Este método ajuda a encontrar melhores tratamentos para a dor do neuroma. A vantagem dessa técnica é que você pode medir a dor do neuroma e a dor generalizada independentemente no mesmo modelo de repetição. O modelo TNT é particularmente adequado para o teste da dor do neuroma, pois o próprio neuroma pode ser estimulado mecanicamente com os monofilamentos de Von Frey.
Comece colocando o rato anestesiado de costas com a cabeça para a esquerda ou para a direita. Coloque a perna a ser operada perto do cirurgião. Exorotar o membro posterior inferior de modo que o maléolo medial fique voltado para cima.
Antes de colocar o rato sob um microscópio cirúrgico estéreo com aumento de 6x, desinfete a área raspada com pelo menos três rodadas alternadas de esfoliação à base de iodo e álcool. Localize o joelho e faça suavemente uma incisão longitudinal de dois a três centímetros sobre o lado medial da pata traseira da panturrilha média ao tornozelo usando um bisturi. Se necessário, abra ainda mais a pele e subcutis com microtesoura até que as camadas musculares fiquem visíveis.
Identifique o feixe neurovascular superficial como duas a três linhas brancas, roxas ou vermelhas que podem se mover livremente sobre as camadas musculares. Manter o feixe neurovascular intacto. Disseque a parte posterior deste feixe.
Em seguida, dissecar para abrir a fáscia entre os músculos gastrocnêmios. Entre a fáscia dos músculos, encontra-se o feixe neurovascular mais profundo com o nervo tibial, que tem cerca de três vezes o tamanho do feixe neurovascular superficial. Use o osso tibial como um marco adicional, pois o nervo tibial voa logo posterior ao osso tibial.
Para dissecar o nervo tibial livre dos feixes vasculares circundantes, mova bruscamente o nervo tibial e corte o tecido exposto que mostra algum estiramento durante a movimentação do nervo tibial. Uma vez exposto todo o nervo tibial, recoloque as camadas musculares para evitar a desidratação do nervo até a dissecção da pele pré-tibial do músculo subcutâneo. Para dissecar a pele pré-tibial da camada muscular subcutânea e fazer um túnel subcutâneo, segure a pele para cima e empurre a ponta romba para o tecido paralelo à pele usando uma ferramenta de microcirurgia romba.
Certifique-se de que a extremidade do túnel esteja localizada pré-tibial ou lateralmente para facilitar a acessibilidade da área para teste do neuroma. Após o corte do nervo tibial na extremidade distal próximo ao tornozelo, alterar a magnificação do microscópio para 10x ou 16x e identificar o epineuro do nervo tibial proximal ao corte feito próximo ao tornozelo. Ou, no caso de uma bifurcação mais proximal do nervo tibial, identificar o epineuro de ambos os ramos planter medial e lateral proximal ao corte feito próximo ao tornozelo.
Coloque cuidadosamente um 8-0 sutura de náilon através do epineuro da extremidade nervosa proximal, segurando o epineuro com uma pinça e colocando a agulha entre o nervo e o epineuro com uma mordida de aproximadamente 0,5 milímetros. Dê uma mordida com a agulha por via subcutânea no final do túnel subcutâneo e puxe a sutura para transpor o nervo lateralmente para o túnel subcutâneo. Fixe a sutura fazendo um nó.
Coloque uma sutura mais espessa de 4-0 com uma cor escura ruborizada até a extremidade nervosa fixada sem penetrar na pele. Certifique-se de que a sutura é visível fora da pele. Verifique se o nervo permanece no lugar depois de mover a pata e os músculos.
Corte as extremidades da sutura com uma extremidade de sutura um pouco mais longa no 4-0, depois no 8-0 sutura. Alterar a ampliação do microscópio para 6x e fechar a pele com suturas intraepidérmicas usando o 8-0 sutura. Limpe suavemente a pele com cloreto de sódio a 0,9% com um cotonete.
Se a sala estiver fria, coloque uma almofada de aquecimento sob uma parte de uma gaiola limpa e coloque o rato na gaiola sob uma toalha de papel em uma posição confortável. Garanta fácil acesso a alimentos e água. Para estimular o nervo estéril para hipersensibilidade, aplique o monofilamento no lado lateral próximo à borda do cabelo sem tocar nas almofadas dos pés.
Para estimular o nervo tibial para hipossensibilidade, aplique o monofilamento no meio da superfície da plantadora da pata traseira. Para o teste do local do neuroma, segure os ratos com o nariz apontado para a prega do cotovelo. Se o rato for segurado na mão direita, sua pata traseira esquerda deve ficar pendurada livremente entre o polegar direito e o indicador.
Depois de verificar se o rato está calmo e confortável enquanto segura, na linha de base, coloque o monofilamento de 15 gramas suavemente na superfície pré-tibial da pata traseira exposta. Após a cirurgia, colocar o monofilamento de 15 gramas sobre a sutura visível e aplicar força suficiente no monofilamento para dobrar os cabelos e segurar por um segundo. Von Frey, do sítio do neuroma, mostrou que, no início do estudo, os ratos responderam a 10% a 15% das aplicações de um monofilamento de 15 gramas.
Uma semana após a cirurgia de transposição do neuroma tibial, a taxa de resposta aumentou de 45% para 50%No lado contralateral, as respostas após a cirurgia foram semelhantes às basais. Cerca de 20% dos ratos não desenvolveram neuroma doloroso e a taxa de resposta não aumentou em relação aos valores basais. Ao final do coto do nervo tibial transeccionado e transposto, 12 semanas após a cirurgia, todos os ratos desenvolveram neuroma.
A transecção do nervo tibial reduziu a sensibilidade mecânica no meio da face plantadora da pata traseira inervada pelo nervo tibial. A hipossensibilidade presente em uma semana após a cirurgia foi significativamente diferente do lado contralateral e basal a partir de três semanas após a cirurgia e permaneceu até 12 semanas após a cirurgia. Na parte lateral do lado plantador da pata traseira inervada pelo nervo sural intacto, os ratos desenvolveram hipersensibilidade mecânica significativamente diferente do lado contralateral e basal a partir de uma semana após a cirurgia.
Persistiu por 12 semanas após a cirurgia. Na pata contralateral, a sensibilidade mecânica não foi afetada em relação à basal nas áreas inervadas pelo nervo sural ou tibial. Lembre-se de criar um off-length do nervo tibial para amplitude de movimento para transposição lateral.
Lembre-se também de marcar este local do neuroma com uma sutura escura.
