek ve vermek için bir teknik

All procedures involving animal models have been reviewed by the local institutional animal care committee and the JoVE veterinary review board.
1. ...