이 작품은 건강 연구의 캐나다 학회에 의해 지원 하 고, 걸 레-42546 및 걸 레 119514 부여 운영 합니다.

1. 준비의 아미노산 솔루션 <ol><li>준비 및 레이블 두 50 mL 원뿔 원심 분리기 튜브 각 아미노산에 대 한 (하나 둘 다를 위해 각 &#34; 낮은 &#34; 및 &#34; 높은 &#34; 농도).</li>
	<li>순화 된 물 (18.2 ㏁ 25 ° C에서)를 포함 하는 큰 2 L 플라스 크를 준비.</li>
	<li>원하는 농도 도달 (그램)에서 각 아미노산의 양을 계산 하 고 주걱을 사용 하 여 그들의 각각 50 mL 원심 분리기 튜브로 아미노산의 적절 한 금액을 무게. 
	: 참고는 &#34; 높은 &#34; 2의 농도 부정 청구 아미노산, PBS 물 대신 사용 됩니다. 우리는 그들의 낮은 물 가용성 및 낮은 pH를 유지 하기 위해 물 수 대신 PBS를 사용 하 여 그들의 농도 증가 하지 않을 수 있습니다. 또한, 농도 계산 각 아미노산 솔루션에 대 한 40 mL의 최종 볼륨을 사용 하 여 얻은 했다. 모든 아미노산 농도 표 3에 설명 되어 있습니다. 오염을 피하기 위하여 아미노산 사이 주걱을 씻어 해야 합니다. 물 린스, 70% 에탄올으로 닦아 다음 것이 좋습니다.</li>
	<li>순화 된 물 (PBS)의 각 50 mL에 추가 40 mL 혈 청 학적인 피 펫을 사용 하 여 튜브. 튜브와 소용돌이 닫습니다 또는 해산 때까지 적극적으로 악수. 물 목욕 쥡니다 (실내 온도, 130 W, 40 kHz) 용 해도 프로세스에 도움을 사용할 수 있습니다. 
	참고: 다음 아미노산 솔루션은 빛에 민감한 및 알루미늄 호 일로 덮어야 한다: 트립토판, 페닐알라닌, 티로신 (이루어져 방향족 고리 구조) 시스테인 (반응-SH 그룹).</li>
</ol> 2. SAP-AA 솔루션의 준비 <ol><li>준비 20 mL 섬광 튜브 자기 조립에 대 한 펩 티 드. 주어진된 자기 조립 펩 티 드에 대 한 준비 아미노산 솔루션 (각 조합에서에서 이루어집니다 별도 유리병) 당 한 유리병을 준비.</li>
	<li>각 유리병의 바닥에 약 1 ± 0.2 mg 펩 티 드의 무게 (와 함께 한 가독성 또는 그이 하 0.1 mg까지), 높은-성능 분석 균형을 사용 하 여. 무게 후 뚜껑과 뚜껑에 펩 티 드의 정확한 무게를 기록</li>
	<li>펩 티 드, 펩 티 드 (0.1 mg/mL 16 아미노산의 길이가 긴 펩 티 드 또는 0.2 mg/mL에 대 한 자기 조립의 원하는 농도 도달 하기 위하여 포함 된 각 유리병에 적절 한 양의 아미노산 솔루션 (섹션 1에서 준비 하는) 플라스틱 8 아미노산의 길이가 짧은 펩 티 드).</li>
	<li>는 물 목욕 sonicator (130 W, 40 kHz) 실내 온도에, 튜브 내에서 솔루션 물 목욕에 완전히 몰입 하 보장에서 10 분 Sonicate.</li>
</ol> 3. DMSO 약물 또는 약물 에탄올 재고 솔루션의 준비 <ol><li>결합 (이 경우에는 100 %DMSO curcumin)에서 약물의 1 mg와 두 개의 재고 솔루션을 만드는 100% 에탄올과 다른 1mg. 
	참고: 우리는 DMSO curcumin와 에탄올 curcumin 주식 되었고 5 mg/mL 2.5 mg/mL, 각각, 각 용 매;에 있는 다양 한 가용성 때문에 DMSO와 400 µ L 에탄올의 200 µ L을 추가 그러나, 그것은 재고의 집중 관심의 소수 성 약물에 따라 조정 되어야 한다 주의 하는 것이 중요입니다. 약물 용 해도 등 효과적인 생물학 농도 요인이이 가치 결정에 중요 하다. 또한, 그 재고 것입니다 희석 약 및 50-fold DMSO와 에탄올 정립에서 각각, SAP AA 솔루션 (섹션 4 참조)와 함께 하는 마음에 계속. 공식 요구의 수에 따라 재고의 더 큰 볼륨을 준비를 선호 수 있습니다 &#8211;이 경우에, 약 1 mg 이상 사용 될 것 이라고. 주식-20 ° C에 저장 될 수 있다 얼음에 소용돌이 사용 하기 전에 해 동.</li>
	<li>소용돌이 15 리 바이 알 약을 완전히 분해 하는 s.</li>
</ol> 4. 약물 제형의 준비 <ol><li>준비, 1.5 mL microcentrifuge 튜브 각 배합에 대 한. 펩 티 드, 아미노산 (고 농도), 자체 조립 하는 의도를 레이블 튜브 반드시과 공동 용 매.</li>
	<li>마약 DMSO 주식, 또는 적절 한 microcentrifuge 튜브 20 µ L 마약 에탄올 재고 추가 10 µ L.</li>
	<li>추가 990 µ L의 SAP AA 산 성 솔루션을 적절 한 분류 마약 DMSO 주식과 마약 에탄올 주식 포함을 980 µ L을 포함 하는 microcentrifuge 튜브. 이 1 %DMSO 또는 2% 에탄올 1 mL 약물 제형 생산. 
	참고: 모든 curcumin 공식의 최종 농도 프로토콜에 따라 0.5 mg/mL 이었다. 다시 말하지만,이 때 달라 집니다 다른 소수 성 화합물을 사용 하 여 또는 다른 재고 농도와 시작 (단계 3.1 참조)</li> <li>30에 대 한 적극적으로 소용돌이 s 30 분 동안 휴식을 공식 허용</li></ol>
 5. 가용성 테스트 <ol><li>휴식 기간, 소용돌이 적극적으로 한 번 다시 30 후 미</li>
	<li>1 분에 대 한 14,220 x g에서 공식 원심</li>
	<li>강수량 microcentrifuge 관의 하단 (시각화) 하 여 분석.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Holmes, T. C., de Lacalle, S., Su, X., Liu, G., Rich, A., Zhang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+neurite+outgrowth+and+active+synapse+formation+on+self-assembling+peptide+scaffolds.">Extensive neurite outgrowth and active synapse formation on self-assembling peptide scaffolds.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 97 (12), 6728-6733 (2000).</li><li>Davis, M. E., Motion, J. P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injectable+self-assembling+peptide+nanofibers+create+intramyocardial+microenvironments+for+endothelial+cells.">Injectable self-assembling peptide nanofibers create intramyocardial microenvironments for endothelial cells.</a> Circulation. 111 (4), 442-450 (2005).</li><li>Matson, J. B., Stupp, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide+scaffolds+for+regenerative+medicine.">Self-assembling peptide scaffolds for regenerative medicine.</a> Chem. Commun. 48 (1), 26-33 (2012).</li><li>Tatman, P. D., Muhonen, E. G., Wickers, S. T., Gee, A. O., Kim, E., Kim, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptides+for+stem+cell+and+tissue+engineering.">Self-assembling peptides for stem cell and tissue engineering.</a> Biomater. Sci. 4 (4), 543-554 (2016).</li><li>Keyes-Baig, C., Duhamel, J., Fung, S. -. Y., Bezaire, J., Chen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide+as+a+potential+carrier+of+hydrophobic+compounds.">Self-assembling peptide as a potential carrier of hydrophobic compounds.</a> J. Am. Chem. Soc. 126 (24), 7522-7532 (2004).</li><li>Kumar, P., Pillay, V., Modi, G., Choonara, Y. E., du Toit, L. C., Naidoo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptides:+implications+for+patenting+in+drug+delivery+and+tissue+engineering.">Self-assembling peptides: implications for patenting in drug delivery and tissue engineering.</a> Recent Pat. Drug Deliv. Formul. 5 (1), 24-51 (2011).</li><li>Wang, H., Yang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short-peptide-based+molecular+hydrogels:+novel+gelation+strategies+and+applications+for+tissue+engineering+and+drug+delivery.">Short-peptide-based molecular hydrogels: novel gelation strategies and applications for tissue engineering and drug delivery.</a> Nanoscale. 4, 5259-5267 (2012).</li><li>French, K. M., Somasuntharam, I., Davis, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide-based+delivery+of+therapeutics+for+myocardial+infarction.">Self-assembling peptide-based delivery of therapeutics for myocardial infarction.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 96, 40-53 (2016).</li><li>Zhang, S., Holmes, T., Lockshin, C., Rich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+assembly+of+a+self-complementary+oligopeptide+to+form+a+stable+macroscopic+membrane.">Spontaneous assembly of a self-complementary oligopeptide to form a stable macroscopic membrane.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 90 (8), 3334-3338 (1993).</li><li>Bowerman, C. J., Nilsson, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembly+of+amphipathic+&#946;-sheet+peptides:+insights+and+applications.">Self-assembly of amphipathic &#946;-sheet peptides: insights and applications.</a> Biopolymers. 98 (3), 169-184 (2012).</li><li>Amidon, G., Lennern&#228;s, H., Shah, V., Crison, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+theoretical+basis+for+a+biopharmaceutic+drug+classification:+the+correlation+of+in+vitro+drug+product+dissolution+and+in+vivo+bioavailability.">A theoretical basis for a biopharmaceutic drug classification: the correlation of in vitro drug product dissolution and in vivo bioavailability.</a> Pharm. Res. 12 (3), 413-420 (1995).</li><li>Shi, Y., Porter, W., Merdan, T., Li, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+intravenous+delivery+of+poorly+water-soluble+compounds.">Recent advances in intravenous delivery of poorly water-soluble compounds.</a> Expert Opin. Drug Deliv. 6 (12), 1261-1282 (2009).</li><li>Bawa, R., Fung, S. -. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide-based+nanoparticles+enhance+cellular+delivery+of+the+hydrophobic+anticancer+drug+ellipticine+through+caveolae-dependent+endocytosis.">Self-assembling peptide-based nanoparticles enhance cellular delivery of the hydrophobic anticancer drug ellipticine through caveolae-dependent endocytosis.</a> Nanomedicine. 8 (5), 647-654 (2012).</li><li>Liu, J., Zhang, L., Yang, Z., Zhao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+release+of+paclitaxel+from+a+self-assembling+peptide+hydrogel+formed+in+situ+and+antitumor+study+in+vitro.">Controlled release of paclitaxel from a self-assembling peptide hydrogel formed in situ and antitumor study in vitro.</a> Int. J. Nanomed. 6, 2143-2153 (2011).</li><li>Wu, Y., Sadatmousavi, P., Wang, R., Lu, S., Yuan, Y., Chen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide-based+nanoparticles+enhance+anticancer+effect+of+ellipticine+in+vitro+and+in+vivo.">Self-assembling peptide-based nanoparticles enhance anticancer effect of ellipticine in vitro and in vivo.</a> Int. J. Nanomed. 7, 3221-3233 (2012).</li><li>Fung, S. Y., Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-Assembling+Peptide+as+a+Potential+Carrier+for+Hydrophobic+Anticancer+Drug+Ellipticine:+Complexation,+Release+and+In+Vitro+Delivery.">Self-Assembling Peptide as a Potential Carrier for Hydrophobic Anticancer Drug Ellipticine: Complexation, Release and In Vitro Delivery.</a> Adv. Funct. Mater. 19 (1), 74-83 (2009).</li><li>Fung, S. -. Y., Oyaizu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+of+nanoscale+combinations+of+self-assembling+peptides+and+amino+acids+of+the+Src+tyrosine+kinase+inhibitor+in+acute+lung+injury+therapy.">The potential of nanoscale combinations of self-assembling peptides and amino acids of the Src tyrosine kinase inhibitor in acute lung injury therapy.</a> Biomaterials. 32 (16), 4000-4008 (2011).</li><li>Pacheco, S., Kanou, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formulation+of+hydrophobic+therapeutics+with+self-assembling+peptide+and+amino+acid:+A+new+platform+for+intravenous+drug+delivery.">Formulation of hydrophobic therapeutics with self-assembling peptide and amino acid: A new platform for intravenous drug delivery.</a> J. Control. Release. 239, 211-222 (2016).</li></ol>

저자는 공개 없다.

수립 절차에서 다양 한 중요 한 단계 및 문제 해결에 고려해 야 할 점이 있다. 첫째, 우리는 다양 한 구성 요소와 농도 일으로 프로토콜을 통해 여러 개의 소용돌이 단계 모든 농도 균일 하 고 올바른 인지 확인 합니다. 고 농도, 소수 성 아미노산 솔루션의 일부 수 있습니다 여전히 하지 완전히 용 해 vortexing, 후 고이 경우에, 그들은 과정에서 도움을 손으로 적극적으로 흔들릴 수 있습니다. 마찬가?...

얼 간 재생 의학1,2,,34에서 3D 공중 발판으로 광범위 하 게 연구 하는 생체 재료의 클래스는. 그러나 최근에, 그들은 있다 되었습니다 악용 치료제 때문에 그들의 독특한 생물 속성5,6,,78의 납품을 위한 차량으로. 얼 간 자연스럽 게 안정 nanostructures9, 마약 캡슐화 하 고 보호 하는 수단 제공으로 조립. 얼 간은 amphipathic, 소수 성 및 친수성 아미노산 반복, 운전의 특정 패턴의 구성 그들의 자기 조립을9,10 , 소수 성 및 친수성 사이 매체 역할을 수 있도록 환경입니다. 따라서, 소수 성 약물-임상 배달에 있는 매우 낮은 생체 이용률과 신체에 흡수 수성 환경11,12 -가용성의 부족으로 인해 얼 간은 배달 약속 차량입니다. 또한, 그들의 순서 패턴 또한 그 얼 간 합리적으로 설계 하 고 수 하 어떤 주어진 약물 호환성 최대화 또는 복합 (즉, 기능 그룹에 따라) 추가 가용성 엔지니어링을 의미 합니다.
얼 간 효과적인 마약 배달 차량 많은 생체 외에서 그리고 vivo에서 설정13,14,,1516으로 적용 되어 있다. 그들은 또한 중대 한 안전 및 생체 적합성 표시. 그러나, SAP 약물 준비의 낮은 osmolarity, 때문에 그들은 임상 설정13에서 정 맥 주사에 대 한 사용할 수 없습니다. 이 구속을 고려 하면 우리 최근 얼 간 독성 공동의 사용을 감소 하 고 배합 osmolarity 증가 아미노산 솔루션과 결합 하는 전략을 개발 했다 따라서, 임상 관련성. 우리 얼 간의 빌딩 블록으로 아미노산을 사용 하기로 이미 임상 허용, 고 얼 간와 함께, 그들은 증가 소수 성 약물의 용 해도17,18필수 SAP의 양을 줄이는.
우리는 자세히 조사 SAP AA 조합 소수 성 약물의 용 해도 및 후속 배달을 위한 일반화 된 플랫폼으로 여러 단계의 심사 파이프라인을 만들고 Src 반응 억제제, PP2 모델 소수 성 화합물으로 서 그것을 적용 하 여. 이 과정에서 우리는 정립의 구성 요소를 변경-궁극적으로 테스트 6 다른 얼 간, 2 다양 한 농도 (낮은, 높은, 낮은에 따라 기존 임상 응용 프로그램에 높은 농도에서 모두 20 아미노산의 효과 검사 농도 했다 2 배, 3 배, 또는 물에서 각 아미노산의 최대 용 해도 기반으로 하는 임상 농도 5 배), 그리고 2 다른 공동 용 매-및 추가 분석을 위해 PP2 solubilized 선택한 조합. 이 약물 배합 vivo 모델 intratracheal 및 정 맥 행정을 사용 하 여 세포 배양에 약 배달 차량으로 효과가 입증 했다. 마찬가지로, 우리의 작업 solubilizing 여러 SAP AA 조합의 다양성에 감동을; 수성 환경에서 구조적으로 다른 소수 성 화합물 특히,는 약 rottlerin 및 curcumin18. 이 원고는 SAP AA 배합 방법 및 우리의 심사 파이프라인에서 기본 단계의 예로 curcumin 가용성의 분석을 설명합니다. 이 프로토콜 어떤 주어진된 소수 성 화합물을 분해 최적의 SAP AA 조합에 대 한 화면으로 간단 하 고 재현성을 제공 합니다.

<table><tbody><tr><td>EAK16-I</td><td>CanPeptide Inc.</td><td>Custom peptide</td><td>Sequence: AEAKAEAKAEAKAEAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &gt;95% pure by HPLC</td></tr><tr><td>EAK16-II</td><td>CanPeptide Inc.</td><td>Custom peptide</td><td>Sequence: AEAEAKAKAEAEAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &gt;95% pure by HPLC</td></tr><tr><td>EAK16-IV</td><td>CanPeptide Inc.</td><td>Custom peptide</td><td>Sequence: AEAEAEAEAKAKAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &gt;95% pure by HPLC</td></tr><tr><td>EFK8-II</td><td>CanPeptide Inc.</td><td>Custom peptide</td><td>Sequence: FEFEFKFK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &gt;95% pure by HPLC</td></tr><tr><td>A6KE</td><td>CanPeptide Inc.</td><td>Custom peptide</td><td>Sequence: AAAAAAKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &gt;95% pure by HPLC</td></tr><tr><td>P6KE</td><td>CanPeptide Inc.</td><td>Custom peptide</td><td>Sequence: PPPPPPPKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &gt;95% pure by HPLC</td></tr><tr><td>Alanine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7469-100G</td><td>L-Alanine</td></tr><tr><td>Isoleucine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I7403-100G</td><td>L-Isoleucine</td></tr><tr><td>Leucine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L8912-100G</td><td>L-Leucine</td></tr><tr><td>Methionine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M5308-100G</td><td>L-Methionine</td></tr><tr><td>Proline</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5607-100G</td><td>L-Proline</td></tr><tr><td>Valine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>V0513-100G</td><td>L-Valine</td></tr><tr><td>Phenylalanine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5482-100G</td><td>L-Phenylalanine</td></tr><tr><td>Tryptophan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8941-100G</td><td>L-Tryptophan</td></tr><tr><td>Tyrosine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8566-100G</td><td>L-Tyrosine</td></tr><tr><td>Glycine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8790-100G</td><td>L-Glycine</td></tr><tr><td>Asparagine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A4159-100G</td><td>L-Asparagine</td></tr><tr><td>Glutamine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8540-100G</td><td>L-Glutamine</td></tr><tr><td>Serine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7219-100G</td><td>L-Serine</td></tr><tr><td>Threonine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8441-100G</td><td>L-Threonine</td></tr><tr><td>Histidine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H6034-100G</td><td>L-Histidine</td></tr><tr><td>Lysine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L5501-100G</td><td>L-Lysine</td></tr><tr><td>Arginine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8094-100G</td><td>L-Arginine</td></tr><tr><td>Aspartic Acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7219-100G</td><td>L-Aspartic Acid</td></tr><tr><td>Glutamic Acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8415-100G</td><td>L-Glutamic Acid</td></tr><tr><td>Cysteine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C7352-100G</td><td>L-Cysteine</td></tr><tr><td>Dimethyl Sulfoxide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4540-500ML</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>277649-100ML</td><td>Anhydrous</td></tr><tr><td>Curcumin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>08511-10MG</td><td>Hydrophobic drug, curcumin</td></tr><tr><td>Rottlerin</td><td>EMD Millipore</td><td>557370-10MG</td><td>Hydrophobic drug, rottlerin</td></tr><tr><td>PP2</td><td>Enzo&amp;nbsp;</td><td>BML-EI297-0001</td><td>Hydrophobic drug, PP2</td></tr><tr><td>Scintillation Vials</td><td>VWR</td><td>2650-66022-081</td><td>Borosilicate Glass, with Screw Cap, 20 mL. Vials for weighing peptide.</td></tr><tr><td>Falcon 50 mL Conical Centrifugation Tubes</td><td>VWR</td><td>352070</td><td>Polypropylene, Sterile, 50 mL. For amino acid solutions.</td></tr></tbody></table>

solubility of hydrophobic compounds in aqueous solution using combinations of self-assembling peptide and amino acid

자가 조립 펩 티 드 (얼 간)는 임상 응용 프로그램; 소수 성 치료제의 배달에 대 한 유망한 차량 그들의 amphipathic 속성의 수성 환경에서 소수 성 화합물을 분해 하도록 수 있습니다. 그러나, 자가 조립 펩 티 드 솔루션은 가난한 혈액 호환성 (예를 들어, 낮은 osmolarity), 정 맥 행정을 통해 그들의 임상 응용 프로그램을 방해. 우리는 최근이 아미노산 솔루션 (SAP-AA) 약물 용 해도 향상 및 배합 osmolarity 임상 사용에 대 한 요구 사항에 도달 증가 얼 간 결합 소수 성 약물 전달에 대 한 일반화 된 플랫폼을 개발 했습니다. 이 공식 전략 3 구조적으로 다른 소수 성 화합물-PP2, rottlerin, 및 curcumin-그 다양성을 설명 하기 위하여의 맥락에서 철저 하 게 테스트 되었습니다. 또한, 우리 6 다른 얼 간, 낮은 농도에서 20 자연스럽 게 기존 아미노산 및 두 개의 서로 다른 공동 용 디 메 틸 sulfoxide (DMSO) 및 에탄올을 분석 하 여 배합 구성 요소 변경의 효과 검사 합니다. 특정된 소수 성 약물 및 공식화 억제제, PP2, 치료 기능에 대 한 구성 요소를 최적화에 효과가 입증 하는 우리의 전략은 체 외에서 그리고 vivo에서모두 관찰 되었다. 이 원고는 소수 성 화합물 및 기능적 연구에이 공식의 사용 가능성을 향한 첫 걸음으로 용 해도의 분석에 대 한 SAP-AA 조합을 사용 하 여 우리의 일반적인된 배합 방법을 설명 합니다. 우리는 소수 성 화합물, curcumin의 정립에 대 한 대표적인 용 해도 결과 포함 하 고 어떻게 우리의 방법론 미래 생물학 연구 및 질병 모델에 대 한 플랫폼 역할을 토론.

소수 성 약물, curcumin에 대 한 우리 공식 증거의 원칙으로 하나의 SAP, EAK16-II와 함께에서 낮은 농도에서 아미노산을 자연스럽 게 존재 하는 모든 20를 사용 하 여 제작. 우리는 또한 공식 공동 용 매로 DMSO와 에탄올을 사용 하 여 테스트. 총에서이 각각 서로 다른 구성 요소를 포함 하는 40 curcumin 공식 생산. Src 억제제, PP2를 사용 하 여 우리의 이전 연구에 우리 SAP (6 총)와 아미?...

Watch this Scientific Journal Video about Solubility of Hydrophobic Compounds in Aqueous Solution Using Combinations of Self-assembling Peptide and Amino Acid at JoVE.com

Solubility of Hydrophobic Compounds in Aqueous Solution Using Combinations of Self-assembling Peptide and Amino Acid

자기 조립 펩타이드와 아미노산의 조합을 사용 하 여 수 용액에서 소수 성 화합물의 용 해도

이 프로토콜 자체 조립 펩타이드와 아미노산 솔루션의 조합을 사용 하는 수성 환경에서 소수 성 화합물을 녹 이기의 임상 적용 방법을 설명 합니다. 우리의 방법은 소수 치료 학, 임상 설정으로 안전 하 고 효율적 수단 가용성 및 배달 방법의 부족의 주요 한계를 해결 합니다.

Self-assembling peptides (SAPs) are promising vehicles for the delivery of hydrophobic therapeutics for clinical applications; their amphipathic ...

solubility-hydrophobic-compounds-aqueous-solution-using-combinations

Universidad de Cartagena UDEC

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Organic Chemistry

Medicine

Unit 1

Covalent Bonding and Structure

SCIENTISTS IN ACTION

16.6K 조회수.  University Health Network. 이 프로토콜 자체 조립 펩타이드와 아미노산 솔루션의 조합을 사용 하는 수성 환경에서 소수 성 화합물을 녹 이기의 임상 적용 방법을 설명 합니다. 우리의 방법은 소수 치료 학, 임상 설정으로 안전 하 고 효율적 수단 가용성 및 배달 방법의 부족의 주요 한계를 해결 합니다.

비디오: Solubility of Hydrophobic Compounds in Aqueous Solution Using Combinations of Self-assembling Peptide and Amino Acid

Formation of Ordered Biomolecular Structures by the Self-assembly of Short Peptides

In nature, complex functional structures are formed by the self-assembly of biomolecules under mild conditions. Understanding the forces that control self-assembly and mimicking this process in vitro will bring about major advances in the areas of materials science and nanotechnology. Among the available biological building blocks, peptides have several advantages as they present substantial diversity, their synthesis in large scale is straightforward, and they can easily be modified with biological and chemical entities1,2. Several classes of designed peptides such as cyclic peptides, amphiphile peptides and peptide-conjugates self-assemble into ordered structures in solution. Homoaromatic dipeptides, are a class of short self-assembled peptides that contain all the molecular information needed to form ordered structures such as nanotubes, spheres and fibrils3-8. A large variety of these peptides is commercially available.
This paper presents a procedure that leads to the formation of ordered structures by the self-assembly of homoaromatic peptides. The protocol requires only commercial reagents and basic laboratory equipment. In addition, the paper describes some of the methods available for the characterization of peptide-based assemblies. These methods include electron and atomic force microscopy and Fourier-Transform Infrared Spectroscopy (FT-IR). Moreover, the manuscript demonstrates the blending of peptides (coassembly) and the formation of a &#34;beads on a string&#34;-like structure by this process.9 The protocols presented here can be adapted to other classes of peptides or biological building blocks and can potentially lead to the discovery of new peptide-based structures and to better control of their assembly.

This paper describes the formation of highly ordered peptide-based structures by the spontaneous process of self-assembly. The method utilizes commercially available peptides and common lab equipment. This technique can be applied to a large variety of peptides and may lead to the discovery of new peptide-based assemblies.

짧은 펩타이드의 자기 조립에 의해 주문 생체 고분자 구조의 형성

In nature, complex functional structures are formed by the self-assembly of biomolecules under mild conditions. Understanding the forces that control ...

연구

화학

Solid-phase Submonomer Synthesis of Peptoid Polymers and their Self-Assembly into Highly-Ordered Nanosheets

Peptoids are a novel class of biomimetic, non-natural, sequence-specific heteropolymers that resist proteolysis, exhibit potent biological activity, and fold into higher order nanostructures. Structurally similar to peptides, peptoids are poly N-substituted glycines, where the side chains are attached to the nitrogen rather than the alpha-carbon. Their ease of synthesis and structural diversity allows testing of basic design principles to drive de novo design and engineering of new biologically-active and nanostructured materials.
Here, a simple manual peptoid synthesis protocol is presented that allows the synthesis of long chain polypeptoids ( up to 50mers) in excellent yields. Only basic equipment, simple techniques (e.g. liquid transfer, filtration), and commercially available reagents are required, making peptoids an accessible addition to many researchers' toolkits. The peptoid backbone is grown one monomer at a time via the submonomer method which consists of a two-step monomer addition cycle: acylation and displacement. First, bromoacetic acid activated in situ with N,N'-diisopropylcarbodiimide acylates a resin-bound secondary amine. Second, nucleophilic displacement of the bromide by a primary amine follows to introduce the side chain. The two-step cycle is iterated until the desired chain length is reached. The coupling efficiency of this two-step cycle routinely exceeds 98% and enables the synthesis of peptoids as long as 50 residues. Highly tunable, precise and chemically diverse sequences are achievable with the submonomer method as hundreds of readily available primary amines can be directly incorporated.
 
Peptoids are emerging as a versatile biomimetic material for nanobioscience research because of their synthetic flexibility, robustness, and ordering at the atomic level. The folding of a single-chain, amphiphilic, information-rich polypeptoid into a highly-ordered nanosheet was recently demonstrated. This peptoid is a 36-mer that consists of only three different commercially available monomers: hydrophobic, cationic and anionic. The hydrophobic phenylethyl side chains are buried in the nanosheet core whereas the ionic amine and carboxyl side chains align on the hydrophilic faces. The peptoid nanosheets serve as a potential platform for membrane mimetics, protein mimetics, device fabrication, and sensors. Methods for peptoid synthesis, sheet formation, and microscopy imaging are described and provide a simple method to enable future peptoid nanosheet designs.

A simple and general manual peptoid synthesis method involving basic equipment and commercially available reagents is outlined, enabling peptoids to be easily synthesized in most laboratories. The synthesis, purification and characterization of an amphiphilic peptoid 36mer is described, as well as its self-assembly into highly-ordered nanosheets.

높은 명령으로 Nanosheets에 Peptoid 폴리머 및 자기 조립의 고체 상 합성 Submonomer

Peptoids are a novel class of biomimetic, non-natural, sequence-specific heteropolymers that resist proteolysis, exhibit potent biological activity, and ...

생체공학

Facile Protocol for the Synthesis of Self-assembling Polyamine-based Peptide Amphiphiles (PPAs) and Related Biomaterials

Polyamine-based Peptide Amphiphiles (PPAs) are a new class of self-assembling amphiphilic biomaterials-related to the peptide amphiphiles (PAs). Traditional PAs possess charged amino acids as solubilizing groups (lysine, arginine), which are directly connected to a lipid segment or can contain a linker region made of neutral amino acids. Tuning the peptide sequence of PAs can yield diverse morphologies. Similarly, PPAs possess a hydrophobic segment and neutral amino acids, but also contain polyamine molecules as water solubilizing (hydrophilic) groups. As is the case with PAs, PPAs can also self-assemble into diverse morphologies, including small rods, twisted nano-ribbons, and fused nano-sheets, when dissolved in water. However, the presence of both primary and secondary amines on a single polyamine molecule poses a significant challenge when synthesizing PPAs. In this paper, we show a simple protocol, based on literature precedents, to achieve a facile synthesis of PPAs using solid phase peptide synthesis (SPPS). This protocol can be extended to the synthesis of PAs and other similar systems. We also illustrate the steps that are needed for cleavage from the resin, identification, and purification.

Facile Protocol for the Synthesis of Self-assembling Polyamine-based Peptide Amphiphiles PPAs and Related Biomaterials

The synthesis of polyamine-based peptide amphiphiles (PPAs) is a significant challenge due to the presence of multiple amine nitrogens, which requires judicious use of protecting groups to mask these reactive functionalities. In this paper, we describe a facile method for the preparation of these new class of self-assembling molecules.

Polyamine 기반 펩타이드 Amphiphiles (PPAs) 및 관련된 생체 자기 조립의 합성에 대 한 손쉬운 프로토콜

Polyamine-based Peptide Amphiphiles (PPAs) are a new class of self-assembling amphiphilic biomaterials-related to the peptide amphiphiles (PAs). ...

Synthesis and Characterization of 1,2-Dithiolane Modified Self-Assembling Peptides

This report focuses on the synthesis of an N-terminus 1,2-dithiolane modified self-assembling peptide and the characterization of the resulting self-assembled supramolecular structures. The synthetic route takes advantage of solid-phase peptide synthesis with the on-resin coupling of the dithiolane precursor molecule, 3-(acetylthio)-2-(acetylthiomethyl)propanoic acid, and the microwave-assisted thioacetate deprotection of the peptide N-terminus before final cleavage from the resin to yield the 1,2-dithiolane modified peptide. After the high-performance liquid chromatography (HPLC) purification of the 1,2-dithiolane peptide, derived from the nucleating core of the A&#946; peptide associated with Alzheimer&#39;s disease, the peptide is shown to self-assemble into cross-&#946; amyloid fibers. Protocols to characterize the amyloid fibers by Fourier-transform infrared spectroscopy (FT-IR), circular dichroism spectroscopy (CD) and transmission electron microscopy (TEM) are presented. The methods of N-terminal modification with a 1,2-dithiolane moiety to well-characterized self-assembling peptides can now be explored as model systems to develop post-assembly modification strategies and explore dynamic covalent chemistry on supramolecular peptide nanofiber surfaces.

A protocol for the synthesis of a 1,2-dithiolane modified peptide and the characterization of the supramolecular structures resulting from the peptide self-assembly.

합성 및 특성 1, 2-Dithiolane의 수정 자가 조립 펩 티 드

This report focuses on the synthesis of an N-terminus 1,2-dithiolane modified self-assembling peptide and the characterization of the resulting ...

Synthesis of Information-bearing Peptoids and their Sequence-directed Dynamic Covalent Self-assembly

This protocol presents the use of Lewis acidic multi-role reagents to circumvent kinetic trapping observed during the self-assembly of information-encoded oligomeric strands mediated by paired dynamic covalent interactions in a manner mimicking the thermal cycling commonly employed for the self-assembly of complementary nucleic acid sequences. Primary amine monomers bearing aldehyde and amine pendant moieties are functionalized with orthogonal protecting groups for use as dynamic covalent reactant pairs. Using a modified automated peptide synthesizer, the primary amine monomers are encoded into oligo(peptoid) strands through solid-phase submonomer synthesis. Upon purification by high-performance liquid chromatography (HPLC) and characterization by electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS), sequence-specific oligomers are subjected to high-loading of a Lewis acidic rare-earth metal triflate which both deprotects the aldehyde moieties and affects the reactant pair equilibrium such that strands completely dissociate. Subsequently, a fraction of the Lewis acid is extracted, enabling annealing of complementary sequence-specific strands to form information-encoded molecular ladders characterized by matrix assisted laser desorption/ionization mass spectrometry (MALDI-MS). The simple procedure outlined in this report circumvents kinetic traps commonly experienced in the field of dynamic covalent assembly and serves as a platform for the future design of robust, complex architectures.

A protocol is presented for the synthesis of information-encoded peptoid oligomers and for the sequence-directed self-assembly of these peptoids into molecular ladders using amines and aldehydes as dynamic covalent reactant pairs and Lewis acidic rare-earth metal triflates as multi-role reagents.

정보 베어링 펩토이드의 합성과 시퀀스 지향 동적 공유자 자체 조립

This protocol presents the use of Lewis acidic multi-role reagents to circumvent kinetic trapping observed during the self-assembly of information-encoded ...

Self-Assembly of Hybrid Lipid Membranes Doped with Hydrophobic Organic Molecules at the Water/Air Interface

Because of their unique properties, including an ultrathin thickness (3-4 nm), ultrahigh resistivity, fluidity and self-assembly ability, lipid bilayers can be readily functionalized and have been used in various applications such as bio-sensors and bio-devices. In this study, we introduced a planar organic molecule: copper (II) 2,9,16,23-tetra-tert-butyl-29H,31H-phthalocyanine (CuPc) to dope lipid membranes. The CuPc/lipid hybrid membrane forms at the water/air interface by self-assembly. In this membrane, the hydrophobic CuPc molecules are located between the hydrophobic tails of lipid molecules, forming a lipid/CuPc/lipid sandwich structure. Interestingly, an air-stable hybrid lipid bilayer can be readily formed by transferring the hybrid membrane onto a Si substrate. We report a straightforward method for incorporating nanomaterials into a lipid bilayer system, which represents a new methodology for the fabrication of biosensors and biodevices.

We report a protocol for producing a hybrid lipid membrane at the water/air interface by doping the lipid bilayer with copper (II) 2,9,16,23-tetra-tert-butyl-29H,31H-phthalocyanine (CuPc) molecules. The resulting hybrid lipid membrane has a lipid/CuPc/lipid sandwich structure. This protocol can also be applied to the formation of other functional nanomaterials.

물/공기 인터페이스에서 소수성 유기 분자와 함께 도핑 하이브리드 지질 막의 자체 조립

Because of their unique properties, including an ultrathin thickness (3-4 nm), ultrahigh resistivity, fluidity and self-assembly ability, lipid bilayers ...

<meta charset="utf8"></head><body> 펩타이드 하이드로겔: ECF-5의 환경적으로 반응하는 겔화 방법

Preparation of Mechanically Stable Self-Assembled Peptides Hydrogels

Peptide hydrogels are highly hydrophilic, three-dimensional network gels formed by the self-assembly of nanofibers or polymers, creating water-locking networks. Their morphology closely resembles that of the extracellular matrix, allowing them to exhibit both the biological functions of peptides and responsive gelation properties. These unique characteristics have led to their extensive application in tissue engineering, three-dimensional cell culture, cancer therapy, regenerative medicine, and other biomedical fields. This article describes three methods for preparing ECF-5 peptide hydrogels using self-assembling peptides with environmentally responsive gelation processes: (1) pH-responsive gelation: varying pH levels induce the protonation or deprotonation of amino acid residues, altering electrostatic interactions between peptide molecules and promoting their self-assembly into hydrogels; (2) Metal ion addition: polyvalent metal ions chelate with negatively charged amino acid residues, acting as bridges between peptides to form a network hydrogel; (3) Solvent exchange: hydrophobic peptides are initially dissolved in non-polar organic solvents and subsequently induce self-assembly into hydrogels upon transitioning to a polar aqueous environment. These methods utilize conventional experimental procedures to facilitate peptide self-assembly into hydrogels. By designing peptide sequences to align with specific gelation-inducing conditions, it is possible to achieve finely tuned micro/nanostructures and biological functions, highlighting the significant potential of peptide hydrogels in the biomedical domain.

<meta charset="utf8"></head><body>저자 스포트라이트: 우수한 생체 적합성을 위한 자체 조립 섬유 및 펩타이드 하이드로겔 생산 개선

This protocol presents three fast and simple preparation methods that use environmental conditions to trigger the self-assembly of peptides into hydrogels. Additionally, the characterization of peptide hydrogels is described, demonstrating that mechanically stable peptide hydrogels can be formed under these straightforward conditions.

기계적으로 안정적인 자체 조립 펩타이드 하이드로겔의 제조

Peptide hydrogels are highly hydrophilic, three-dimensional network gels formed by the self-assembly of nanofibers or polymers, creating water-locking ...

생화학

A Tripeptide-Stabilized Nanoemulsion of Oleic Acid

We describe a method to produce a nanoemulsion composed of an oleic acids-Pt(II) core and a lysine-tyrosine-phenylalanine (KYF) coating (KYF-Pt-NE). The KYF-Pt-NE encapsulates Pt(II) at 10 wt. %, has a diameter of 107 &#177; 27 nm and a negative surface charge. The KYF-Pt-NE is stable in water and in serum, and is biologically active. The conjugation of a fluorophore to KYF allows the synthesis of a fluorescent nanoemulsion that is suitable for biological imaging. The synthesis of the nanoemulsion is performed in an aqueous environment, and the KYF-Pt-NE forms via self-assembly of a short KYF peptide and an oleic acids-platinum(II) conjugate. The self-assembly process depends on the temperature of the solution, the molar ratio of the substrates, and the flow rate of the substrate addition. Crucial steps include maintaining the optimal stirring rate during the synthesis, permitting sufficient time for self-assembly, and pre-concentrating the nanoemulsion gradually in a centrifugal concentrator.

This protocol describes an efficient method to synthesize a nanoemulsion of an oleic acids-platinum(II) conjugate stabilized with a lysine-tyrosine-phenylalanine (KYF) tripeptide. The nanoemulsion forms under mild synthetic conditions via self-assembly of the KYF and the conjugate.

올레산의 Tripeptide 안정 Nanoemulsion

We describe a method to produce a nanoemulsion composed of an oleic acids-Pt(II) core and a lysine-tyrosine-phenylalanine (KYF) coating (KYF-Pt-NE). The ...

자기 조립 펩타이드와 아미노산의 조합을 사용 하 여 수 용액에서 소수 성 화합물의 용 해도

요약

더 많은 비디오 탐색

이 비디오의 챕터

짧은 펩타이드의 자기 조립에 의해 주문 생체 고분자 구조의 형성

높은 명령으로 Nanosheets에 Peptoid 폴리머 및 자기 조립의 고체 상 합성 Submonomer

Polyamine 기반 펩타이드 Amphiphiles (PPAs) 및 관련된 생체 자기 조립의 합성에 대 한 손쉬운 프로토콜

합성 및 특성 1, 2-Dithiolane의 수정 자가 조립 펩 티 드

정보 베어링 펩토이드의 합성과 시퀀스 지향 동적 공유자 자체 조립

물/공기 인터페이스에서 소수성 유기 분자와 함께 도핑 하이브리드 지질 막의 자체 조립

기계적으로 안정적인 자체 조립 펩타이드 하이드로겔의 제조

기계적으로 안정적인 자체 조립 펩타이드 하이드로겔의 제조

기계적으로 안정적인 자체 조립 펩타이드 하이드로겔의 제조

올레산의 Tripeptide 안정 Nanoemulsion