Sistema de Pseudoilhotas Humanas para Avaliação Síncrona da Dinâmica de Biossensores Fluorescentes e Perfis Secretores de Hormônios

Nosso laboratório está trabalhando para entender, prevenir e reverter a disfunção das células beta e outras anormalidades palpebrais no diabetes tipo um e tipo dois. Nossos estudos se concentram na patogênese do diabetes humano, integrando estudos da biologia do pâncreas e das pálpebras humanas e da saúde e doença. Os ilhós humanos são estruturas esféricas 3D, e o acesso às células ao longo de todo o ilhós apresenta alguns desafios experimentais.

Por exemplo, ao tentar introduzir biossensores para entender a sinalização das células dos ilhós, nosso protocolo de pseudopálpebras supera esse desafio realizando manipulações genéticas no estado de célula única e agregando essas células de ilhós humanos transduzidas em pseudopálpebras para estudos a jusante. Nosso sistema de pseudopálpebras nos permite expressar biossensores em todo o ilhó, em vez de apenas na superfície palpebral. Combinado com nossa imagem de células vivas e sistema de microperfusão, podemos medir e co-registrar processos intracelulares dinâmicos com a secreção hormonal a jusante.

Este protocolo poderia ser aplicado para responder a uma variedade de questões científicas importantes. Por exemplo, estratégias de silenciamento gênico poderiam ser combinadas com essa abordagem para entender o impacto de um gene de interesse na função palpebral e vias de sinalização associadas, seja globalmente ou de maneira auto-específica.