우리의 임무는 다기관, 다학제적 협력을 활용하여 충족되지 않은 환자의 요구를 충족하는 새롭고 더 효과적인 조직 공학 및 재생 의학 기술을 개발하는 것입니다. 현재 우리의 주요 초점은 근골격계, 특히 민간인과 부상당한 전사의 체적 근육 손실 부상을 치료하기 위한 기술 개발에 있습니다. 동물 모델에서는 세포가 있거나 없는 생체 재료 및 생체 재료 시스템의 적용부터 조직 공학 골격근의 이식에 이르기까지 다양한 접근 방식이 시도되었습니다.
그러나 이러한 접근법 중 어느 것도 아직 근육 형태와 기능의 완전한 회복을 가져오지 못했습니다. 기능적 결핍을 유발하고 개선된 조직 복구 및 재생을 매개하는 다중 규모, 생체 역학 및 분자 메커니즘의 비교를 위한 표준화된 지표를 포함하여 체적 근육 손실 부상의 전체 스펙트럼을 다루는 더 높은 처리량, 비용 효율적이며 생물학적으로 관련성이 높은 동물 모델의 개발. 체적 근육 손실 부상 및 치료에 대한 대부분의 연구는 사지 및 몸통 근육에 초점을 맞추고 있습니다.
이 근육은 두개골-안면 부위의 근육과 발달 과정이 다르기 때문에 부상과 회복에 다르게 반응할 수 있습니다. 이 지역에서 모델을 개발하는 것이 필수적이며, 여기에서 이를 달성합니다. 여기에 표시된 강력하고 일관된 방법은 부상을 입은 건강한 쥐의 턱 기능에 대한 종단적 평가를 가능하게 합니다.
연구원들은 연구 과정 전반에 걸쳐 여러 시점에서 동물이 부상과 치료에 어떻게 반응하는지 추적할 수 있습니다. 이것은 심각한 부상 후 근육 재생에 참석하는 메커니즘에 대한 또 다른 통찰력을 제공할 것입니다. 시작하려면 마취된 쥐의 무게를 측정하고 왼쪽 측면 위치에 있는 수술 보드에 놓습니다.
얼굴의 오른쪽을 면도하고 수술 부위를 소독한 후 쥐의 협측 부위를 따라 약 2cm를 절개합니다. 둔기 박리를 사용하여 피부와 근막을 분리합니다. 근막을 따라 유사한 절개를 만들고 아래에 있는 교근에서 부드럽게 절개합니다.
협측 및 가장자리 신경을 찾은 후 멸균 수술 마커와 자를 사용하여 제거할 영역을 표시합니다. 마이크로 가위를 사용하여 최종 부상이 150mg의 절제 조직으로 약 4mm 깊이에 도달 할 때까지 조직을 조심스럽게 제거하십시오. 흡수성 6-O를 사용하여 근막을 닫고 흡수되지 않는 5-0 단속 봉합사로 피부를 닫습니다.
시작하려면 Dynamic Muscle Control 소프트웨어를 열고 설정 메뉴에서 InstantStim을 찾아 매개변수를 원하는 값으로 변경합니다. 설정 메뉴에서 데이터를 저장할 자동 저장 폴더를 만들고 선택합니다. 그런 다음 화면 하단에서 AutoSave Base를 찾아 테스트 중인 동물과 관련된 제목으로 변경합니다.
화면 맨 위에서 Sequencer를 선택합니다. 그런 다음 열린 창에서 화면 하단의 시퀀스 열기를 선택합니다. 이제 파일 탐색기에서 미리 만들어진 시퀀스를 선택합니다.
Load Sequence를 클릭한 다음 Close Window를 클릭합니다. 실시간 데이터 수집을 보려면 파일 및 라이브 데이터 모니터를 선택합니다. 그런 다음 Live Data Monitor 창에서 시간 척도, Y-값 최소값 및 Y-값 최대값 위치를 설정합니다.체적 근육 손실로 인해 부상을 입고 마취된 쥐를 코를 콧방울 콘에 단단히 고정하고 누운 자세로 놓습니다.
쥐의 턱 위쪽 절반에 고정 고리를 놓아 코를 플랫폼에 단단히 고정합니다. 그런 다음 쥐의 팔과 가슴에 끈을 놓고 고정하여 쥐의 상반신을 고정합니다. 리그의 플랫폼 근처에 있는 세 개의 회전 손잡이를 사용하여 바이트 레버 위치를 조정하여 X, Y 및 Z 평면을 제어합니다.
상단 손잡이의 도움으로 다른 두 개의 손잡이를 사용하여 물린 레버를 쥐 쪽으로 가져오고 쥐의 턱 바로 위에 있는 레버 끝을 조정합니다. 핀셋을 사용하여 쥐의 아래쪽 이빨에 매달린 고리를 걸어 머리를 고정하고 움직이지 않도록 합니다. 레버의 높이를 조정하여 턱의 장력을 높입니다.
턱을 촉진하고 하악골의 뒤쪽 모서리를 찾습니다. 전극을 모서리 양쪽 주위에 약 2-3mm 간격으로 피하로 배치합니다. 라이브 데이터 모니터 창에서 인스턴트 스팀(Instant Stim) 버튼을 클릭하여 활성화합니다.
그런 다음 필요에 따라 손잡이를 사용하여 전극 배치와 레버 암 위치를 조정합니다. 범위 노브를 돌려 암페어를 조절하기 시작합니다. 그런 다음 조정 노브를 돌려 턱을 자극하는 데 사용되는 전류 범위의 백분율을 조절합니다.
트위치 반응을 최적화한 후 전극이 여전히 제자리에 단단히 고정되어 있는지 확인하고 인스턴트 스팀을 중지합니다. 그런 다음 Live Data Monitor 창에서 Start Sequence 버튼을 클릭하고 자극 주파수 응답을 모니터링합니다. 부상당한 쥐는 체적 근육 손실 후 4주, 8주 및 12주에 기준선에 비해 현저히 낮은 평균 최대 힘을 생성했습니다.
대조군 코호트는 모든 시점에서 일관된 최대 힘을 유지했습니다. 시간이 지남에 따라 대조군과 수복군이 없는 그룹 간에 동물 체중의 유의미한 차이는 관찰되지 않았습니다.
