Agroinfiltração Forçada a Vácuo para Transformação In planta de Plantas Recalcitrantes: Cacau como Estudo de Caso

Métodos genéticos in vivo são necessários para estudar a função biológica de genes em espécies tropicais perenes e culturas arbóreas hortícolas. No entanto, muitas dessas espécies são recalcitrantes à transformação em todas as gerações. O objetivo desta pesquisa é desenvolver um método simples e eficiente de transformação genética aplicável a plantas de grande porte.

Vou ilustrar as coisas. A transformação genética mediada por agrobactérias de plantas com tecidos de difícil infiltração foi possível por infiltração forçada com bomba de vácuo. No entanto, os protocolos atualmente em uso são limitados a plantas de pequeno porte devido às restrições físicas e econômicas de submeter plantas de grande porte a uma câmara de vácuo.

O tamanho das câmaras de vácuo, que geralmente são dessecadores de laboratório, impede a infiltração a vácuo de plantas muito grandes para caber em dessecadores, como é o caso das plantas lenhosas tropicais. Desenvolvemos um protocolo para infiltração eficiente a vácuo localizado de plantas lenhosas tropicais, possibilitando estudos in vivo de transformação genética de espécies vegetais de grande porte. Este protocolo permitiu superar as limitações de tamanho de plantas para infiltração a vácuo mediada por Agrobacterium em culturas arbóreas hortícolas, como cacau e abacate.

A transformação de folhas aderidas sem cultura de tecidos por infiltração localizada a vácuo pode ser realizada de forma rápida, direta e econômica por laboratórios que já utilizam infiltração a vácuo, uma vez que a mesma bomba e vaso de vácuo podem ser usados sem a necessidade de adicionar equipamentos dispendiosos.