OP-IVM: Combinando Maturação In vitro após Recuperação de Oócito com Cirurgia Ginecológica

A tecnologia, OP-IVM, é uma extensão do protocolo IVM convencional que combina IVM após a recuperação de oócito com cirurgia ginecológica de rotina. É adequado para mulheres inférteis ou subfertilas que precisam receber cirurgia ginecológica antes do tratamento de TARV ou preservação da fertilidade, pacientes com síndrome do ovário policístico com resistência ao clomifeno que precisam de uma cirurgia de perfuração ovariana laparoscópica, pacientes inférteis que precisam de cirurgias ginecológicas benignas, como miomectomia histeroscópica, polipectomia, ressecção transtorácica de septo, e cirurgia do tubo laparoscópico, e a ooforocistectomia antes do tratamento da TARV, e também pacientes com câncer e doença hematológica que estão recebendo chemoradioterapia ou radioterapia, podem fazer esta cirurgia para preservação da fertilidade. Coloque a sonda de ultrassom dentro da vagina para escanear e registrar o número de folículos em ambos os ovários.

Encontre o local mais próximo do ovário como local de punção, evitando o intestino, bexiga e vasos sanguíneos grandes. Lave a agulha de aspiração de lúmen único de 19 bitolas com um meio de manuseio estável de pH e, em seguida, injete a agulha nos ovários sob a orientação do ultrassom. Aspirar fluido folicular com a agulha sob uma pressão de 80 a 90 milímetros de mercúrio, girando a agulha ligeiramente para aspirar o máximo de fluido folicular possível.

Use heparina para reduzir a viscosidade do fluido folicular durante a aspiração. Ajuste a posição da sonda para mantê-la o mais perto possível dos ovários o tempo todo e pressione o fornix vaginal com a força adequada para reduzir lesões e sangramentos. Certifique-se de completar a aspiração de fluido folicular dentro de 25 a 30 minutos.

Retire a agulha depois de terminar em um ovário, lave a agulha com o meio de manuseio e puna o outro lado usando o mesmo método. Trabalhando em um apartamento homotérmico de 37 graus Celsius, prepare a mídia de manuseio, placa de Petri e coador de células. Enxágüe o tubo de cultura e o coador com mídia de manuseio estável de pH pré-aquecida.

Filtre o fluido folículo aspirado com um coador de células de nylon de 70 micrômetros, enxaguando repetidamente o tubo de cultura e o coador com meio de manuseio estável de pH pré-aquecido. Certifique-se de que todos os COCs imaturos sejam completamente transferidos para o prato de cultura. Transfira o sangue para uma mídia de manuseio limpo.

Em seguida, transfira o coador de células para um novo prato e lave-o. Aspire e transfira a mídia de manuseio com os COCs, células de granulosa e tecidos para um novo prato. Examine os COCs sob o estereoscópio com 40 vezes a ampliação.

Transfira rapidamente os imaturos para um meio de oócito IVM pré-aquecido. Em seguida, examine os COCs no coágulo sanguíneo e no coador celular. Transfira os COCs e a mídia de manuseio para o meio oócito IVM pré-aquecido.

Cultura os COCs imaturos por 28 a 32 horas a 37 graus Celsius em ar umidificado contendo 5% de dióxido de carbono e 5% de oxigênio. Até dezembro de 2019, o OP-IVM havia sido utilizado para a preservação da fertilidade de 274 pacientes. Um exemplo foi um paciente de 28 anos que foi diagnosticado com infertilidade primária, cisto adnexal e PCOS.

Recebeu cistectomia laparoscópica e OP-IVM em setembro de 2016 e 27 COCs imaturos foram obtidos. Após 28 horas de cultura, sete oócitos na etapa MII foram selecionados e fertilizados pelo ICSI. Depois de cinco dias, dois blastocistos foram congelados.

Um deles foi descongelado em fevereiro de 2017 e transferido para o útero. O paciente deu à luz uma menina saudável em novembro. O OP-IVM foi aplicado pela primeira vez à recuperação de oócitos de mulheres inférteis com PCOS que estão em operação de perfuração ovariana, e agora suas aplicações podem ser expandidas para as mulheres subfertilas que precisam receber operação ginecológica benigna, até mesmo mulheres oncológicas para preservação da fertilidade.

Indica que a gama de aplicação do IVM pode ser expandida combinando-a com outras operações ginecológicas tradicionais para preservação da fertilidade feminina.