Доктор Даррен Фрид создал это устройство ESLP, и оно использует запатентованную технологию вентиляции с отрицательным давлением и программное обеспечение, которое нельзя увидеть больше нигде в области исследований ESLP. Наша лаборатория ранее показала, что вентиляция с отрицательным давлением вызывает меньшее повреждение легких во время ESLP по сравнению с вентиляцией с положительным давлением. Вероятно, это связано с более физиологическим механизмом вентиляции с отрицательным давлением.
Это устройство и протокол предназначены для продления безопасного времени сохранения донорских легких и восстановления маргинальных легких до приемлемых стандартов трансплантации. Само устройство очень простое в эксплуатации. Самой большой проблемой является хирургическое удаление легких молодой свиньи без причинения каких-либо травм.
Они чрезвычайно хрупкие по сравнению с легкими взрослого человека. Начните с поддержания дыхательного объема выдоха 10 миллилитров на килограмм, увеличивая пиковое давление для максимального альвеолярного набора. Выполните срединную стернотомию.
Используйте электрокоагуляцию для разреза кожи и подкожной клетчатки. Тупо рассекают прикрепления мягких тканей от заднего стола нижней грудины. Используйте стернальную пилу, чтобы разделить грудину.
Вставьте втягивающее устройство и широко раскройте. После выполнения кардиэктомии откройте и удалите плевру средостения с обеих сторон, чтобы обнажить легкие. Затем разделите плевральные прикрепления от диафрагмы к левой нижней доле легкого, используя ретрактор Дивера, чтобы удерживать диафрагму вверх.
Теперь разделите нижнюю легочную связку слева и продолжайте движение вверх к шилуму. Затем отделите нижнюю полую вену и плевральные прикрепления от диафрагмы, а затем втяните диафрагму вверх с помощью ретрактора Дивера. Разделите нижнюю легочную связку с правой стороны и продолжайте движение вверх по направлению к шилуму.
Затем разделите безымянную вену и дугу сосудов, чтобы обнажить трахею. После тупого рассечения ткани, окружающей трахею, зажмите трахею с помощью трубчатого зажима на максимальном вдохе и убедитесь, что дыхательный объем выдоха составляет 10 миллилитров на килограмм. Пересеките трахею и поднимите зажимную часть вверх, чтобы обеспечить хирургическое вытяжение.
Затем рассекают заднюю трахею от пищевода с помощью тупого рассечения тяжелыми ножницами Метценбаума и свободной рукой. Разделите все оставшиеся плевральные прикрепления. Пересеките аорту выше и ниже левого бронха и удалите легкие из грудной клетки с сегментом нисходящей аорты.
Взвесив легкие с помощью зажима, быстро храните их в холодильнике, полном льда. Начните с добавления 500 миллилитров упакованных эритроцитов в контур перфузии, чтобы достичь конечного объема 1,5 литра перфузата. Сделайте фотографии легких для записи данных.
Для биопсии легких обведите участок размером один кубический сантиметр нулевым шелковым швом и завяжите его. Затем иссеките эту связанную часть, используя ножницы для анализа тканей, как описано в текстовой рукописи, и разделите сегмент биопсии. Затем, чтобы закрепить адаптер трубки длиной 3/8 дюйма к главной легочной артерии, возьмитесь за противоположные стороны главной легочной артерии с помощью щипцов или защелок.
Затем вставьте адаптер с полудюймовой частью в главную легочную артерию и удерживайте его на месте, одновременно фиксируя адаптер в нужном положении с помощью шелковых стяжек или стяжек Ethibond. Теперь поместите легкие в положение лежа на спине на силиконовой опорной мембране и подключите их к устройству ESLP. Поместите второй зажим трубки на трахею рядом с местом расположения трахеального бронха.
После удаления более дистального зажима интубируйте трахею эндотрахеальной трубкой и закрепите ее на месте с помощью двух стяжек. Затем зажмите вентиляционную линию с помощью трубчатого зажима, прежде чем отпустить проксимальный зажим из трахеи. Подключите адаптер легочной артерии к линии легочной артерии.
После того, как основная легочная артерия будет деаэрирована, начните время перфузии. На странице настроек нажмите «Запустить обогреватель» и установите температуру 38 градусов по Цельсию. Введите вес свиньи, чтобы рассчитать расход сердечного выброса.
На главной странице установите постоянное положительное давление в дыхательных путях на 20 сантиметров воды и нажмите «Начать непрерывное положительное давление в дыхательных путях». Когда начнется вентиляция, отжмите вентиляционную линию. После обнуления датчика артериального давления зажмите линию легочной артерии над датчиком давления с помощью зажима трубки.
Откройте датчик, нажмите нулевое давление в легочной артерии и нулевой кровоток на странице настроек и подтвердите, что показания обнулены на главной странице. Закройте запорный кран датчика давления, чтобы считывать давление в магистрали. Откройте линию к канюле легочной артерии.
Выберите 10% сердечного выброса на главной странице. Нажмите «Вернуться к руководству PA» и разжмите легочную магистраль. Переключите перфузатный раствор на верхней крышке, прежде чем закрепить его на машине, чтобы предотвратить образование конденсата во время ESLP.
Возьмите 10 миллилитров перфузата для центробежного анализа и наберите нулевой газ артериальной крови. Поместите образец на лед перед центрифугированием. После перфузии легких в течение 10 минут увеличьте поток до 20% сердечного выброса.
Когда температура перфузиата достигнет 32 градусов по Цельсию, закрепите крышку камеры на месте с помощью зажимов, чтобы создать герметичное уплотнение. Убедитесь, что легкие расположены оптимально, а утечки воздуха устранены. Зажмите вентиляционную трубку перед отключением постоянного положительного давления в дыхательных путях.
На странице настроек выберите нулевое внутригрудное давление, давление в дыхательных путях и воздушный поток. Затем подтвердите, что показания обнулены на главной странице. Нажмите кнопку «Запустить CPAP» перед тем, как разжать вентиляционную трубку.
Установите параметры вентиляции, указанные в текстовой рукописи, и нажмите кнопку «Нажмите», чтобы запустить вентиляционное отверстие, чтобы активировать вентиляцию с отрицательным давлением. Прикрепите вентиляционную трубку бокового порта к камере. В течение следующих нескольких вдохов поддерживайте параметры вентиляции, указанные в текстовой рукописи.
После 10 минут перфузии увеличьте поток до 20%, а после 20 минут перфузии увеличьте поток до 30% сердечного выброса. Добавьте в систему декстрозу и инсулин. Оцените функцию легких, используя 50% сердечного выброса и дезоксигенирующий смешанный газ в течение пяти минут, в соответствии с инструкциями по рукописи.
Каждый нечетный час в режиме консервации отбирайте 10-миллилитровый образец перфузата для будущего анализа. Возьмите один миллилитр образца газов артериальной крови до деоксигенатора каждый час, а также из портов до и после деоксигенатора после пяти минут режима оценки. Тенденции среднего давления в легочной артерии, динамической податливости и легочного сосудистого сопротивления в течение 12 часов перфузии и вентиляции могут зависеть от конкретного используемого экспериментального протокола ESLP.
Показана типичная тенденция соотношения парциального давления артериального кислорода и фракции вдыхаемого кислорода в моменты оценки пять и 11 часов во время вентиляции с отрицательным давлением ex-situ перфузии легких. Образование отека является еще одним важным показателем воспаления, связанного с проницаемостью эндотелия, демонстрируя типичное увеличение веса на 30% в конце 12 часов вентиляции с отрицательным давлением ex-situ перфузии легких. Перфузат действует как суррогатный индикатор общего состояния легких.
Таким образом, анализ газов крови на перфузат дает обширную информацию о метаболическом состоянии легких. Во время оценочной модели ESLP, которая происходит через три, пять, семь, девять и 11 часов в течение 12-часового пробега, наблюдается тенденция к повышению парциального давления кислорода в левой артерии. Очень важно быть как можно более осторожным при хирургическом удалении легких, а также двигаться быстро и эффективно.
Создание этого устройства, протокола и лаборатории привело к успешным клиническим испытаниям и нескольким открытиям, которые продлевают сохранение и восстановление донорских легких.
