Травма ишемии органов, имитирующая гемодинамические изменения в модели пересадки печени крыс. Ишемия-реперфузия травмы является общим применением после трансплантации печени. Пациенты с экстрагепатической функции органа, как правило, остаются дольше в больнице, тратят больше и имеет худший прогноз.
Развитие осложнения тесно связано с продолжительностью анхепатической фазы трансплантации печени. Однако фундаментальные исследования травмы ишемии-реперфузии после трансплантации печени показали, что выживаемость после трансплантации печени обратно связана со степенью повреждения внехапличных органов. Основываясь на определении анхаптической фазы, мы смоделировали гемодинамические изменения в трансплантации печени, что привело к ишемии-реперфузии травмы внехапличных органов.
Из этой работы заключается в том, чтобы предоставить подробное описание того, как построить животное модель анхатитической фазы у крыс, фундаментальные исследования в ишемии-кратии травмы после трансплантации печени. Д-р Yuan Yuan несет ответственность за все видео животных операций. Два офтальмологических типса, прямые и изгибающиеся, и межглазные линзы, IOL типсы, офтальмологические ножницы, от одного до двух втягивателей, ватные тампоны, 3-0 хирургических швов, иодоформная марля, швовые иглы, биосистемы, когда это необходимо, и межглазные линзы, IOL миппы используется для отдельных кровеносных сосудов из-за круглых голов.
Аппарат для анестезии животных, де-полива машины, встраивание машины, патологические срез, замороженные машины, ткани слайсер, сушка воздуха печь, нейронный оптический микроскоп, сканер, enflurane для общей анестезии, 4%paraformaldehyde раствор, anyhydrous этанол, ксилен, высокая эффективность парафин воска, гематоксилин-эозин краситель раствор, соляная кислота, Пипетки, центрифуга, автоматический биохимический анализатор, аланиновая амино-трансфераза, комплект ALT, аспартат, амино-трансфераза, комплект АСТ, комплект креатинина. После взвешивания крысы обезболились изофлюраном с помощью аппарата анестезии животных.
После дезинфекции брюшной полости сделайте средний разрез на три сантиметра ниже процесса кифоида с помощью типсов и ножниц. Откройте брюшную полость, разоблачите печень с помощью ретрактора и мобилизуйте гепатогастрическую связку. Используйте ватные тампоны, чтобы аккуратно перевернуть среднюю долей печени и повернуть ее вверх, чтобы разоблачить porta habitis.
Определите желчный проток, портальный вену и печеночную артерию. Нажмите тонкой кишки к левой нижней брюшной полости с помощью хлопчатобумажных свопов и переместить нижнюю полую полую вену вену, изолировать портал вены, печеночной артерии и нижней полой вены над правой почечной вены с внутриглазной линзы, IOL, тибры отмечены 3-0 шелковой нитью каждый со скольжением узла. Разрежьте кожу левой и правой нижних конечностей и выставить бедренную вену с помощью офтальмологических типсов.
Медленно введать низкий молекулярный вес гепарина 625 МЕ/кг через бедренную вену, чтобы гепаринизировать все тело. Ligate вены портала, печеночным артерии, и нижней вены кавы выше правой почечной вены с номером 3-0 швов, продолжительностью 45 минут. Замените тонкий кишечник в брюшной полости и накройте его марлей.
В эти периоды снижается ингаляционная анестезия. Через 45 минут отпустите порталную вену, печеночную артерию и нижняя вена кавы выше правой почечной вены. Шов мышцы и кожи слой за слоем и прекратить ингаляционную анестезию.
Обеспечить послеоперационную анальгезию с использованием подкожного морфина 5 мг/кг каждые четыре часа Наблюдать за крысой до бодрствования и не кормить при температуре 25 плюс-минус два градуса по Цельсию и влажности 50 плюс-минус 10%Животные нагревательные лампы необходимо. В этой модели животных, крысы были случайным образом разделены на пять групп в соответствии с ишемией в течение 15 минут, я 15 группы, 30 минут, Я 30 группы, 45 минут, Я 45 группы, 60 минут, я 60, и фиктивной группы с 10 крыс в каждой группе. Их выживаемость в каждой группе наблюдалась через 14 дней после операции.
Все крысы выжили в I 15, I 30 и фиктивных групп. Восемь выжили в течение 14 дней в группе I 45 и только двое выжили в группе I 60. Результаты показали, что крысы могут терпеть анхепатической фазы в течение 45 минут в не более чем.
В ходе эксперимента, Биосистемы были использованы для записи изменений сердечного ритма и артериального давления, право внутренней сонной артерии intubation до и после анхепатической фазы. Мы обнаружили, что пульс и среднее артериальное давление, MAP крыс, резко изменилась после сосудистой перевязки. После перевязки, печеночная ишемия, заторы и отеки в кишечнике, желудочные варикозные и splenomegaly были очевидны.
80 крыс были случайным образом разделены на восемь групп, включая ишемию в течение 45 минут, T0, reperfusion в течение шести часов, T6, 12 часов, T12, 24 часов, T24, 48 часов, T48, 72 часов, T72, семь дней, T7, в 14 дней, T14, соответственно. Почки, поджелудочная железа, тонкой кишки, сердца и легких ткани были приняты и окрашенные с ним после крыс были принесены в жертву. За исключением сердца, патологические баллы были даны в соответствии со ссылками, соответственно.
Результаты показали, что время максимальной травмы внегепатических органов варьировалось. Это было от шести до 24 часов после операции на поджелудочной железе и от 24 до 48 часов для легких. Наиболее серьезно пострадали желудочно-кишечный тракт и почки после 45 минут ишемии.
Через 24 часа после операции явных нарушений слизистой оболочки кишечника не было, и через 48 часов почки восстановились. Что касается сердца, то с течением времени после лечения через 24-48 часов после операции в тканях были обнаружены местный наркоз клеток миокарда, фрагментация клеток и растворение, инфильтрация воспалительных клеток, а также местное вазодилатация и заторы. Сыворотка была собрана и уровни ALT, AST, креатинина и амилазы были обнаружены автоматическим биохимическим анализатором.
Все показатели достигли максимума в 24-48 часов, в отличие от патологических изменений. Хотя уровни были в основном нормальные 48 часов после операции, патологические повреждения по-прежнему продолжается. Подводя итог, можно сказать, что модель у крыс проста и проще в использовании без микрохирургии и обеспечивает основу для фундаментальных исследований ишемии-реперфузии травмы экстрагепатических органов после печеночных ишемий.
