OP-IVM: Сочетание созревания in vitro после извлечения ооцитов с гинекологической хирургией

Технология OP-IVM является расширением обычного протокола IVM, который сочетает в себе IVM после извлечения ооцитов с обычной гинекологической хирургией. Он подходит для бесплодных или субфертильных женщин, которым необходимо получить гинекологическую операцию перед лечением АРТ или сохранением фертильности, пациентов с синдромом поликистозных яичников с резистентностью кломифену, которые нуждаются в лапароскопической операции по сверлению яичников, бесплодных пациентов, которые нуждаются в доброкачественных гинекологических операциях, таких как гистероскопическая миомэктомия, полипэктомия, трансторакальная резекция перегородки и лапароскопическая операция на трубе, и оофороцистэктомия перед лечением АРТ, а также пациенты с раком и гематологическими заболеваниями, которые получают химиолучевую терапию или лучевую терапию, они могут сделать эту операцию для сохранения фертильности. Поместите ультразвуковой зонд внутрь влагалища, чтобы сканировать и записывать количество фолликулов в обоих яичниках.

Найдите место, ближайшее к яичнику в качестве места пункции, избегая кишечника, мочевого пузыря и крупных кровеносных сосудов. Промыть аспирационную иглу 19 калибра с одним просветом со стабильной по рН средой обработки, затем ввести иглу в яичники под руководством ультразвука. Аспирировать фолликулярную жидкость с помощью иглы под давлением от 80 до 90 миллиметров ртутного столба, слегка вращая иглу, чтобы аспирировать как можно больше фолликулярной жидкости.

Используйте гепарин для снижения вязкости фолликулярной жидкости во время аспирации. Отрегулируйте положение зонда, чтобы держать его как можно ближе к яичникам в любое время и надавить на вагинальную форникс с надлежащей силой, чтобы уменьшить травму и кровотечение. Обязательно завершите аспирацию фолликулярной жидкости в течение 25-30 минут.

Вытащите иглу после финиша в одном яичнике, промойте иглу с помощью погрузочной среды и проколите другую сторону тем же методом. Работая в гомотермической плоскости с 37 градусами Цельсия, подготовьте рабочую муляж, чашку Петри и клеточный ситечко. Промыть культуральная трубку и ситечко предварительно нагретой средой, стабильной по рН.

Фильтруйте аспирированную фолликулную жидкость с помощью 70-микрометрового нейлонового клеточного ситечка, многократно промывая культуральную трубку и ситечко предварительно нагретой средой, стабильной по рН. Убедитесь, что все незрелые КОК полностью перенесены на блюдо культуры. Переведите кровь в чистые среды обработки.

Затем перенесите клеточный ситечко на новую посуду и вымойте его. Аспирировать и перенести носители обработки с КОК, гранулезными клетками и тканями в новое блюдо. Исследуйте КОК под стереоскопом с 40-кратным увеличением.

Быстро переносите незрелые в предварительно подогретую IVM-среду ооцитов. Затем исследуйте КОК в сгустке крови и в клеточном ситечке. Перенесите КОК и среды обработки в предварительно подогретую среду ооцитов IVM.

Культивировать незрелые КОК в течение 28-32 часов при 37 градусах Цельсия в увлажненный воздух, содержащий 5% углекислого газа и 5% кислорода. К декабрю 2019 года OP-IVM использовался для сохранения фертильности 274 пациентов. Одним из примеров был 28-летний пациент, у которого было диагностировано первичное бесплодие, левая придатковая киста и СПКЯ.

Она получила лапароскопическую цистэктомию и OP-IVM в сентябре 2016 года и 27 незрелых КОК. После 28 часов в культуре семь ооцитов в стадии МИИ были отобраны и оплодотворены ИКСИ. Через пять дней две бластоцисты были заморожены.

Один из них был размороженным в феврале 2017 года и перенесен в матку. Пациентка родила здоровую девочку в ноябре. OP-IVM впервые был применен для извлечения ооцитов бесплодных женщин с СПКЯ, которые проходят операцию по сверлению яичников, и теперь его применение может быть распространено на субфертильных женщин, которым необходимо получить доброкачественную гинекологическую операцию, даже женщин с раком для сохранения фертильности.

Это указывает на то, что диапазон применения IVM может быть расширен путем сочетания его с другими традиционными гинекологическими операциями для сохранения женской фертильности.