Our study was conducted with the permission of United States Sugar Corporation. We want to thank R. Raid, S. Raid and T. Lang for their assistant. We also M. Stanback and three anonymous reviewers for suggestions that improved this manuscript.

떼 트랩 상자 1. 건설 참고 : 1.1 및 1.2 단계로 떼 트랩 건설을위한 두 개의 대체 프로토콜이있다가 포함되어 있습니다. 트랩 상자를 구성 할 수있는 몇 가지 추가 가지 방법이 있습니다. 우리가 실험을 테스트 한 그들이 성공했기 때문에 다음과 같은 두 가지 방법이 여기에 표시됩니다. 두 프로토콜의 2 cm 두께의 비 압력 처리 된 합판 1.3 cm를 사용합니다. <ol><li> 떼 트랩 프로토콜 옵션 1의 건축 : 트랩 상자 만들기 <ol><li> 합판 30 cm의의 X 30 cm의 여섯 조각을 잘라. </li><li> 못이나 나사와 함께 상자의 네면을 연결합니다. </li><li> 못이나 나사에 의해 바닥 부분을 연결합니다. </li><li> 나사 또는 스테이플 상단 부분을 연결합니다. <ol><li> 상단을 확보하기 위해 손톱을 사용하지 마십시오. 정상은 꿀벌을 얻고있는 상자를 청소 제거해야합니다. </li></ol></li><li> 2.5 cm 아래쪽 가장자리에서 트랩 박스의 얼굴의 중앙에 2.5 cm의 구멍을 드릴. </li><li> ,의 프라이머를 적용ealant 또는 기상에서 목재를 보호하는 트랩 상자의 외부에 페인트. <ol><li> 트랩 상자의 내부에 어떤 페인트 또는 밀봉 제를 적용하지 마십시오. 이것은 방수제 또는 꿀벌에 독성이 될 수있다. </li></ol></li></ol></li><li> 사용 표준 깊은 하이브 몸의 2 떼 트랩 박스 프로토콜 옵션의 건설 <ol><li> 로컬 꿀벌 공급 상점에서 표준 10 프레임 깊은 하이브 몸을 얻습니다. </li><li> 폭 41.3 cm 각 측정 50.8 cm 긴 합판에서 상단과 하단을 잘라. </li><li> 못이나 나사에 의해 바닥 부분을 연결합니다. </li><li> 나사 또는 스테이플 상단 부분을 연결합니다. <ol><li> 상단을 확보하기 위해 손톱을 사용하지 마십시오. 정상은 꿀벌을 얻고있는 상자를 청소 제거해야합니다. </li></ol></li><li> 2.5 cm 하단 가장자리로부터 트랩 박스의 일측에 중간에 2.5 cm의 구멍을 뚫는다. </li><li> 날씨로부터 나무를 보호하기 위해 트랩 상자의 외부에 프라이머, 밀봉 제, 또는 페인트를 적용합니다. <ol><li> 받는 어떤 페인트 또는 밀봉 제를 적용하지 마십시오트랩 상자의 내부. 이것은 방수제 또는 꿀벌에 독성이 될 수있다. </li></ol></li></ol></li></ol> 페로몬 미끼 2. 준비 <ol><li> 2 : 1 비율 시트 랄와 라니의 혼합물을 준비합니다. </li><li> 스냅 최고 1.5 ml의 폴리 프로필렌 microcentrifugation 튜브에이 혼합물 1 ㎖를 놓습니다. </li><li> 빛으로부터 그들을 보호하기 위해 알루미늄 호일에 미끼를 감싸. 참고 : 원심 분리 튜브의 캡은 푸시 핀 천공이 장착 떼 트랩에 배치 될 때. 주 : 미끼 (A)에 RT에서 어두운 곳에 저장 이상 동안 저장 될 수 -10 ° C에 냉동 장치. </li></ol> 떼 트랩 상자 3. 설치 참고 : 단계 3.1 및 3.2에 제시 떼 트랩 상자의 설치를위한 두 개의 다른 프로토콜이 있습니다. <ol><li> 포스트에 설치 : 스웜 트랩 박스 프로토콜 옵션 1의 설치 <ol><li> 지상에 10cm 압력 처리 된 나무 울타리 게시물에 의해 10cm를 놓고 10m에새 둥지 상자가있는 곳에서 15m. </li><li> 20cm 20 cm를 측정 1.3 cm 두께의 압력 처리 된 나무에 매달려 보드를 구축합니다. </li><li> 상자의 상단 위 10cm로, 트랩 상자의 일 측면의 중간에 매달려 기판 정렬. 보드의 양쪽에 두 개 이상의 못이나 나사를 사용하여 상자에 보드를 고정합니다. </li><li> 트랩 상자가 꿀벌에 의해 식민지 때 안전하고 제거가 용이 한 높이 (1.5 m m 3)에서 게시물에 트랩 상자를 놓습니다. 매달려 보드를 부착하여 포스트에있는 상자를 조입니다. 약 5cm 매달려 보드의 맨 아래에 나사를 놓고 자리에 나사. <ol><li> 그들은 제거하기 어려운 있기 때문에 손톱을 사용하지 마십시오. </li></ol></li></ol></li><li> 나무에 설치 : 스웜 트랩 박스 프로토콜 옵션 2의 설치 <ol><li> 상자의 각면의 상단 뒤쪽 모서리에 5mm의 구멍을 드릴. </li><li> 관통 구멍에 와이어 스레드. 참고 :이 프로토콜을 사용하는 경우가 EASI 될 것입니다ER 박스의 상단을 고정하기에 앞서 구멍을 통해 배선을 넣어. </li><li> 새 둥지 상자의 위치에서 약 10 m 15 m 거리에 나무를 선택합니다. <ol><li> 사람이 조류 상자의 상태를 확인할 때, 꿀벌에 의해 식민지 트랩 상자 방어가 될 꿀벌의 원인이 방해 될 수 있기 때문에 새 박스와 같은 나무에서 트랩 상자를 올려 놓지 마십시오. </li></ol></li><li> 나무 주위 1.5 m지면에서 m 3에 와이어를 고정합니다. 주 : 나무를 보호하기 위해, 형성층 보호기 와이어 주위에 사용할 수 있습니다. <ol><li> 이 전복되지 않도록 확인 상자가 수준과 안전합니다. 상자는 가능한 경우 추가 안정성을위한 나무 가지에 휴식 할 수 있습니다. </li></ol></li></ol></li></ol> 페로몬 미끼 4. 추가 <ol><li> 섹션 2에서 이전에 준비 유혹을 가지고 푸시 핀 튜브의 상단에 구멍. </li><li> 이달 후 입구 근처 바닥에 트랩 상자 안에 미끼를 배치박스를 설치하는 동안 그것을 보장하기 위해 allation은 떨어지지 않습니다. </li></ol> 퍼메트린에 새 둥지 상자 5. 치료 <ol><li> 유일한 조류 가금류에 사용하기 위해 표시 또는 갇힌 된 퍼메트린 제품을 선택합니다. </li><li> 혼합 응용 프로그램에 대한 라벨의 지시에 따라 주의 : 라벨의 권고에 개인 보호 지침을 따르십시오. </li><li> 상기 액체는 3.7 L 핸드 펌프 분무기를 사용하여 박스의 측면을 실행하는 시점까지 완전히 새집의 내측 스프레이. 참고 : 둥지 상자는 전 또는 설치 후 처리 될 수있다. </li></ol> 꿀 꿀벌에 의해 점유 트랩 상자 6. 제거 <ol><li> 작은 수건 입구 구멍을 연결합니다. 주의 : 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 보호 복을 착용하십시오. <ol><li> 무리가 사망 할 경우, 너무 빨리 발견과 같이하십시오. 무리가 이용 될 경우, 유 (꿀벌이 완전히 제거하기 전에 트랩 상자에 정착 할 수 있도록sually 약 2 주). 가능하면 (모든 꿀벌 내부에있는 경우), 밤에 점령 트랩 상자를 제거합니다. 트랩 입구는 밤에 연결할 수있는 다음 상자는 일광에 다음 아침을 제거. 참고 : 밤에 꿀벌 주위에 작업 할 때 빨간색 필터링 된 빛을 사용합니다. </li></ol></li><li> 포스트에서 상자를 풀고 또는 나무로 상자를 들고 와이어를 잘라. </li><li> (거리에 최소 4 킬로미터) 새로운 위치에있는 상자를 이동하고 입구 구멍으로부터 수건을 잡아 당깁니다. </li></ol> 트랩 상자에서 꿀벌 식민지 7. 파괴 참고 : 아프리칸 꿀벌을 유지하기 위해 불법 지역에서는 식민지의 파괴는 보증 할 수있다. 그렇다면,이 프로토콜은 여기에 표시됩니다. <ol><li> 식민지를 Solarizing <ol><li> 작은 수건 입구 구멍을 연결합니다. 주의 : 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 보호 복을 착용하십시오. </li><li> 포스트에서 상자를 풀고 또는 나무로 상자를 들고 와이어를 잘라. </li><li> Enclo그 자체로는 비닐 봉투에 완전히 트랩 상자를 밀봉하고 며칠 동안 모든 일에서 떠나 주의 : 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 보호 복을 착용하십시오. </li><li> 죽은 꿀벌과 빗를 제거하여 상자를 청소합니다. </li></ol></li><li> 살충제 스프레이의 사용 <ol><li> 트랩 상자 안에 스프레이 꿀벌을 죽일 사용을위한 표시 살충제 스프레이를 사용합니다. 주의 : 살충제에 라벨 지침에 따라 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 개인 보호 장비를 사용합니다. </li><li> 입구를 연결하고 24 시간 동안 상자를 둡니다. </li><li> 죽은 꿀벌과 빗를 제거하여 상자를 청소합니다. 주 : 살충제 잔류를 제거하는 트랩 박스가 비눗물 내부를 청소 재사용. 잘 헹구고 다시 설치하기 전에 완전히 건조 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 살충제 발포체 사용 <ol><li> 세제 기반 거품 점유 트랩의 전체 공동을 입력합니다. (주의 : insec에 라벨 지침을 따르ticide 및 적절한 개인 보호 장비를 사용하고) 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 보호 복을 착용하십시오. 참고 : 거품이 상업 해충 제어 거품 발생기 또는 압축 공기 소화기으로 적용 할 수 있습니다. 참고 : 소화기를 사용하는 경우 : 장소를 물 3.8 L를 9.5 L 소화기에, 소화기를 밀봉 에이전트 (또는 식기 세척 세제)를 발포 190 mL를 넣어 / 평방 100-125 파운드에 압력을. 인치 (PSI). 사용 격렬하게 교반하고, 트랩이 넘쳐 때까지 다음 폼을 적용 직전. 참고 : 폼은 spiracles를 입력하고기도를 차단하여 60 초 내에 꿀벌을 죽인다. </li><li> 입구를 연결하고 24 시간 동안 상자를 둡니다. </li><li> 죽은 꿀벌과 빗를 제거하여 상자를 청소합니다. 주 : 살충제 잔류를 제거하는 트랩 박스가 비눗물 내부를 청소 재사용. 잘 헹구고 다시 설치하기 전에 완전히 건조 할 수 있습니다. &lt;/ 리&gt; </ol></li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

매우 성공적인 침입 곤충 (17), AHB는 범위에 걸쳐 공동-중첩 조류의 주요 경쟁자를 구성한다. 여기에 제시된 프로토콜은 AHB에 의해 새 둥지 상자의 식민지 속도를 줄일 수 있도록 설계되어있다. 이 디자인의 주요 구성 요소는 1) 방수제 및 조류 안전한 살충제, 퍼 메스 린의 사용을 포함한다; 2) 꿀벌에 대한 대체 중첩 사이트의 제공; 3) 트랩 상자 내부의 유인 페로몬의 사용. 새 둥지 사이트 <...

1957 1 상 파울로, 브라질에 24 개 이상의 아프리카 꿀벌 여왕의 실수로 소개 된 이후,이 곤충은 (덜 잘 적응 유럽 꿀벌을 빼앗기 및 교체, 중남미에 걸쳐 최대 미국 남부로 확산 야만적 인 인구 EHB). 이러한 하이브리드 아프리칸 꿀벌 (AHB)는 인간과 야생 동물 모두 충돌에 넣어 특징을 가지고있다. 그들은 매우 방어적인 행동을 나타내는 매우 빠른 재생, 그들은 가정 1, 2를 만들 위치에 대한 덜 선택적입니다. 둥지 상자가 긴 공진기 스팅 조류 3,4-으로 사육을 향상 조류 학자가 사용되었지만, 이들의 사용은 열대 5,6- 위협에 처한 앵무새 사육 향상에 특히 효과적인 것으로 밝혀졌다. 불행하게도, 아프리칸 꿀벌들은이 같은 둥지 상자를 선택 - 때로는 탑승자 사망에스. 그들은 둥지 연구를 수행 할 때 또한 이러한 AHB는 생물 학자에 상당한 위협. AHB가 설립되어 남미 지역에서 여러 앵무새 보존 프로젝트는 AHB 7-10에 의해 점령 자신의 인공 둥지 상자를 보았다. 꿀벌 둥지 상자에 대한 경쟁은 널리 퍼져 앵무새에 국한되지 않습니다. 새와 올드 월드에서 모두 다른 많은 조류 종은 11 ~ 15을 영향을받습니다. 이러한 침략 AHB의 위협을 완화하기위한 노력없이, 앵무새 보전의 최근 성공이 손실 될 수 있습니다. 꿀벌에서 경쟁을 관리하는 현재의 관행은 즉시 시즌 8, 둥지 상자 (15)의 외측에 화학 물질의 응용 프로그램을 사육 한 후, 수동으로 떼를 제거, 7 퍼메트린 둥지 입구를 폐쇄의 반복, 고용량의 사용을 포함한다. 노동 참여하고 생물 학자에 위험이 적은 최적의보다 이러한 전략을 렌더링합니다. 방지시의 개발n 개의 프로토콜을 보증합니다. 꿀 꿀벌 식민지 이전 여왕이 일벌 (16)의 최대 사분의 삼과 식민지 잎들이 득시글 거리는,로 알려진 과정을 통해 곱합니다. 아프리칸 꿀벌의 높은 생식 률은 그들이 더 자주 17 (일년에 한 번 또는 두 번 떼) EHB 이상 (연간 4 ~ 8 번) 떼 할 수 있습니다. 또한, AHB는 일년 내내보다는 EHB 같은 특정 시즌 떼 수 있습니다. 따라서, AHB 빠르게 소정 영역에 적합 중첩 부위의 대부분을 차지하고있다. 꿀 꿀벌 집 사냥 동작은 둥지 사이트의 자신의 선택에 영향을하는데 이용 될 수있다. 떼에서 꿀벌의 작은 부분을 찾아 새로운 가능성 둥지 사이트를 검사 날아. 몇 가지 잠재적 인 둥지 사이트를 동시에 대한 정찰하고 있습니다. 이 스카우트 꿀벌 떼로 돌아가서 사이트의 위치를​​ 나타 내기 위해 춤을 수행합니다. SCO의 강한 춤이 사이트이며, 빠른 번호유타 꿀벌은 해당 사이트 (18)에 축적. 따라서, 꿀벌 평범한 또는 가난한 사이트에 비해, 더 나은 품질의 사이트에 대한 강한 춤. 정족수 임계 값에 도달하면, 떼를 벗고 새로운 선택 홈 사이트 (18)로 운항하는 항공사. 살충제 퍼 메스 린의 하위 치명적인 연락처 복용 방향 및 활동 수준 (19, 20)을 줄이기 위해 스카우트 꿀벌의 능력을 방해. 처음 둥지 상자 안에 퍼 메스 린의 응용 프로그램은 화학 저하로 꿀벌 (21), 및 초과 근무를 스카우트 방수제되어야 박스의 자신의 평가 기간 동안 퍼 메스 린에 노출 정찰 꿀벌, 양을 감소, 강한 채용 춤을 수행 덜 수 렌더링해야 의 정찰 벌은 사이트에 채용. 더 적당한 (아래에있는 이상적인 캐비티 용적 작은 입구 구멍 및 페로몬 유인) 다른 중첩 부위는 꿀벌 트랩 박스의 형태로 제공된다. 이 우수한 트랩 사이트는 빠른 정족수에 도달한다살충제 처리 된 조류 상자보다 조류 상자 위에 트랩 상자를 선택하는 무리를 선도. 예를 들어, 우리는 사우스 플로리다 사탕 수수 필드에 AHB에 의해 반 올빼미 인공 둥지 상자의 정착을 줄이기 위해 실험을 설명합니다. 우리의 목표는 페로몬 미끼를 떼 트랩을 향해 &quot;풀&quot;을 살충제로 처리 올빼미 둥지 상자에서 멀리 꿀벌을 &quot;밀어&quot;것이다 푸시 풀 방법을 사용의 효과를 테스트하는 것이 었습니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="652">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Citral (ACROS Organics)</td>
			<td style="width:117px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">AC11044-1000</td>
			<td style="width:200px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Geraniol (ACROS Organics)</td>
			<td style="width:117px;">Fisher Scientific</td>
			<td>AC41090-1000</td>
			<td style="width:200px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PermaCap CS</td>
			<td style="width:117px;">BASF</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>controlled release permethrin</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a push-pull protocol to reduce colonization of bird nest boxes by honey bees

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. These bees select cavities that are suitable nest sites for birds, resulting in competition. The difficulty of removing bees and their defensive behavior makes a prevention protocol necessary. Here, we describe a push-pull integrated pest management protocol to deter bees from inhabiting bird boxes by applying a bird safe insecticide, permethrin, to repel bees from nest boxes, while simultaneously attracting them to pheromone-baited swarm traps. Shown here is an example experiment using Barn Owl nest boxes. This protocol successfully reduced colonization of Barn Owl nest boxes by Africanized honey bees. This protocol is flexible, allowing adjustments to accommodate a wide range of bird species and habitats. This protocol could benefit conservation efforts where AHB are located.

브라질에서 실시한 이전의 작은 파일럿 푸시 - 풀 연구는 떼 트랩이 효과적 보여 앵무새 둥지 상자 (22) 꿀벌 직업을 감소시켰다. 푸시 풀 방법은 AHB에 의해 새 둥지 상자의 식민지를 줄이기 위해 더 큰 규모에서 효과적 일 수 있는지 확인하기 위해, 우리는 남부 플로리다, 미국에서 사탕 수수 분야에서 현장 연구를 실시했다. 육십 반 올빼미 둥지 상자를 설치하고, ?...

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A Push-pull Protocol to Reduce Colonization of Bird Nest Boxes by Honey Bees

침략 아프리칸 꿀벌에 의해 새 둥지 상자의 식민지를 방지하는 것은 둥지 현장 제한 조류의 보존 노력 중요하다. 우리는이 &quot;푸시&quot;꿀벌 거리에 둥지 상자에서 방수제 살충제, 퍼메트린과 통합 해충 관리 접근 방식을 제공하고, 페로몬 미끼를 떼 트랩을 향해을 &quot;풀&quot;.

푸시 풀 프로토콜 꿀 꿀벌에 의해 식민 새의 둥지 상자를 감소시키는

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. ...

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Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Environment

8.6K 조회수.  University of Florida.  침략 아프리칸 꿀벌에 의해 새 둥지 상자의 식민지를 방지하는 것은 둥지 현장 제한 조류의 보존 노력 중요하다. 우리는이 "푸시"꿀벌 거리에 둥지 상자에서 방수제 살충제, 퍼메트린과 통합 해충 관리 접근 방식을 제공하고, 페로몬 미끼를 떼 트랩을 향해을 "풀". 

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Optimized Negative Staining: a High-throughput Protocol for Examining Small and Asymmetric Protein Structure by Electron Microscopy

Structural determination of proteins is rather challenging for proteins with molecular masses between 40 - 200 kDa. Considering that more than half of natural proteins have a molecular mass between 40 - 200 kDa1,2, a robust and high-throughput method with a nanometer resolution capability is needed. Negative staining (NS) electron microscopy (EM) is an easy, rapid, and qualitative approach which has frequently been used in research laboratories to examine protein structure and protein-protein interactions. Unfortunately, conventional NS protocols often generate structural artifacts on proteins, especially with lipoproteins that usually form presenting rouleaux artifacts. By using images of lipoproteins from cryo-electron microscopy (cryo-EM) as a standard, the key parameters in NS specimen preparation conditions were recently screened and reported as the optimized NS protocol (OpNS), a modified conventional NS protocol 3 . Artifacts like rouleaux can be greatly limited by OpNS, additionally providing high contrast along with reasonably high&#8208;resolution (near 1 nm) images of small and asymmetric proteins. These high-resolution and high contrast images are even favorable for an individual protein (a single object, no average) 3D reconstruction, such as a 160 kDa antibody, through the method of electron tomography4,5. Moreover, OpNS can be a high&#8208;throughput tool to examine hundreds of samples of small proteins. For example, the previously published mechanism of 53 kDa cholesteryl ester transfer protein (CETP) involved the screening and imaging of hundreds of samples 6. Considering cryo-EM rarely successfully images proteins less than 200 kDa has yet to publish any study involving screening over one hundred sample conditions, it is fair to call OpNS a high-throughput method for studying small proteins. Hopefully the OpNS protocol presented here can be a useful tool to push the boundaries of EM and accelerate EM studies into small protein structure, dynamics and mechanisms.

More than half of proteins are small proteins (molecular mass &#60;200 kDa) that are challenging for both electron microscope imaging and three-dimensional reconstructions. Optimized negative staining is a robust and high-throughput protocol to obtain high contrast and relatively high resolution (~1 nm) images of small asymmetric proteins or complexes under different physiological conditions.

최적화 된 음의 염색 : 전자 현미경으로 작은 비대칭 단백질 구조 검사를위한 높은 처리량 프로토콜

Structural determination of proteins is rather challenging for proteins with molecular masses between 40 - 200 kDa. Considering that more than half of ...

연구

환경과학

Experimental Protocol for Manipulating Plant-induced Soil Heterogeneity

Coexistence theory has often treated environmental heterogeneity as being independent of the community composition; however biotic feedbacks such as plant-soil feedbacks (PSF) have large effects on plant performance, and create environmental heterogeneity that depends on the community composition. Understanding the importance of PSF for plant community assembly necessitates understanding of the role of heterogeneity in PSF, in addition to mean PSF effects. Here, we describe a protocol for manipulating plant-induced soil heterogeneity. Two example experiments are presented: (1) a field experiment with a 6-patch grid of soils to measure plant population responses and (2) a greenhouse experiment with 2-patch soils to measure individual plant responses. Soils can be collected from the zone of root influence (soils from the rhizosphere and directly adjacent to the rhizosphere) of plants in the field from conspecific and heterospecific plant species. Replicate collections are used to avoid pseudoreplicating soil samples. These soils are then placed into separate patches for heterogeneous treatments or mixed for a homogenized treatment. Care should be taken to ensure that heterogeneous and homogenized treatments experience the same degree of soil disturbance. Plants can then be placed in these soil treatments to determine the effect of plant-induced soil heterogeneity on plant performance. We demonstrate that plant-induced heterogeneity results in different outcomes than predicted by traditional coexistence models, perhaps because of the dynamic nature of these feedbacks. Theory that incorporates environmental heterogeneity influenced by the assembling community and additional empirical work is needed to determine when heterogeneity intrinsic to the assembling community will result in different assembly outcomes compared with heterogeneity extrinsic to the community composition.

Understanding the role of environmental heterogeneity in species coexistence has typically focused on types of heterogeneity that are extrinsic to the community&#8217;s species composition. We provide novel detailed methods for creating soil heterogeneity treatments using soils subject to plant-soil feedback conditioning, or heterogeneity intrinsic to the community composition.

조작 식물에 의한 토양의 이질성에 대한 실험 프로토콜

Coexistence theory has often treated environmental heterogeneity as being independent of the community composition; however biotic feedbacks such as ...

A Protocol for Conducting Rainfall Simulation to Study Soil Runoff

Rainfall is a driving force for the transport of environmental contaminants from agricultural soils to surficial water bodies via surface runoff. The objective of this study was to characterize the effects of antecedent soil moisture content on the fate and transport of surface applied commercial urea, a common form of nitrogen (N) fertilizer, following a rainfall event that occurs within 24&#160;hr&#160;after fertilizer application. Although urea is assumed to be readily hydrolyzed to ammonium and therefore not often available for transport, recent studies suggest that urea can be transported from agricultural soils to coastal waters where it is implicated in harmful algal blooms. A rainfall simulator was used to apply a consistent rate of uniform rainfall across packed soil boxes that had been prewetted to different soil moisture contents. By controlling rainfall and soil physical characteristics, the effects of antecedent soil moisture on urea loss were isolated. Wetter soils exhibited shorter time from rainfall initiation to runoff initiation, greater total volume of runoff, higher urea concentrations in runoff, and greater mass loadings of urea in runoff. These results also demonstrate the importance of controlling for antecedent soil moisture content in studies designed to isolate other variables, such as soil physical or chemical characteristics, slope, soil cover, management, or rainfall characteristics. Because rainfall simulators are designed to deliver raindrops of similar size and velocity as natural rainfall, studies conducted under a standardized protocol can yield valuable data that, in turn, can be used to develop models for predicting the fate and transport of pollutants in runoff.

A rainfall simulator was used to apply a consistent rate of uniform rainfall to packed soil boxes in a study of the fate and transport of urea, a nonpoint source environmental contaminant. Under uniform soil and rainfall conditions, antecedent soil moisture content exerted strong control over urea loss in surface runoff.

토양 유출을 연구하기 위해 강우 시뮬레이션을 실시하기위한 프로토콜

Rainfall is a driving force for the transport of environmental contaminants from agricultural soils to surficial water bodies via surface runoff. The ...

A Protocol for Collecting and Constructing Soil Core Lysimeters

Leaching of nutrients from land applied fertilizers and manure used in agriculture can lead to accelerated eutrophication of surface water. Because the landscape has complex and varied soil morphology, an accompanying disparity in flow paths for leachate through the soil macropore and matrix structure is present. The rate of flow through these paths is further affected by antecedent soil moisture. Lysimeters are used to quantify flow rate, volume of water and concentration of nutrients leaching downward through soils. While many lysimeter designs exist, accurately determining the volume of water and mass balance of nutrients is best accomplished with bounded lysimeters that leave the natural soil structure intact. 
Here we present a detailed method for the extraction and construction of soil core lysimeters equipped with soil moisture sensors at 5 cm and 25 cm depths. Lysimeters from four different Coastal Plain soils (Bojac, Evesboro, Quindocqua and Sassafras) were collected on the Delmarva Peninsula and moved to an indoor climate controlled facility. Soils were irrigated once weekly with the equivalent of 2 cm of rainfall to draw down soil nitrate-N concentrations. At the end of the draw down period, poultry litter was applied (162 kg TN ha-1) and leaching was resumed for an additional five weeks. Total recovery of applied irrigation water varied from 71% to 85%. Nitrate-N concentration varied over the course of the study from an average of 27.1 mg L-1 before litter application to 40.3 mg L-1 following litter application. While greatest flux of nutrients was measured in soils dominated by coarse sand (Sassafras) the greatest immediate flux occurred from the finest textured soil with pronounced macropore development (Quindocqua).

A detailed method for extraction and assembly of intact soil core lysimeters and their use for study of leachate and associated loss of nutrients from surface applied poultry litter is demonstrated.

토양 코어 Lysimeters를 수집 및 구축을위한 프로토콜

Leaching of nutrients from land applied fertilizers and manure used in agriculture can lead to accelerated eutrophication of surface water. Because the ...

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Herein we present a method to feed pesticide contaminated food to both an individual honey bee and a beehive colony. The procedure evaluates the pesticide effect on individual honey bees by in vivo feeding of basic larval diet and also on the natural condition of beehive colony.

식민지 수준에 개인에서 꿀 꿀벌 개발에 대한 환경 화학 물질의 효과를 평가

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey bee colony numbers have been declining in the United States and many European countries since 1947. A number of factors play a role in this decline, including the unintentional exposure of honey bees to pesticides. The development of new methods and regulations are warranted to reduce pesticide exposures to these pollinators. One approach is the use of repellent chemistries that deter honey bees from a recently pesticide-treated crop. Here, we describe a protocol to discern the deterrence of honey bees exposed to select repellent chemistries. Honey bee foragers are collected and starved overnight in an incubator 15 h prior to testing. Individual honey bees are placed into Petri dishes that have either a sugar-agarose cube (control treatment) or sugar-agarose-compound cube (repellent treatment) placed into the middle of the dish. The Petri dish serves as the arena that is placed under a camera in a light box to record the honey bee locomotor activities using video tracking software. A total of 8 control and 8 repellent treatments were analyzed for a 10 min period with each treatment was duplicated with new honey bees. Here, we demonstrate that honey bees are deterred from the sugar-agarose cubes with a compound treatment whereas honey bees are attracted to the sugar-agarose cubes without an added compound.

The loss of honey bee colonies presents a challenge to crop pollination services. Current pollinator protection practices warrant an alternative approach to minimize the contact of honey bees to harmful pesticides using repellent chemistries. Here, we provide detailed methods for a visual tracking protocol to screen deterrents for bees.

꿀벌을위한 억제 성 화학 물질을 차단하는 비디오 추적 프로토콜

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

Experimental Protocol for Detecting Mitochondrial Function in Hepatocytes Exposed to Organochlorine Pesticides

This paper presents detailed methods on detecting hepatic mitochondrial function for a better understanding the cause of metabolic disorders caused by environmental organochlorine pesticides (OCPs) in hepatocytes. HepG2 cells were exposed to &#946;-hexachlorocyclohexane (&#946;-HCH) for 24 h at an equivalent dose of internal exposure in general population. Ultrastructure in hepatocytes was examined by transmission electron microscopy (TEM) to show the damage of mitochondria. Mitochondrial function was further evaluated by mitochondrial fluorescence intensity, adenosine 5'-triphosphate (ATP) levels, oxygen consumption rate (OCR) and mitochondrial membrane potential (MMP) in HepG2 cells incubated with &#946;-HCH. The mitochondria fluorescence intensity after stained by mitochondrial green fluorescent probe was observed with a fluorescence microscopy. The luciferin-luciferase reaction was used to determine ATP levels. The MMP was detected by the cationic dye JC-1 and analyzed under flow cytometry. OCR was measured with an extracellular flux analyzer. In summary, these protocols were used in detecting mitochondrial function in hepatocytes with to investigate mitochondria damages.

Understanding the influence of environmental organochlorine pesticides (OCPs) on mitochondrial function in hepatocytes is important in exploring the mechanism of OCPs causing metabolic disorders. This paper presents detailed methods on detecting hepatic mitochondrial function.

유기체 살충제에 노출된 간세포에서 미토콘드리아 기능을 검출하기 위한 실험 프로토콜

This paper presents detailed methods on detecting hepatic mitochondrial function for a better understanding the cause of metabolic disorders caused by ...

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide regulation studies. The risk of exposure to fungicide residues is likely to be especially high if the spray occurs on, or near host plants while the bees are collecting pollen to provision their nests. For species of Osmia that consume pollen from a select group of plants (oligolecty), the inability to use pollen from non-host plants can increase their risk factor for fungicide-related toxicity. This manuscript describes protocols used to successfully rear oligolectic mason bees, Osmia ribifloris sensu lato, from egg to prepupal stage within cell culture plates under standardized laboratory conditions. The in vitro-reared bees are subsequently used to investigate the effects of fungicide exposure and pollen source on bee fitness. Based on a 2 &#215; 2 fully crossed factorial design, the experiment examines the main and interactive effects of fungicide exposure and pollen source on larval fitness, quantified by prepupal biomass, larval developmental time, and survivorship. A major advantage of this technique is that using in vitro-reared bees reduces natural background variability and allows the simultaneous manipulation of multiple experimental parameters. The described protocol presents a versatile tool for hypotheses testing involving the suite of factors affecting bee health. For conservation efforts to be met with significant, lasting success, such insights into the complex interplay of physiological and environmental factors driving bee declines will prove to be critical.

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Fungicide sprays on flowering plants may expose solitary bees to high concentrations of pollen-borne fungicide residues. Using laboratory-based experiments involving in vitro-reared bee larvae, this study investigates the interactive effects of consuming fungicide-treated pollen derived from host and non-host plants.

생체 외에서 고독한 꿀벌의 양육: 애벌레 위험 요소를 평가 하기 위한 도구

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide ...

Experimental Protocol for Examining Behavioral Response Profiles in Larval Fish: Application to the Neuro-stimulant Caffeine

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and toxicological studies. Using automated digital tracking platforms, recent efforts in neuropharmacology are leveraging larval fish locomotor behaviors to identify potential therapeutic targets for novel small molecules. Similar to these efforts, research in the environmental sciences and comparative pharmacology and toxicology is examining various behaviors of fish models as diagnostic tools in tiered evaluation of contaminants and real-time monitoring of surface waters for contaminant threats. Whereas the zebrafish is a popular larval fish model in the biomedical sciences, the fathead minnow is a common larval fish model in ecotoxicology. Unfortunately, fathead minnow larvae have received considerably less attention in behavioral studies. Here, we develop and demonstrate a behavioral profile protocol using caffeine as a model neurostimulant. Though photomotor responses of fathead minnows were occasionally affected by caffeine, zebrafish&#160;were markedly more sensitive for photomotor and locomotor endpoints, which responded at environmentally relevant levels. Future studies are needed to understand comparative behavioral sensitivity differences among fish with age and time of day, and to determine whether similar behavioral effects would occur in nature and be indicative of adverse outcomes at the individual or population levels of biological organization.

Here, we present a protocol to examine larval zebrafish and fathead minnow locomotor activities and photomotor responses (PMR) using an automated tracking software. When incorporated in common toxicology bioassays, analyses of these behaviors provide a diagnostic tool to examine chemical bioactivity. This protocol is described using caffeine, a model neurostimulant.

애벌레에서 행동 응답 프로필을 조사 하기 위한 실험 프로토콜: 신경 흥분 제 카페인에 응용

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and ...

Measuring Hypopharyngeal Gland Acinus Size in Honey Bee (Apis mellifera) Workers

The nurse hypopharyngeal glands produce the protein fraction of the worker and royal jelly that is fed to developing larvae and queens. These paired glands that are located in the head of the bee are highly sensitive to the quantity and quality of pollen and pollen substitutes that the nurse bee consumes. The glands get smaller when nurses are fed deficient diets and are large when they are fed complete diets. Because nurse hypopharyngeal gland size is a robust indicator of nurse nutrition, it is essential that those studying honey bee nutrition know how to measure these glands. Here, we provide detailed methods for dissecting, staining, imaging, and measuring nurse bee hypopharyngeal glands. We present comparisons of unstained and stained tissue and data that were used to study the impact of pollen on gland size. This method has been used to test how diet impacts hypopharyngeal gland size but has further use for understanding the role of these glands in hive health.

Measuring Hypopharyngeal Gland Acinus Size in Honey Bee Apis mellifera Workers

Hypopharyngeal gland acinus size is a robust measure of nurse honey bee nutrition. Here, we provide a detailed protocol for dissecting, staining, imaging, and measuring nurse bee hypopharyngeal gland acini.

꿀 꿀벌 (Apis mellifera) 노동자의 Hypopharyngeal 동맥 Acinus 크기 측정

The nurse hypopharyngeal glands produce the protein fraction of the worker and royal jelly that is fed to developing larvae and queens. These paired ...