Значение этого протокола по отношению к предыдущим методам отбора проб простаты заключается в том, что он дает нам более высокую уверенность в ориентации свежих опухолевых тканей для исследований. Таким образом, мы можем взять свежие ткани прямо обратно в лабораторию и использовать его для культуры или изображений, потому что у нас есть высокая уверенность в том, какие образцы опухоли и которые являются доброкачественными. Мой ключевой совет при изучении техники заключается в работе с вашим местным патологоанатомом, так что окончательный диагноз ткани и доклад не скомпрометированы.
Чтобы нацелиться на расположение опухоли, просмотрите изображения МРТ, чтобы измерить расположение над опухолью и найти последовательность, в которой опухоль наиболее заметна в осяной плоскости. Прокрутите аксиальные изображения, чтобы определить изображение, на котором опухоль является самой крупной, и напечатайте изображение для справки. На соответствующем корональном изображении измерьте расстояние от основания предстательной железы до выбранного положения ося и измерьте всю длину простаты от вершины до основания в миллиметрах.
Затем распечатайте эти измерения и отметайте расположение опухоли для справки. После того, как образец был собран, стерилизовать ламинарный капюшон потока и простаты нарезки аппарата с 70% этанола и вес простаты на стандартной шкале в граммах. Затем покрасьте правую сторону синими чернилами и левую сторону образца черными чернилами, покрывающими полную капсулу и семенные пузырьки чернилами, чтобы позволить дискриминацию хирургических полей.
Чтобы нарезать простату, поместите ткань с основанием и вершиной, обращенной к противоположным стенам аппарата с задней стороной вниз и передней стороной вверх. Поместите золотые булавки вокруг образца ткани толкая простаты внутрь немного, если это необходимо для достижения уютно подходят и измерения длины простаты от основания до вершины, чтобы сравнить это измерение с длиной простаты, которая измеряется МРТ. Если простата уменьшилась, отрегулируйте ожидаемое положение нарезки на соответствующий процент сокращения.
Затем измерьте от основания до желаемого поперечного среза и выберите штифт, который находится ближе всего к этому измерению, чтобы нарезать вокруг. Ношение цепной почты перчатки для предотвращения травм, место лезвия нарезки устройства по обе стороны от идентифицированного штифта и использовать спейсер держать лезвия пять миллиметров друг от друга. Чтобы приобрести срез, используйте длинные штрихи, чтобы медленно, но твердо перемещать лезвия вниз, вперед и назад, подтверждая, что полный кусочек был отделен перед разборкой аппарата.
Затем снимите стены и булавки и используйте перчатки, чтобы тщательно перенести кусочек на стерильный кусок пробки. После приобретения образца, визуально проинспектировать поперечный срез для сравнения с аксиальным изображением МРТ. В некоторых случаях область опухоли может показаться бледнее, чем окружающие ткани.
Аккуратно перемешайте поперечный кусочек. Опухоль может чувствовать себя толще, чем окружающие ткани. Используя изображение аксиальной МРТ в качестве руководства, выберите одну или несколько областей для отбора проб и используйте шестимиллиметровый пунш, чтобы нажать вниз на области ткани, представляющие интерес.
Твист ткани удар на месте и вниз против пробки, чтобы обеспечить полное разделение с помощью резкого скальпеля, чтобы отделить образец биопсии от образца по мере необходимости. Когда образец был приобретен, удалите пунш и используйте поршень, чтобы извлечь образец в соответствующий контейнер для последующего анализа вниз по течению. Затем чернила отверстия, где удары были приняты в красном и обратите внимание на расположение каждого удара вместе с весом простаты и любые замечания о цвете ткани и у твердости.
Прикрепите капсулу простаты к пробке, чтобы предотвратить bilging во время фиксации. Погрузите простату и пробку в фиксатор, гарантируя, что образец полностью погружен. В этом репрезентативном анализе, из первых 92 случаев, отобранных, как было попродемонстрировано, 64% образцов содержали по крайней мере 40% опухоли и были представлены в 100 000 геномов проекта без микродиссеции.
ДНК была извлечена и была достаточной урожайности и качества во всех случаях и первоначальный подмножество из 59 из этих образцов была опубликована для сравнения с более ранним методом отбора проб образцов. После этой процедуры, свежие образцы опухоли могут быть использованы для живой визуализации или культуры, что позволяет нам проверить новые биомаркеры, лекарства, и узнать больше о биологии опухоли. Теперь, когда мы используем этот метод регулярно, я смог выдвинуть проект, используя эту ткань для ex vivo культуры, чтобы посмотреть на новые комбинации доклинковой терапии рака простаты.
