Bayan Sonja Dufentester, Bayan Elke Weber ve Bayan Klaudia Niepagenkämper mükemmel teknik destek için teşekkür ederiz.

Tüm hayvan deneyleri Landesamt für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz (LANUV) Nordrhein-Westfalen göre Alman hayvan koruma kanunu (Tierschutzgesetz) tarafından kabul edildi.
1. malzeme ve deneysel Kur
<ol>
	<li>Hayvan bakımı.
	<ol>
		<li>Cinsiyet ve yaş uyumlu fare DSS-duyarlı herhangi bir baskı (Örneğin, C57BL/6) 20-25 g vücut ağırlığı kullanın.</li>
		<li>Deney grubu ve ev başına en az beş veya daha fazla fare fareler yerel hayvan bakımı esaslarına göre planlayın.</li>
		<li>Standart bir kemirgen chow diyet ve autoclaved içme suyu ad libitumsağlar.</li>
		<li>Standart chow kaldırmak ve en az üç gün önce endoluminal auto-floresan azaltmak için tarama yonca-Alerjik chow ile değiştirin.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Akut DSS kaynaklı kolit indüksiyon.
	<ol>
		<li>DSS 2 g dağıtılması (moleküler ağırlık ~ 40.000 Da) 100 ml autoclaved içme suyu %2 (w/v çözüm) elde etmek için.</li>
		<li>Fareler içme teminini sadece DSS çözüm ile doldurun ve 5 mL sıvı fare günlük ücret de tahmin ediyoruz. Denetim fare10DSS olmadan aynı içme suyu sağlar. Not: fareler günlük deneme sonuna kadar izleyin. Bunu kaybetmek onların ilk vücut ağırlığının % 20'den büyük veya can çekişen haline fareler ötenazi (Yani, ısrarla Kambur duruş, azalan hareket, nefes çok çalışan, belirgin dik kat) hayvan üzerinde yerel ilgili yönergelere göre refah.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Floresan-aracılı tomografi hazırlanması.
	<ol>
		<li>Floresans boya ile istenen antikor (Örneğin, fare Anti-fare F4/80) etiket (Örneğin, Cyanine7, λuyarma: 750 nm, λemisyon: 776 nm) üreticinin iletişim kuralında tanımlandığı gibi. Bir uygun diyaliz zarda arıtılmış antikor Diyaliz (gözenek boyutu &#60; 50-100 kDa) 0,15 M Sodyum Klorür için en az 2 h veya gecede 1 litre karşı.<ol>
			<li>1 litre 0.1 M NaHCO3 antikor transferi ve en az 2 h diyaliz.</li>
			<li>Dimetil sülfoksit (DMSO) floresan boya gerekli miktarda dağıtılması (10,8 µL/mg antikor) ve antikor ekleyin. Floresan boya 20-fold molar aşan bir boya protein oranı 1:3 elde etmek için kullanın.</li>
			<li>Karanlıkta 4 ° c için 1 h. çıkarmak diyaliz 0.15 M sodyum 1 L karşı veya PD-10 desalting sütun kullanarak etiketsiz antikor kuluçkaya ve fosfat tamponlu tuz (PBS) vivo uygulama için çözmek.</li>
			<li>Spectrophotometry tarafından son antikor konsantrasyon ve etiketleme oranı belirler.</li>
			<li>250-330 nm bir emilimini protein konsantrasyonu ölçmek ve boya tarafından ek emme düşünün. 280 en fazla emme düzeltmek nm (protein) 750 maksimum emilim % 11'i tarafından nm (sonraki adım) Cyanine7 etiketleme için.</li>
			<li>250-800 nm (genellikle 1:10) kampta seyreltme ölçmek ve hulâsa Cyanine7 konsantrasyonu 750 nm.</li>
			<li>Boya protein oranı olarak belirlemek: boya/antikor maksimum emilim 750 = nm / 200.000 / (en fazla emme 280 nm - max emme 750 x 0,11 nm) / 170.000.</li>
			<li>Antikor çözüm 4 ° C'de tutmak ve enjeksiyon önce beyazlatma önlemek için ışık kalkan.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Bu kullanılana kadar steril enjektör gerekli antikor çözüm hacmindeki hemen önce enjeksiyon ve ışık kalkan yükleyin.</li>
		<li>En iyi zamanlama sonda enjeksiyon ve tarama yordama bağlı olarak izleyici farmakokinetik belirler.</li>
		<li>Oksijen inhale % 1.5-2.5 isoflurane kullanarak fare anestezi veya güvenli bir şekilde etiketlenmiş antikorlar kuyruk ven enjeksiyon için adanmış bir restrainer yer onları.</li>
		<li>Tam uzunlukta antikor tarama önce etiketli antikor en az 24 h Anti-fare F4/80 makrofaj görselleştirme fare kolit gibi enjekte. Fareler intravenöz enjekte (IV) yolu ile kuyruk damar etiketli antikor boya 2.0 nmol için karşılık gelen bir miktar ile.</li>
		<li>Kullanım aynı derecede belirsiz antikorlar (Örneğin, fare IgG veya başka bir izotip birincil antikor miras için karşılık gelen) bir izotip kontrol dozlarda belirli inceleyebilirsek eşdeğer etiket aynı derecede. Not: Vivo sonuçları tarar sonra enjeksiyon kontrol bahçedeki veri görüntüleme belirli sonda yorumlanması için bir başvuru olarak hizmet verebilir.</li>
		<li>Tıraş ışık yansıması ve emilimi en aza indirmek için karın bölgesinde hayvan kürk tıraş için kullanın.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. teknik ekipman
<ol>
	<li>Bir veteriner Floresans aracılı tomografi (FMT) aygıtı küçük hayvan floresan ( şekil 4) kullanın.</li>
	<li>Her proje için yeni bir çalışma "yeni çalışması" yi tıklatarak oluşturun düğmesini tıklatın ve çalışma açıklamasında görüntüleme parametreleri ve doz ileride de dahil olmak üzere ilgili izleyiciler içerir.</li>
	<li>Bu çalışma içinde "yeni çalışma grubu" yi tıklatarak çalışma grupları (Örneğin, belirli izleme ve belirsiz izotip kontrol için) ilgili çalışma tasarımına göre oluşturun düğmesini. Her çalışma grubu ile ilgili sayı hayvanların donatmak.</li>
	<li>İzleme yapıları için sistemi kalibre.<ol>
		<li>Her dizi izleyicileri etiketleme varyasyon için normal duruma getirmeye ve nicel ölçüm OI verilerden etkinleştirmek için kalibrasyon gerçekleştirin.</li>
		<li>Her bireysel sistem kalibrasyonu için araç üreticisinin kılavuzunu izleyin; "yeni eklemesini" seçimi, sistem bir kılavuz sayesinde adımları sağlar. Uygulamalı antikor çözüm seyreltme ve izleyici sonda içinde hesaplanan mutlak konsantrasyon sağlar.</li>
		<li>FMT, doku taklit eden hayalet (hayati doku benzeyen) tanımlanmış kalınlığı ve emme özellikleri kullanın ve kullanılan antikor çözüm belirli bir ses ile doldurun. FMT aygıtta ölçmek. Not: Sistem verilen konsantrasyonu ile birlikte sağlanan sonda referans ölçüm mutlak izleyici konsantrasyonları üzerinden gelecek vivo içinde ölçümleri hesaplamak için kullanır.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Isıtılabilen muayene kaset 42 ° c sıcaklık ile kullanma Not: Bu fareler muayene sırasında hipotermik olmasını engeller.</li>
</ol>
3. hayvan anestezi
<ol>
	<li>% 1.5-2 vol % isoflurane ([2-chloro-2-(difluoromethoxy)-1,1,1-trifluoro-ethane]) ve fareler anestezi için 1, 5 L O2/min., sürekli bir akış kullanın</li></ol>Özel olarak tasarlanmış inhalasyon sistemi kolayca anestezik derinliği kontrol ve personel pozlandırmayı en aza indirmek kemirgen anestezi (isoflurane Buharlaştırıcı) kullanır.
	<li>Sızıntı geçirmez indüksiyon odasında fareyi getirin ve Buharlaştırıcı isoflurane sağlama işleri (%100 (v/v), 5 vol % oksijen, 3 L/dak) açın. Yaslanmış ve bilinçsiz kadar fare izleyin.</li>
	<li>Tomografi, sürekli isoflurane inhalasyon yolu ile burun konisi, % 100 v/v, oksijen, muayene sırasında hareket eserlerin en aza indirmek için 1, 5 L/min 1,5 vol % bir doz ile muayene kaset yerleştirin. 5 dk daha uzun süren işlemler için kornea hasarı önlemek için fare gözleri göz merhem uygulamak.</li>
	<li>Anestezi derinliği refleksleri kontrol ederek değerlendirmek. Fare sırtında yatıyordu; Anestezi yeterliyse, fare geri dönmeliyiz değil. Fareyi yavaşça onun ayak parmakları arasında çimdik; Anestezi yeterliyse, bacak çekilen (sahne) cerrahi hoşgörü olmayacaktır.</li>

4. floresan-aracılı tomografi taraması
Not: Bu kullanılan FMT sistemine özgü aşağıdaki ayrıntıları uyum ( Tablo reçetesigörmek) alternatif Floresans yansıma görüntüleme aygıtları veya FMT sistemleri için gerektiği gibi çalışma.
<ol>
	<li>Muayene kaset sırtında imzalat fareyi getirin.</li>
	<li>Tarama yordamı gerçekleştirin.<ol>
		<li>Kaset görüntüleme sistemi yerleştirin ve hemen sürekli anestezi emin olmak için kapatın. Uygun örnek önceden oluşturulmuş çalışma grubundan seçin. Yönetilen izleyici izleyici konsantrasyon değerleri doğru hesaplanmasını sağlamak için açılır menüden seçin.</li>
		<li>Uygun dalga boyu Floresans yansıma görüntü elde etmek (720 nm Cyanine7 için) tarama planlamak ve anahat "elde görüntüsü" düğmesini tıklatarak tarama alanı için.</li>
		<li>Bkz: tarama alanı Floresans yansıma görüntü üzerinde bir kaplama olarak görüntülenir. Faiz (Örneğin, kolon veya karın), bölge için ayarlamak hava veya kalan kürk alanlarında kaçınarak. Görüntü hedef bağlı olarak görüntü sayısını orta ve ince tarama alanı çözünürlük sağdaki menüde kaba tercih ederek tarama alanı içinde veri noktaları ayarlayın. Not: bir iyi tarama alanını önemli ölçüde uzun süre scanning zaman pahasına daha iyi Uzaysal çözünürlük sunuyor olabilir unutmayın.</li>
		<li>Veri/resim alma seçili dalga boyu, "tarama" tıklayarak başlatın Not: Tüm karın bir orta-ince tarama tarama süresi yaklaşık 5 dk olacak; Bu süre içinde her bir veri noktasını ayrı ayrı uyarma lazer tarafından aydınlatılmış ve elde edilen floresan kaydedilir.</li>
		<li>Tarama sonunda görüntüleme kaset hayvan kaldırmak ve hayvan tamamen kafesin içine yerleştirmeden önce kurtarmak izin verir.</li>
		<li>FMT deneme sırasında çeşitli zaman noktalarda gerekli görüldüğü takdirde tekrar (Örneğin, 0, 5 ve 9-10 gün (son deneme)), ama bu nedenle arka plan Floresans sinyal artan vücutta antikor birikimi göz önünde bulundurun.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
5. sonrası tarama
<ol>
	<li>Bir kağıt havlunun bir kırmızı ışık Isınma lamba altında ayrı bir kafeste fareyi getirin ve fareyi rahatsızlık veya sıkıntı belirtileri için tam kurtarma kadar izlemek. Fareyi geri onun kendi kafesin içine ne zaman tam olarak uyanık getirin.</li>
	<li>Fareler bir doz %100 (v/v), izolatör CO2 teslimini tarafından deney sonunda, 100 vol % ve 3 L/dak ötenazi. CO2 yüksek konsantrasyonda ani bir pozlama sıkıntıya neden gibi odası CO2 ile önceden doldurmayın. Fare ötenazi hızlı servikal çıkık gibi bir sonraki ikincil mod tarafından nefes durduktan sonra ölüm doğrulayın.</li>
	<li>Kolon karın laparotomi tarafından explant ve adımları 4.2.1 - 4.2.4 açıklanmıştır explanted iki nokta üstüste, bir ex vivo tarama gerçekleştirin. Her kolon boyuna Metzenbaum Cerrahi makas kullanarak açın ve tuzlu çözüm ile daha ayrıntılı bir çözümleme için hazırlamadan önce iyice durulayın.</li>
	<li>Bir neşter distal kolon bir 0,5 cm parçası keser ve hemen bir 1.5 mL kriyojenik tüpe yerleştirir için kullanın. Daha fazla kadar kullanmak (Örneğin,myeloperoxidase (MPO) ölçüler) sıvı azot ve-70 ° C'de store durdur.</li>
	<li>Tahta bir sopa kullanmak ve kalan boyuna kadar rulo mukoza dışa ("İsviçre rulo tekniği") ile proksimal sonuna iki nokta üst üste gelen distal histolojik analizler için açtı. Hazırlık bir sabitleştirici yerleştirin (bkz. Tablo reçetesi) ve-80 ° C14, Don.</li>
</ol>
6. veri yeniden yapılanma ve yorumu
<ol>
	<li>3D maps-in Floresans dağıtım ham görüntü verilerinden oluşturma için ilgili düşsel bilgisayar yazılımı yeniden yapılandırma aracını kullanın; taramaları otomatik olarak tarama zaman üzerine imar aracına eklenir, işlev "Ekle yeniden yapılanma kuyruğuna" seçilir.<ol>
		<li>Aksi takdirde, taramaları ilgili çalışma altında açılır menüden seçin ve grup çalışması, tarama sağ tıklatın ve seçin "yeniden yapılmasına ekleyin."</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Daha fazla çözümleme için bir veri kümesi analiz yazılımı yükleyin. Üst çubuğundaki açılır menüsünden ilgili çalışma seçin ve ardından çalışma grubu ve bireysel hayvan sağ taraftaki menüden seçin; Bu hayvan için gerçekleştirilen tüm inceden inceye gözden geçirmek-ecek var olmak göstermek. Doğru Tara öğesini seçin ve "Yükle" seçeneğini tıklatın Not: İzleyici dağıtım 3D yeniden inşası başlangıçta alınan Floresans yansıma görüntü bir bindirme olarak sol tarafta görünür. Model döndürülmüş ve daha kolay çözümleme için büyütülmüş.</li>
	<li>Yeniden oluşturulan 3D haritalar üzerinde (Örneğin, karaciğer ve idrar kesesi) belirsiz etiket birikimi Foci belirlemek ve hedef dokulardan (Örneğin, bağırsak veya bağırsak) ayırt etmek.</li>
	<li>Üst çubuğu'ndan hedef için en uygun yatırım Getirisi şekli seçin. Etiket hedef doku bölgeleri analiz yazılımı ilgili ölçü araçları yerleştirerek ilgi (ROI) olarak; yazılım bir floresan yoğunluğu tarama için kalibre izleyici molar miktarda yatırım Getirisi, aynı zamanda için (pico-) sağlayacaktır.</li>
	<li>Hastalık aktivitesi (Histoloji) enflamatuar infiltrat ile ilişki içinde değerlendirilmesi için en uygun eşdeğer olarak yatırım Getirisi boyutu için normalleştirilmiş uygun yatırım Getirisi, izleyici toplam miktarı seçin. Not: Diğer şekil-in ROI uygunsa, belirli bir modeli temsilcisi olarak seçilebilir.</li>
</ol>
7.Ex Vivo Analizleri
<ol>
	<li>Hematoksilen ve Eozin boyama ve ayirt boyama.
	<ol>
		<li>Bölüm 2 min için % 70 etanol (alkol) yerleştirerek deparaffinize; daha sonra distile su ile durulayın. 5 min için Hematoksilen çözüm ile leke ve daha sonra 10 dk sıcak musluk suyu ile yıkayın.</li>
		<li>Counterstain için 2 dk, Eozin çözüm ile distile su ile durulama ve tekrar distile su ile durulayın.</li>
		<li>Yer % 70 alkol, %96 alkol, %99 alkol ve Ksilen (2 kez) için 2 dk her kurutmak ve bölümü temizlemek için. Reçineli montaj orta ile bağlayın.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Ayirt boyama.
	<ol>
		<li>Cryo-kesme bölümleri 7 µm hazırlamak ve ayirt boyama için daha önce alınan doku bölümler ("İsviçre rulo") kullanın.</li>
		<li>Aseton-sabit ve donmuş iki nokta üst üste bölümler için 10 dk % 5.0 sıçan Serumda engellemek ve gecede seyreltilmiş (1/500 v/v) biotinylated birincil fare Anti-fare F4/80 antikor ile kuluçkaya. Üç kez Tris tamponlanmış salin (TBS) bölümleri yıkama ve Streptavidin-FITC ile (1: 100 v/v) PBS/BSA içinde kuluçkaya (% 0,1 w/v) gecede 4 ° C'de</li>
		<li>TBS bölümlerde yıkama ve'ile 4, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI, 1: 1000 v/v) kontrast elde etmek için leke. Confocal mikroskop altında floresan görüntü analiz (bakınız Tablo reçetesi; 40 x büyütme; filtre küp N2.1 uyarma filtreli 515-560) ve yüksek güç alan başına F4/80-pozitif hücreleri saymak. Not: antikor aynı klon ve biçimi içinde vivo FMT ve post mortem Histoloji analizleri immünhistokimya veya hedef bağlı olarak ayirt, boyama gibi birleştirirken kullanmayı düşünün. F4/80-pozitif makrofajlar içinde vivo ve ex vivotespiti için farklı biçimlerde kullanılmıştır.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>MPO ölçümlerde kolon örnekleri.
	<ol>
		<li>Taze elde, iki nokta üst üste örnekleri PBS durulanır ya da çözdürülen numune MPO ölçümler için kullanın. Tüm örneklerini tartmak ve doku homojenize ELISA içinde sağlanan lizis arabelleği ( Tablo reçetesigörmek) lizis arabelleği doku mg başına 20 µL hacmi, kit.</li>
		<li>15 için solüsyon içeren temizleyicide s (sonication frekans: 20 kHz, güç: 70 W) ve örnekleri için 200 g ve 4 ° c x 10 dk santrifüj kapasitesi</li>
		<li>Piyasada bulunan bir ELISA kiti ( Tablo reçetesigörmek) kullanmak üretmektedir açıklama göre. Çoğaltmaları testinde yerine getirir.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Bruckner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+endoscopy+for+in+vivo+multimodal+imaging+of+carcinogenesis+and+assessment+of+intestinal+wound+healing+and+inflammation.">Murine endoscopy for in vivo multimodal imaging of carcinogenesis and assessment of intestinal wound healing and inflammation.</a> J Vis Exp. (90), (2014).</li><li>Lewis, J. S., Achilefu, S., Garbow, J. R., Laforest, R., Welch, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+imaging.+current+technology+and+perspectives+for+oncological+imaging.">Small animal imaging. current technology and perspectives for oncological imaging.</a> Eur J Cancer. 38 (16), 2173-2188 (2002).</li><li>Bettenworth, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+18F-FDG+PET/CT+imaging+to+monitor+lesion+activity+in+intestinal+inflammation.">Translational 18F-FDG PET/CT imaging to monitor lesion activity in intestinal inflammation.</a> J Nucl Med. 54 (5), 748-755 (2013).</li><li>Vowinkel, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apolipoprotein+A-IV+inhibits+experimental+colitis.">Apolipoprotein A-IV inhibits experimental colitis.</a> J Clin Invest. 114 (2), 260-269 (2004).</li><li>Korlach, J., Schwille, P., Webb, W. W., Feigenson, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+lipid+bilayer+phases+by+confocal+microscopy+and+fluorescence+correlation+spectroscopy.">Characterization of lipid bilayer phases by confocal microscopy and fluorescence correlation spectroscopy.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 96 (15), 8461-8466 (1999).</li><li>Ntziachristos, V., Tung, C. H., Bremer, C., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+molecular+tomography+resolves+protease+activity+in+vivo.">Fluorescence molecular tomography resolves protease activity in vivo.</a> Nat Med. 8 (7), 757-760 (2002).</li><li>Ntziachristos, V., Bremer, C., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+imaging+with+near-infrared+light:+new+technological+advances+that+enable+in+vivo+molecular+imaging.">Fluorescence imaging with near-infrared light: new technological advances that enable in vivo molecular imaging.</a> Eur Radiol. 13 (1), 195-208 (2003).</li><li>Ntziachristos, V., Bremer, C., Graves, E. E., Ripoll, J., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+tomographic+imaging+of+near-infrared+fluorescent+probes.">In vivo tomographic imaging of near-infrared fluorescent probes.</a> Mol Imaging. 1 (2), 82-88 (2002).</li><li>Ballou, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+labeling+in+vivo+using+cyanine-conjugated+monoclonal+antibodies.">Tumor labeling in vivo using cyanine-conjugated monoclonal antibodies.</a> Cancer Immunol Immunother. 41 (4), 257-263 (1995).</li><li>Wirtz, S., Neufert, C., Weigmann, B., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemically+induced+mouse+models+of+intestinal+inflammation.">Chemically induced mouse models of intestinal inflammation.</a> Nat Protoc. 2 (3), 541-546 (2007).</li><li>Kawada, M., Arihiro, A., Mizoguchi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+from+advances+in+research+of+chemically+induced+experimental+models+of+human+inflammatory+bowel+disease.">Insights from advances in research of chemically induced experimental models of human inflammatory bowel disease.</a> World J Gastroenterol. 13 (42), 5581-5593 (2007).</li><li>Nowacki, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+5A+apolipoprotein+A-I+(apoA-I)+mimetic+peptide+ameliorates+experimental+colitis+by+regulating+monocyte+infiltration.">The 5A apolipoprotein A-I (apoA-I) mimetic peptide ameliorates experimental colitis by regulating monocyte infiltration.</a> Br J Pharmacol. 173 (18), 2780-2792 (2016).</li><li>Hansch, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+experimental+arthritis+with+near-infrared+fluorescence.">In vivo imaging of experimental arthritis with near-infrared fluorescence.</a> Arthritis Rheum. 50 (3), 961-967 (2004).</li><li>Bialkowska, A. B., Ghaleb, A. M., Nandan, M. O., Yang, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+Swiss-rolling+Technique+for+Intestinal+Tissue+Preparation+for+Immunohistochemical+and+Immunofluorescent+Analyses.">Improved Swiss-rolling Technique for Intestinal Tissue Preparation for Immunohistochemical and Immunofluorescent Analyses.</a> J Vis Exp. (113), (2016).</li><li>Diaz-Granados, N., Howe, K., Lu, J., McKay, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dextran+sulfate+sodium-induced+colonic+histopathology,+but+not+altered+epithelial+ion+transport,+is+reduced+by+inhibition+of+phosphodiesterase+activity.">Dextran sulfate sodium-induced colonic histopathology, but not altered epithelial ion transport, is reduced by inhibition of phosphodiesterase activity.</a> Am J Pathol. 156 (6), 2169-2177 (2000).</li><li>Kim, J. J., Shajib, M. S., Manocha, M. M., Khan, W. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+intestinal+inflammation+in+DSS-induced+model+of+IBD.">Investigating intestinal inflammation in DSS-induced model of IBD.</a> J Vis Exp. (60), e3678 (2012).</li><li>Dieleman, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+experimental+colitis+induced+by+dextran+sulphate+sodium+(DSS)+is+characterized+by+Th1+and+Th2+cytokines.">Chronic experimental colitis induced by dextran sulphate sodium (DSS) is characterized by Th1 and Th2 cytokines.</a> Clin Exp Immunol. 114 (3), 385-391 (1998).</li><li>Kojouharoff, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralization+of+tumour+necrosis+factor+(TNF)+but+not+of+IL-1+reduces+inflammation+in+chronic+dextran+sulphate+sodium-induced+colitis+in+mice.">Neutralization of tumour necrosis factor (TNF) but not of IL-1 reduces inflammation in chronic dextran sulphate sodium-induced colitis in mice.</a> Clin Exp Immunol. 107 (2), 353-358 (1997).</li><li>Sunderkotter, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subpopulations+of+mouse+blood+monocytes+differ+in+maturation+stage+and+inflammatory+response.">Subpopulations of mouse blood monocytes differ in maturation stage and inflammatory response.</a> J Immunol. 172 (7), 4410-4417 (2004).</li><li>Willmann, J. K., van Bruggen, N., Dinkelborg, L. M., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+imaging+in+drug+development.">Molecular imaging in drug development.</a> Nat Rev Drug Discov. 7 (7), 591-607 (2008).</li><li>Ntziachristos, V., Ripoll, J., Wang, L. V., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Looking+and+listening+to+light:+the+evolution+of+whole-body+photonic+imaging.">Looking and listening to light: the evolution of whole-body photonic imaging.</a> Nat Biotechnol. 23 (3), 313-320 (2005).</li><li>Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Going+deeper+than+microscopy:+the+optical+imaging+frontier+in+biology.">Going deeper than microscopy: the optical imaging frontier in biology.</a> Nat Methods. 7 (8), 603-614 (2010).</li><li>Stuker, F., Ripoll, J., Rudin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+molecular+tomography:+principles+and+potential+for+pharmaceutical+research.">Fluorescence molecular tomography: principles and potential for pharmaceutical research.</a> Pharmaceutics. 3 (2), 229-274 (2011).</li><li>Beziere, N., Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optoacoustic+imaging:+an+emerging+modality+for+the+gastrointestinal+tract.">Optoacoustic imaging: an emerging modality for the gastrointestinal tract.</a> Gastroenterology. 141 (6), 1979-1985 (2011).</li><li>Habtezion, A., Nguyen, L. P., Hadeiba, H., Butcher, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukocyte+Trafficking+to+the+Small+Intestine+and+Colon.">Leukocyte Trafficking to the Small Intestine and Colon.</a> Gastroenterology. 150 (2), 340-354 (2016).</li><li>Ungar, B., Kopylov, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+development+of+new+biologics+in+inflammatory+bowel+disease.">Advances in the development of new biologics in inflammatory bowel disease.</a> Ann Gastroenterol. 29 (3), 243-248 (2016).</li><li>Sandborn, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vedolizumab+as+induction+and+maintenance+therapy+for+Crohn's+disease.">Vedolizumab as induction and maintenance therapy for Crohn's disease.</a> N Engl J Med. 369 (8), 711-721 (2013).</li><li>Vermeire, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Etrolizumab+as+induction+therapy+for+ulcerative+colitis:+a+randomised,+controlled,+phase+2+trial.">Etrolizumab as induction therapy for ulcerative colitis: a randomised, controlled, phase 2 trial.</a> Lancet. 384 (9940), 309-318 (2014).</li><li>Coskun, M., Vermeire, S., Nielsen, O. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Targeted+Therapies+for+Inflammatory+Bowel+Disease.">Novel Targeted Therapies for Inflammatory Bowel Disease.</a> Trends Pharmacol Sci. , (2016).</li><li>Vermeire, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mucosal+addressin+cell+adhesion+molecule+antibody+PF-00547,659+in+ulcerative+colitis:+a+randomised+study.">The mucosal addressin cell adhesion molecule antibody PF-00547,659 in ulcerative colitis: a randomised study.</a> Gut. 60 (8), 1068-1075 (2011).</li><li>Terai, T., Nagano, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small-molecule+fluorophores+and+fluorescent+probes+for+bioimaging.">Small-molecule fluorophores and fluorescent probes for bioimaging.</a> Pflugers Arch. 465 (3), 347-359 (2013).</li><li>Ren, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+Measurement+of+Tumor+Vascular+Permeability+and+Perfusion+using+a+Hybrid+System+for+Simultaneous+Magnetic+Resonance+and+Fluorescence+Imaging.">Dynamic Measurement of Tumor Vascular Permeability and Perfusion using a Hybrid System for Simultaneous Magnetic Resonance and Fluorescence Imaging.</a> Mol Imaging Biol. 18 (2), 191-200 (2016).</li><li>Ale, A., Ermolayev, V., Deliolanis, N. C., Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+background+subtraction+technique+for+hybrid+fluorescence+molecular+tomography/x-ray+computed+tomography+imaging+of+a+mouse+model+of+early+stage+lung+cancer.">Fluorescence background subtraction technique for hybrid fluorescence molecular tomography/x-ray computed tomography imaging of a mouse model of early stage lung cancer.</a> J Biomed Opt. 18 (5), 56006 (2013).</li><li>Chames, P., Van Regenmortel, M., Weiss, E., Baty, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+antibodies:+successes,+limitations+and+hopes+for+the+future.">Therapeutic antibodies: successes, limitations and hopes for the future.</a> Br J Pharmacol. 157 (2), 220-233 (2009).</li><li>Faust, A., Hermann, S., Schafers, M., Holtke, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+imaging+probes+and+their+potential+contribution+to+radiotracer+development.">Optical imaging probes and their potential contribution to radiotracer development.</a> Nuklearmedizin. 55 (2), 51-62 (2016).</li><li>Mahler, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+susceptibility+of+inbred+mouse+strains+to+dextran+sulfate+sodium-induced+colitis.">Differential susceptibility of inbred mouse strains to dextran sulfate sodium-induced colitis.</a> Am J Physiol. 274 (3 Pt 1), G544-G551 (1998).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Tıbbi görüntüleme teknikleri son yıllarda hızla geliştiğini rağmen biz hala bizim yetenek iltihabi süreçleri veya tümörler, hem de diğer hastalıklar erken onların geliştirme aşamalarında algılamak için sınırlıdır. Ancak, bu anlayış tümör büyüme, işgali, ya da metastaz kalkınma ve hücresel süreçler enflamatuar bozuklukları ve dejeneratif, kardiyovasküler ve immünolojik hastalıkların gelişiminde çok önemlidir. Geleneksel görüntüleme teknikleri fiziksel veya fizyolojik parametr...

Hayvan modelleri bilimsel araştırmalarda yaygın olarak kullanılır ve hastalık etkinliğini izleme ve canlılık, vücut ağırlığı değişiklikler miktar veya kan, idrar ve dışkı analizi gibi birçok non-invaziv prosedürleri var. Ancak, bu da tabi arası bireysel farklılıklarına sadece dolaylı temsilci parametre vardır. Onlar sık sık post mortem analizleri tekrarlanan zaman noktalarda seri gözlem engeller doku örnek tarafından tamamlanabilir gerekir ve gözlem fizyolojik veya patolojik içinde vivoişler doğrudan. Sofistike küçük hayvan görüntüleme teknikleri, çapraz kesit görüntüleme, optik görüntüleme ve Endoskopi, bu süreçlerin doğrudan görselleştirme ve ayrıca aynı hayvanlar1 tekrarlayan analizleri için sağlar bu da dahil olmak üzere ortaya çıkmıştır , 2 , 3. Ayrıca, sürekli aynı hayvan hastalığında çeşitli durumlarını izlemek için olasılık daha bir hayvan etik açıdan uygun olabilir gerekli, hayvan sayısını azaltmak.
Birkaç farklı optik görüntüleme teknikleri vivo içinde Floresans görüntüleme için mevcut. Aslında, confocal görüntüleme yüzey ve yeraltı floresan olayları4,5çalışmaya istihdam edildi. Son zamanlarda, ancak, nicel üç boyutlu doku değerlendirmeler için izin tomografik sistemleri gelişmiş6olmuştur. Bu düşük emilim, duyarlı detektörlerle ve monokromatik ışık kaynakları7sunan yakın kızılötesi (Nur) spektrumda ışık yayarlar floresan problar geliştirilmesi yoluyla gerçekleştirdi. Bilgisayarlı Tomografi (BT), manyetik rezonans görüntüleme (MRG) veya ultrason (ABD), çoğunlukla fiziksel parametrelere dayanan ve Morfoloji, görselleştirmek gibi geleneksel cross-sectioning görüntüleme teknikleri, ek bilgiler optik görüntüleme sağlar temel moleküler süreçleri endojen veya eksojen floresan kullanarak8sondalar.
Moleküler Biyoloji gelişmeler hedefler giderek artan sayıda için akıllı ve hedeflenen floresan moleküler probları nesil kolaylaştırmak için yardımcı oldu. Örneğin, reseptör aracılı alımı ve belirli hedef alan dağıtım carbocyanine türev etiketli antikorlar9kullanarak görüntülenmeyecektir. Vücudun aksi ulaşılmaz yerlerde belirli tarayıcıları olarak çalışmaya etiketli, mevcut antikorlar bolluk tumorigenesis ve nörodejeneratif modellerinin moleküler ve hücresel işlemlerinde benzersiz anlayışlar sağlar, kalp, immünolojik ve inflamatuar hastalıkları7.
Bu çalışmada, Floresans aracılı tomografi kolit, fare modeli nasıl kullanılacağını açıklar. Dextran sodyum sülfat (DSS)-bağlı kolit olan standart bir kimyasal olarak indüklenen fare modeli iltihabi bağırsak hastalığı (IBD)10benzer bağırsak iltihabı. Doğuştan gelen bağışıklık sistemi bağırsak iltihabı11gelişimine katkısını değerlendirmek özellikle yararlıdır. İşe alma, harekete geçirmek ve monosit ve makrofaj infiltrasyonu IBD patogenezinde önemli adımları temsil ettiğinden, onların işe alım görselleştirme ve Kinetik infiltrasyon, örneğin, etkisini kontrol için gerekli Preklinik ayarı12olası tedavi edici maddeler. DSS kolit indüksiyon tarif ve makrofaj infiltrasyon Floresans moleküler tomografi monosit/makrofaj işaretçiyi F4/80 belirli görselleştirme için kullanarak bağırsak mukozası içine tomografi-aracılı karakterizasyonu göstermek 13. Ayrıca, antikor etiketleme gibi; yardımcı ve tamamlayıcı yordamlara göstermek deneysel Kur; ve analizi ve yorumu elde edilen görüntülerin hastalık aktivite endeksi gibi geleneksel çıktıları ile korelasyon Akış Sitometresi ve histolojik analizi ve immünhistokimya. Biz bu tekniği ve karşılaştırmalar diğer görüntüleme yöntemleri için sınırlamalar tartışıyorlar.

<table><tbody><tr><td>&lt;strong&gt;Reagents&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alfalfa-free diet</td><td>Harlan Laboritories, Madison, USA</td><td>2014</td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen eye ointment</td><td>Bayer, Leverkusen, Germany</td><td>80469764</td><td></td></tr><tr><td>Dextran sulphate sodium (DSS)</td><td>TdB Consulatancy, Uppsala, Sweden</td><td>DB001</td><td></td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Sigma - Aldrich, Deisenhofen, Germany</td><td>E 4382</td><td></td></tr><tr><td>Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Sigma - Aldrich, Deisenhofen, Germany</td><td>E 9884</td><td></td></tr><tr><td>Florene 100V/V</td><td>Abbott, Wiesbaden, Germany</td><td>B506</td><td></td></tr><tr><td>Haematoxylin&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Sigma - Aldrich, Deisenhofen, Germany</td><td>HHS32-1L</td><td></td></tr><tr><td>O.C.T. Tissue Tek compound&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Sakura, Zoeterwonde, Netherlands</td><td>4583</td><td>fixative for histological analyses</td></tr><tr><td>Phosphate buffered saline, PBS</td><td>Lonza, Verviers, Belgium</td><td>4629</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Chloride 0,9%</td><td>Braun, Melsungen, Germany</td><td>5/12211095/0411</td><td></td></tr><tr><td>Sodium bicarbonate powder</td><td>Sigma Aldrich Deisenhofen, Germany</td><td>S5761</td><td></td></tr><tr><td>Standard diet</td><td>Altromin, Lage, Germany</td><td>1320</td><td></td></tr><tr><td>Tissue-Tek Cryomold</td><td>Sakura, Leiden, Netherlands</td><td>4566</td><td></td></tr><tr><td>Hemoccult (guaiac paper test)</td><td>Beckmann Coulter, Germany</td><td>3060</td><td></td></tr><tr><td>Biotin rat-anti-mouse anti-F4/80 antibody</td><td>Serotec, Oxford, UK</td><td>MCA497B</td><td></td></tr><tr><td>Biotin rat-anti-mouse anti-GR-1&amp;nbsp;</td><td>BD Pharmingen, Heidelberg Germany</td><td>553125</td><td></td></tr><tr><td>Streptavidin-Alexa546</td><td>Molecular Probes, Darmstadt, Germany</td><td>S-11225</td><td>excitation/emission maximum:&amp;nbsp; 556/573nm</td></tr><tr><td>Anti-CD11b rat-anti-mouse antibody TC</td><td>Calteg, Burlingame, USA</td><td>R2b06</td><td></td></tr><tr><td>Purified anti-mouse F4/80 antibody</td><td>BioLegend, London, UK</td><td>123102</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhoffen, Germany</td><td>D9542</td><td></td></tr><tr><td>FITC-conjugated anti-Ly6C rat-anti-mouse antibody</td><td>BD Pharmingen, Heidelberg, Germany</td><td>553104</td><td></td></tr><tr><td>FACS buffer</td><td>BD Pharmingen, Heidelberg, Germany</td><td>342003</td><td></td></tr><tr><td>Cy7 NHS Ester</td><td>GE Healthcare&amp;nbsp;Europe, Freiburg, Germany</td><td>PA17104</td><td></td></tr><tr><td>MPO ELISA</td><td>Immundiagnostik AG, Bensheim, Germany</td><td>K 6631B</td><td></td></tr><tr><td>Cy5.5 labeled anti-mouse F4/80 antibody</td><td>BioLegend, London, UK</td><td>123127</td><td>ready to use labelled Antibodies (alternative)</td></tr><tr><td>Anti-Mouse F4/80 Antigen PerCP-Cyanine5.5</td><td>eBioscience, Waltham, USA</td><td>45-4801-80</td><td>ready to use labelled Antibodies (alternative)</td></tr><tr><td>DMSO (Dimethyl sulfoxide)</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhoffen, Germany</td><td>67-68-5</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhoffen, Germany</td><td>792632</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhoffen, Germany</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumins (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhoffen, Germany</td><td>A4612</td><td></td></tr><tr><td>Tris Buffered Saline Solution (TBS)</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhoffen, Germany</td><td>SRE0032</td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Name&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Company&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Catalog Number&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Comments&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Equipment&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>FACS Calibur Flow Cytometry System</td><td>BD Biosciences GmbH, Heidelberg, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FMT 2000 In Vivo Imaging System</td><td>PerkinElmer Inc., Waltham, MA, USA</td><td>FMT2000</td><td></td></tr><tr><td>True Quant 3.1 Imaging Analysis Software</td><td>PerkinElmer Inc., Waltham, MA, USA</td><td>included in FMT2000</td><td></td></tr><tr><td>Leica DMLB Fluorescent Microscope</td><td>Leica,&amp;nbsp; 35578 Wetzlar, Germany&amp;nbsp;</td><td>DMLB</td><td></td></tr><tr><td>Bandelin Sonopuls HD 2070</td><td>Bandelin, 12207 Berlin, Germany</td><td>HD 2070</td><td>ultrasonic homogenizer</td></tr><tr><td>Disposable scalpel No 10</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhoffen, Germany</td><td>Z692395-10EA</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum scissors 14cm</td><td>Ehrhardt Medizinprodukte GmbH, Geislingen, Germany</td><td>22398330</td><td></td></tr><tr><td>luer lock syringe 5ml</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhoffen, Germany</td><td>Z248010</td><td></td></tr><tr><td>syringe needles</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhoffen, Germany</td><td>Z192368&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Tube 50ml</td><td>BD Biosciences, Erembodegem, Belgium</td><td>352070</td><td></td></tr></tbody></table>

fluorescence-mediated tomography for the detection and quantification of macrophage-related murine intestinal inflammation

Hastalığın fare modelleri bilimsel araştırma için vazgeçilmezdir. Ancak, endoskopi veya tomografik görüntüleme gibi birçok tanılama araçlarını düzenli olarak hayvan modellerinde istihdam değil. Geleneksel deneysel veriler çoğunlukla intra bireysel izleme sınavları önlemek ve çalışma hayvanların gerekli sayıda artışı post mortem ve ex vivo analizlere kullanır. Floresan-aracılı tomografi floresan problar non-invaziv, tekrarlayan, nicel, üç boyutlu bir değerlendirme sağlar. Son derece duyarlı ve özel algılama ve ayrı moleküler hedeflerin karakterizasyonu için izin veren moleküler yapımcıları, kullanımına izin verir. Özellikle, hedeflenen probları gen harekete geçirmek ve protein ekspresyonu inflamasyon, otoimmün hastalığı, enfeksiyon, damar hastalıkları, hücre göç, tumorigenesis, vbolarak analiz etmek için yenilikçi bir araç temsil eder. Vivo algılama ve inflamasyon (Yani, F4/80-pozitif makrofaj infiltrasyonu), yaygın olarak kullanılan bir fare modeli karakterizasyonu için bu makalede, biz bu sofistike görüntüleme teknolojisi üzerinde adım adım yönergeler sağlar bağırsak iltihabı. Bu teknik de bağışıklık hücre veya kök hücre izleme gibi diğer araştırma alanlarda kullanılabilir.

Kolit değerlendirilmesi:
DSS kaynaklı kolit insan IBD benzer ve kilo kaybı, rektal kanama, yüzeysel ülserasyonun ve duyarlı fareler15Mukozal hasara yol açar bağırsak iltihabı kimyasal olarak indüklenen bir fare modeldir. Doğuştan gelen bağışıklık sistemi bağırsak iltihabı10,11gelişimine katkısını incelemek...

Watch this Scientific Journal Video about Fluorescence-mediated Tomography for the Detection and Quantification of Macrophage-related Murine Intestinal Inflammation at JoVE.com

Fluorescence-mediated Tomography for the Detection and Quantification of Macrophage-related Murine Intestinal Inflammation

Hedef özgü probları protein ifade çeşitli hastalık (Örneğin, iltihap, enfeksiyon ve tumorigenesis) gibi moleküler mekanizmaları analiz etmek için yenilikçi bir araç temsil eder. Bu çalışmada, bağırsak makrofaj infiltrasyonu F4/80 özel tomografi Floresans aracılı kullanarak kolit, fare modeli üç boyutlu bir nicel tomografik değerlendirilmesi açıklar.

Floresan-aracılı tomografi algılama ve fare bağırsak iltihabı makrofaj ile ilgili miktar

Murine models of disease are indispensable to scientific research. However, many diagnostic tools such as endoscopy or tomographic imaging are not ...

fluorescence-mediated-tomography-for-detection-quantification

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

8.1K Görüntüleme.  University Hospital Münster. Hedef özgü probları protein ifade çeşitli hastalık (Örneğin, iltihap, enfeksiyon ve tumorigenesis) gibi moleküler mekanizmaları analiz etmek için yenilikçi bir araç temsil eder. Bu çalışmada, bağırsak makrofaj infiltrasyonu F4/80 özel tomografi Floresans aracılı kullanarak kolit, fare modeli üç boyutlu bir nicel tomografik değerlendirilmesi açıklar.

Video: Fluorescence-mediated Tomography for the Detection and Quantification of Macrophage-related Murine Intestinal Inflammation

Computed Tomography-guided Time-domain Diffuse Fluorescence Tomography in Small Animals for Localization of Cancer Biomarkers

Small animal fluorescence molecular imaging (FMI) can be a powerful tool for preclinical drug discovery and development studies1. However, light absorption by tissue chromophores (e.g., hemoglobin, water, lipids, melanin) typically limits optical signal propagation through thicknesses larger than a few millimeters2. Compared to other visible wavelengths, tissue absorption for red and near-infrared (near-IR) light absorption dramatically decreases and non-elastic scattering becomes the dominant light-tissue interaction mechanism. The relatively recent development of fluorescent agents that absorb and emit light in the near-IR range (600-1000 nm), has driven the development of imaging systems and light propagation models that can achieve whole body three-dimensional imaging in small animals3.
Despite great strides in this area, the ill-posed nature of diffuse fluorescence tomography remains a significant problem for the stability, contrast recovery and spatial resolution of image reconstruction techniques and the optimal approach to FMI in small animals has yet to be agreed on. The majority of research groups have invested in charge-coupled device (CCD)-based systems that provide abundant tissue-sampling but suboptimal sensitivity4-9, while our group and a few others10-13 have pursued systems based on very high sensitivity detectors, that at this time allow dense tissue sampling to be achieved only at the cost of low imaging throughput. Here we demonstrate the methodology for applying single-photon detection technology in a fluorescence tomography system to localize a cancerous brain lesion in a mouse model.
The fluorescence tomography (FT) system employed single photon counting using photomultiplier tubes (PMT) and information-rich time-domain light detection in a non-contact conformation11. This provides a simultaneous collection of transmitted excitation and emission light, and includes automatic fluorescence excitation exposure control14, laser referencing, and co-registration with a small animal computed tomography (microCT) system15. A nude mouse model was used for imaging. The animal was inoculated orthotopically with a human glioma cell line (U251) in the left cerebral hemisphere and imaged 2 weeks later. The tumor was made to fluoresce by injecting a fluorescent tracer, IRDye 800CW-EGF (LI-COR Biosciences, Lincoln, NE) targeted to epidermal growth factor receptor, a cell membrane protein known to be overexpressed in the U251 tumor line and many other cancers18. A second, untargeted fluorescent tracer, Alexa Fluor 647 (Life Technologies, Grand Island, NY) was also injected to account for non-receptor mediated effects on the uptake of the targeted tracers to provide a means of quantifying tracer binding and receptor availability/density27. A CT-guided, time-domain algorithm was used to reconstruct the location of both fluorescent tracers (i.e., the location of the tumor) in the mouse brain and their ability to localize the tumor was verified by contrast-enhanced magnetic resonance imaging.
Though demonstrated for fluorescence imaging in a glioma mouse model, the methodology presented in this video can be extended to different tumor models in various small animal models potentially up to the size of a rat17.

Diffuse fluorescence tomography offers a relatively low-cost and potentially high-throughout approach to preclinical in vivo tumor imaging. The methodology of optical data collection, calibration, and image reconstruction is presented for a computed tomography-guided non-contact time-domain system using fluorescent targeting of the tumor biomarker epidermal growth factor receptor in a mouse glioma model.

Kanser BİYOMARKÖRLERİN Yerelleştirme Küçük Hayvanlarda Bilgisayarlı Tomografi eşliğinde Zaman alanı Diffüz Floresans Tomografi

Small animal fluorescence molecular imaging (FMI) can be a powerful tool for preclinical drug discovery and development studies1. However, light ...

Tıp

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that distinguish acute and chronic inflammation in mouse models. With tissue damage or pathogen invasion, neutrophils are the first line of defense, playing a major role in mediating the acute inflammatory response. As the inflammatory reaction progresses, circulating monocytes gradually migrate into the site of injury and differentiate into mature macrophages, which mediate chronic inflammation and promote tissue repair by removing tissue debris and producing anti-inflammatory cytokines. Intraperitoneal injection of luminol (5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione, sodium salt) enables detection of acute inflammation largely mediated by tissue-infiltrating neutrophils. Luminol specifically reacts with the superoxide generated within the phagosomes of neutrophils since bioluminescence results from a myeloperoxidase (MPO) mediated reaction. Lucigenin (bis-N-methylacridinium nitrate) also reacts with superoxide in order to generate bioluminescence. However, lucigenin bioluminescence is independent of MPO and it solely relies on phagocyte NADPH oxidase (Phox) in macrophages during chronic inflammation. Together, luminol and lucigenin allow non-invasive visualization and longitudinal assessment of different phagocyte populations across both acute and chronic inflammatory phases. Given the important role of inflammation in a variety of human diseases, we believe this non-invasive imaging method can help investigate the differential roles of neutrophils and macrophages in a variety of pathological conditions.

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

We describe a non-invasive imaging method for distinguishing inflammatory stages. Systemic delivery of luminol reveals areas of acute inflammation dependent upon MPO activity in neutrophils. In contrast, injection of lucigenin allows for visualization of chronic inflammation dependent upon Phox activity in macrophages.

In vivo Görüntüleme Yöntemi Akut ve Kronik İltihap ayırt

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Fluorescence-quenching of a Liposomal-encapsulated Near-infrared Fluorophore as a Tool for In Vivo Optical Imaging

Optical imaging offers a wide range of diagnostic modalities and has attracted a lot of interest as a tool for biomedical imaging. Despite the enormous number of imaging techniques currently available and the progress in instrumentation, there is still a need for highly sensitive probes that are suitable for in vivo imaging. One typical problem of available preclinical fluorescent probes is their rapid clearance in vivo, which reduces their imaging sensitivity. To circumvent rapid clearance, increase number of dye molecules at the target site, and thereby reduce background autofluorescence, encapsulation of the near-infrared fluorescent dye, DY-676-COOH in liposomes and verification of its potential for in vivo imaging of inflammation was done. DY-676 is known for its ability to self-quench at high concentrations. We first determined the concentration suitable for self-quenching, and then encapsulated this quenching concentration into the aqueous interior of PEGylated liposomes. To substantiate the quenching and activation potential of the liposomes we use a harsh freezing method which leads to damage of liposomal membranes without affecting the encapsulated dye. The liposomes characterized by a high level of fluorescence quenching were termed Lip-Q. We show by experiments with different cell lines that uptake of Lip-Q is predominantly by phagocytosis which in turn enabled the characterization of its potential as a tool for in vivo imaging of inflammation in mice models. Furthermore, we use a zymosan-induced edema model in mice to substantiate the potential of Lip-Q in optical imaging of inflammation in vivo. Considering possible uptake due to inflammation-induced enhanced permeability and retention (EPR) effect, an always-on liposome formulation with low, non-quenched concentration of DY-676-COOH (termed Lip-dQ) and the free DY-676-COOH were compared with Lip-Q in animal trials.

Fluorescence-quenching of a Liposomal-encapsulated Near-infrared Fluorophore as a Tool for In Vivo Optical Imaging

The use of fluorophores for in vivo imaging can be greatly limited by opsonization, rapid clearance, low detection sensitivity and cytotoxic effects on the host. Encapsulation of fluorophores in liposomes by film hydration and extrusion leads to fluorescence quenching and protection which enables in vivo imaging with high detection sensitivity.

Aracı Olarak bir lipozomal-kapsüllü Yakın-Kızılötesi floroforun Floresan-söndürme<em&gt; İn Vivo</em&gt; Optik Görüntüleme

Optical imaging offers a wide range of diagnostic modalities and has attracted a lot of interest as a tool for biomedical imaging. Despite the enormous ...

Biyomühendislik

Hybrid &#181;CT-FMT imaging and image analysis

Fluorescence-mediated tomography (FMT) enables longitudinal and quantitative determination of the fluorescence distribution in vivo and can be used to assess the biodistribution of novel probes and to assess disease progression using established molecular probes or reporter genes. The combination with an anatomical modality, e.g., micro computed tomography (&#181;CT), is beneficial for image analysis and for fluorescence reconstruction. We describe a protocol for multimodal &#181;CT-FMT imaging including the image processing steps necessary to extract quantitative measurements. After preparing the mice and performing the imaging, the multimodal data sets are registered. Subsequently, an improved fluorescence reconstruction is performed, which takes into account the shape of the mouse. For quantitative analysis, organ segmentations are generated based on the anatomical data using our interactive segmentation tool. Finally, the biodistribution curves are generated using a batch-processing feature. We show the applicability of the method by assessing the biodistribution of a well-known probe that binds to bones and joints.

Hybrid  &#181;CT-FMT imaging and image analysis

We describe a protocol for hybrid imaging, combining fluorescence-mediated tomography (FMT) with micro computed tomography (&#181;CT). After fusion and reconstruction, we perform interactive organ segmentation to extract quantitative measurements of the fluorescence distribution.

Hibrid uCT-FMT görüntüleme ve görüntü analizi

Fluorescence-mediated tomography (FMT) enables longitudinal and quantitative determination of the fluorescence distribution in vivo and can be used to ...

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

Myeloid cells are the most abundant immune cells within tumors and have been shown to promote tumor progression. Modern intravital imaging techniques enable the observation of live cellular behavior inside the organ but can be challenging in some types of cancer due to organ and tumor accessibility such as intestine. Direct observation of intestinal tumors has not been previously reported. A surgical procedure described here allows direct observation of myeloid cell dynamics within the intestinal tumors in live mice by using transgenic fluorescent reporter mice and injectable tracers or antibodies. For this purpose, a four-color, multi-region, micro-lensed spinning disk confocal microscope that allows long-term continuous imaging with rapid image acquisition has been used. ApcMin/+ mice that develop multiple adenomas in the small intestine are crossed with c-fms-EGFP mice to visualize myeloid cells and with ACTB-ECFP mice to visualize intestinal epithelial cells of the crypts. Procedures for labeling different tumor components, such as blood vessels and neutrophils, and the procedure for positioning the tumor for imaging through the serosal surface are also described. Time-lapse movies compiled from several hours of imaging allow the analysis of myeloid cell behavior in situ in the intestinal microenvironment.

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

By using transgenic reporter mice and injectable fluorescent labels, long-term intravital spinning disk confocal microscopy enables direct visualization of myeloid cell behavior into intestinal adenoma in the ApcMin/+ colorectal cancer model.

Miyeloid hücrelerin Dynamics Gerçek zamanlı Görüntüleme<em&gt; Süm<sup&gt; Min / +</sup</em&gt; Bağırsak Tümörleri Disk Eşodaklı Mikroskopi Spinning tarafından

Myeloid cells are the most abundant immune cells within tumors and have been shown to promote tumor progression. Modern intravital imaging techniques ...

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions preclinically. However, valid assessment of pathological alterations often requires histological analysis, and when performed ex vivo, necessitates death of the animal. Therefore in conventional experimental settings, intra-individual follow-up examinations are rarely possible. Thus, development of murine endoscopy in live mice enables investigators for the first time to both directly visualize the gastrointestinal mucosa and also repeat the procedure to monitor for alterations. Numerous applications for in vivo murine endoscopy exist, including studying intestinal inflammation or wound healing, obtaining mucosal biopsies repeatedly, and to locally administer diagnostic or therapeutic agents using miniature injection catheters. Most recently, molecular imaging has extended diagnostic imaging modalities allowing specific detection of distinct target molecules using specific photoprobes. In conclusion, murine endoscopy has emerged as a novel cutting-edge technology for diagnostic experimental in vivo imaging and may significantly impact on preclinical research in various fields.

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Small animal imaging techniques allow serial diagnostic examinations and therapeutic interventions in vivo. Recently, the scope of applications has significantly widened and currently includes assessment of colonic tumor development, wound healing and monitoring of inflammation. This protocol illustrates these diverse potential applications of murine endoscopy.

Murin için Endoskop<em&gt; In Vivo</em&gt; Karsinojenez ve bağırsak Değerlendirilmesi Multimodaller Görüntüleme Yara İyileşmesi ve İltihap

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

Quantitative Visualization of Leukocyte Infiltrate in a Murine Model of Fulminant Myocarditis by Light Sheet Microscopy

Light-sheet fluorescence microscopy (LSFM), in combination with chemical clearing protocols, has become the gold standard for analyzing fluorescently labelled structures in large biological specimens, and is down to cellular resolution. Meanwhile, the constant refinement of underlying protocols and the enhanced availability of specialized commercial systems enable us to investigate the microstructure of whole mouse organs and even allow for the characterization of cellular behavior in various live-cell imaging approaches. Here, we describe a protocol for the spatial whole-mount visualization and quantification of the CD45+ leukocyte population in inflamed mouse hearts. The method employs a transgenic mouse strain (CD11c.DTR)that has recently been shown to serve as a robust, inducible model for the study of the development of fulminant fatal myocarditis, characterized by lethal cardiac arrhythmias. This protocol includes myocarditis induction, intravital antibody-mediated cell staining, organ preparation, and LSFM with subsequent computer-assisted image post-processing. Although presented as a highly-adapted method for our particular scientific question, the protocol represents the blueprint of an easily adjustable system that can also target completely different fluorescent structures in other organs and even in other species.

Here, we describe a light-sheet microscopy approach to visualize the cardiac CD45+ leukocyte infiltrate in a murine model of aseptic fulminant myocarditis, which is induced by the intratracheal diphtheria toxin treatment of CD11c.DTR mice.

Bir Fulminan Miyokardit Modelinde Işık Yeri Mikroskopisi İle Lökosit İnfiltrasyonunun Nicel Görselleştirilmesi

Light-sheet fluorescence microscopy (LSFM), in combination with chemical clearing protocols, has become the gold standard for analyzing fluorescently ...

Intravital Imaging of Intraepithelial Lymphocytes in Murine Small Intestine

Intraepithelial lymphocytes expressing &#947;&#948; T cell receptor (&#947;&#948; IEL) play a key role in immune surveillance of the intestinal epithelium. Due in part to the lack of a definitive ligand for the &#947;&#948; T cell receptor, our understanding of the regulation of &#947;&#948; IEL activation and their function in vivo remains limited. This necessitates the development of alternative strategies to interrogate signaling pathways involved in regulating &#947;&#948; IEL function and the responsiveness of these cells to the local microenvironment. Although &#947;&#948; IELs are widely understood to limit pathogen translocation, the use of intravital imaging has been critical to understanding the spatiotemporal dynamics of IEL/epithelial interactions at steady-state and in response to invasive pathogens. Herein, we present a protocol for visualizing IEL migratory behavior in the small intestinal mucosa of a GFP &#947;&#948; T cell reporter mouse using inverted spinning disk confocal laser microscopy. Although the maximum imaging depth of this approach is limited relative to the use of two-photon laser-scanning microscopy, spinning disk confocal laser microscopy provides the advantage of high speed image acquisition with reduced photobleaching and photodamage. Using 4D image analysis software, T cell surveillance behavior and their interactions with neighboring cells can be analyzed following experimental manipulation to provide additional insight into IEL activation and function within the intestinal mucosa.

We describe a method to visualize GFP-labeled &#947;&#948; IELs using intravital imaging of murine small intestine by inverted spinning disk confocal microscopy. This technique enables the tracking of live cells within the mucosa for up to 4 h and can be used to investigate a variety of intestinal immune-epithelial interactions. &#160;

Murine Ince bağırsak INTRAEPİTELYAL lenfosit intravital görüntüleme

Intraepithelial lymphocytes expressing &#947;&#948; T cell receptor (&#947;&#948; IEL) play a key role in immune surveillance of the intestinal ...

Visualization of Gut Microbiota-host Interactions via Fluorescence In Situ Hybridization, Lectin Staining, and Imaging

Measuring the localization of microbes within their in vivo context is an essential step in revealing the functional relationships between the microbiota and the vertebrate gut. The spatial landscape of the gut microbiota is tightly controlled by physical features - intestinal mucus, crypts, and folds - and is affected by host-controlled properties such as pH, oxygen availability, and immune factors. These properties limit the ability of commensal microbes and pathogens alike to colonize the gut stably. At the micron-scale, microbial organization determines the close-range interactions between different microbes as well as the interactions between microbes and their host. These interactions then affect large-scale organ function and host health.
This protocol enables the visualization of the gut microbiota spatial organization from distances between cells to organ-wide scales. The method is based on fixing gut tissues while preserving intestinal structure and mucus properties. The fixed samples are then embedded, sectioned, and stained to highlight specific bacterial species through fluorescence in situ hybridization (FISH). Host features, such as mucus and host cell components, are labeled with fluorescently labeled lectins. Finally, the stained sections are imaged using a confocal microscope utilizing tile-scan imaging at high magnification to bridge the micron to centimeter length scales. This type of imaging can be applied to intestinal sections from animal models and biopsies from human tissues to determine the biogeography of the microbiota in the gut in health and disease.

Visualization of Gut Microbiota-host Interactions via Fluorescence In Situ Hybridization, Lectin Staining, and Imaging

This streamlined protocol details a workflow to detect and image bacteria in complex tissue samples, from fixing the tissue to staining microbes with fluorescent in situ hybridization.

Floresan In Situ Hibridizasyon, Lectin Boyama ve Görüntüleme Yoluyla Gut Mikrobiyota-konak Etkileşimlerinin Görselleştirilmesi

Measuring the localization of microbes within their in vivo context is an essential step in revealing the functional relationships between the microbiota ...

Floresan Reporter miktar tayini ile tüm organ patojen takibi

High&#45;Resolution Three&#45;Dimensional Whole&#45;Organ Tomography of Microbial Infections

Most infections take place within three-dimensional host tissues with intricate anatomy and locally varying host physiology. The positioning of pathogen cells within this diverse environment significantly affects their stress levels, responses, fate, and contribution to the overall progression of the disease and treatment failure. However, due to the technical difficulties in locating &#181;m-sized pathogen cells within cm-sized host organs, this area of research has been relatively unexplored. Here, we present a method for addressing this challenge. We employ serial two-photon tomography and AI-enhanced image analysis to locate individual Salmonella cells throughout the entire spleen, liver lobes, and whole lymph nodes of infected mice. Using fluorescent reporters and in vivo antibody administration, the replication rate of single Salmonella cells, their local interaction with specific immune cells, and bacterial responses to antibiotics can be determined. These methodologies open avenues for a comprehensive examination of infections, their prevention, and treatment within the three-dimensional tissue context.

Yazar Spotlight: Dokularda Antibiyotiklere ve Bağışıklık Sistemine Bakteriyel Tepkilerin Çözülmesi

Here, we describe a procedure that enables organ-wide detection of pathogenic bacteria during infection and quantification of fluorescent reporter activities.

Mikrobiyal enfeksiyonların yüksek çözünürlüklü üç boyutlu tüm organ tomografisi

Most infections take place within three-dimensional host tissues with intricate anatomy and locally varying host physiology. The positioning of pathogen ...

Floresan-aracılı tomografi algılama ve fare bağırsak iltihabı makrofaj ile ilgili miktar

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler