This work was supported by NIH-NIDCR IRO1DE019355 (MJ Yost, PI), and NSF-EPSCoR (EPS-0903795).

1. 콜라겐 배치에서 고체의 비율을 결정 <ol><li> 이전에 게시 된 절차 (13) 다음 콜라겐을 추출합니다. 콜라겐 20ml의 최소 해동. 형성된 하이드로 겔에서 콜라겐 농도를 조작하기 위해 배치 콜라겐 고체의 초기 비율을 결정한다. <ol><li> 알루미늄 호일 (약 6 × 6cm)의 세 가지 컷 25 ㎖ 비이커의 바닥을 사용하여 팬과 같은 각을 형성. 각 팬의 무게를 기록한다. </li><li> 각 팬에 콜라겐을 소량 첨가하고 알루미늄 팬 콜라겐의 총 중량을 기록한다. 각 알루미늄 팬에 콜라겐의 0.8 g - 0.5를 추가합니다. 주 :이 단계 후에,이 세 알루미늄 포일 팬은 각각 하나가 콜라겐의 소량을 가져야한다. 각 (총 3) 빈 알루미늄 팬의 무게와 콜라겐을 첨가 한 후 팬의 무게를 기록해야합니다. </li><li> F를 사용하여 각 팬에서 콜라겐의 중량을 계산공식을 따르게 : 콜라겐 무게 = 팬과 콜라겐 중량 - 팬 중량 </li><li> 24 시간 동안 100 ° C에서 오븐에 콜라겐을 보유하고있는 세 개의 알루미늄 팬을 놓습니다. </li><li> 24 시간 후, 각각 알루미늄 팬의 중량 및 탈수 콜라겐을 기록한다. </li><li> 다음 식을 이용하여 탈수 콜라겐의 중량을 계산한다 : 탈수 콜라겐 무게 = 팬 탈수 콜라겐 중량 - 팬 중량 </li><li> 3 개의 시료는 아래 공식을 사용하여 콜라겐 고형분 농도를 결정하기 위해 고체의 비율을 계산한다 : <img alt="식 (2)" src="/files/ftp_upload/53578/53578eq2.jpg" /></li><li> 3 개의 시료 각각 콜라겐 고형분의 비율을 이용하여 배치의 평균 콜라겐 고체 함량을 계산한다. 참고 : 사용되는 콜라겐 수화 콜라겐 남아있는 것입니다. 탈수 콜라겐 중 어느 것도 사용되지 않습니다. </li><li> 콜라겐 고체 (난의 비율을 결정한 후일괄 nitial 콜라겐 농도)을 남아있는 수화 된 콜라겐을 계속. 3 콜라겐 배치의 pH를 조정하는 보정 pH 미터를 사용한다. <ol><li> 소량 (12) N 염산 (HCL)의 (한 번에 2-5 μL)를 추가합니다. 항상 얼음에 보관하십시오. 콜라겐에 직접 염산 없어 - 튜브의 측면에 의해 산을 추가한다. 산을 첨가 한 후, 콜라겐 산 밀어 주걱을 사용하여 신속하게 혼합 교반한다. </li></ol></li><li> 이 3의 pH에​​ 도달하면, 콜라겐은 4 ℃에서 O / N을 앉아 보자. </li></ol></li></ol> BSA 고무 2. 준비 <ol><li> 아래의 절차에 따라 소 혈청 알부민 (BSA) 솔루션을 준비합니다. <ol><li> 배 인산염 완충 식염수 (PBS)를 준비한다. 0.02 M PBS 용액을 만들기 위해 물 100ml에 두 개의 PBS 정제를 추가합니다. </li><li> 아래 절차를 이용하여 30 %의 BSA 용액을 만들기 위해 2 × PBS로 BSA를 결합. <ol><li> 예를 들어, 2 × PBS 30 ㎖로 30 % BSA을 BSA 12.9 g을 사용한다. 교반 막대와 플라스크에 2 배 PBS (예를 들어, 10 ㎖)의 1/3을 추가합니다. 플라스크에 BSA (예를 들어, 6.45 g의 BSA)의 1/2을 추가하고 주걱을 사용하여 건조 용질 젖은. </li><li> 모든 용질 때까지 PBS 다음 BSA를 추가하는이 과정을 반복하고 용매 플라스크에있다. 모든 용질 젖은 주걱을 사용합니다. 그것은 몇 가지 액체 덩어리의 혼합물과 같이 표시됩니다. 이 약 30 분 동안 앉아 보자. </li><li> 그런 다음, 낮은 사이클에 교반기를 켜고 교반 막대 주위에 덩어리가 없는지 확인합니다. 이 솔루션의 모든 것을 얻기 위해 90 분 소요 또는 4 ℃에서 O / N 감동을 둘 수 있습니다. 용질 모두 용해 된 후, 20 ml의 시린지에 넣고 용액을 0.20 μm의 주사기 필터로 덮인. 필터를 통해 액체를 추방하고 새로운 튜브에 멸균 솔루션을 수집하는 플런저를 누르십시오. 4 ℃에서 보관하십시오. </li></ol></li><li> 3 % 글루 타르 알데히드의 soluti 준비멸균 여과 배 PBS와 25 % 글루 타르 알데히드 용액을 희석하여합니다. 예를 들어, 3 % 글루 타르 알데하이드 용액 10㎖를 들면, 2 내지 25 %의 글루 타르 알데히드 ㎖의 2 × 8 ml의 PBS를 사용한다. 4 ℃에서 보관하십시오. </li></ol></li></ol> 3. 금형 치료 참고 :이 문서에 설명 된 프로토 타입은 사용자 정의 만든 스테인리스 Y 금형 조각을 사용합니다. 금형 유입 각각 4, 3mm, 두 유출 채널이 포함되어 있습니다. 첫째, 깨끗한 금형, 불포화 라드로 스프레이, 그들을 소독. 아래에 설명 된 절차에 따라 금형을 준비한다. <ol><li> 35 kHz의 주파수에서 초음파기를 사용하여 면도 스테인리스 금형. 소니 케이의 금형을 놓고 물과 얼음을 잠수함. 초음파 처리기가 실행되는 동안 항상 감기 금형을 유지합니다. 90 분 2 시간 동안 초음파 처리를 실행합니다. <ol><li> 각 기간 후에, 루어에는 재료는 스테인레스 강 또는 b을 잠글 수 없습니다가 있는지 확인하기 위해 바늘을 사용의 RAS 연결합니다. 금형의 양측의 전체 표면을 청소 비누와 물을 사용합니다. 채널에 장애물이 없는지 확인합니다. </li></ol></li><li> 오토 클레이브 봉지 형, 나사, 루어 락 커넥터를 배치하고 오토 클레이브. </li><li> 시중에서 판매하는 돼지 기름 (혼합 지방산 이형제)와 공기 분무기 반 방식에 부착 병을 채 웁니다. 일반 캡 병 뚜껑을 교체합니다. 오토 클레이브 가방에 배치하고 오토 클레이브. 주 : 라드 나중에 주입 반응 될 재료 (BSA 고무)의 방출을 용이하게하기 위해 사용된다. 이 내부 씰을 손상시킬 수 있습니다 autoclave-에 분무기 병 뚜껑을 올려 놓지 마십시오. </li><li> 45 초 동안이나 전자 레인지에서의 명확하고 액체 때까지 돼지 기름을 따뜻하게. 돼지 기름 병에 공기 분무기 뚜껑을 나사. 분무기와 뚜껑을 연결합니다. 실험실 벤치에서 공기 소스에 분무기를 연결합니다. 공기 밸브를 개방하고,이 표면을 습윤 시작할 때까지 분무기의 노즐을 열고종이 수건. </li><li> 표면이 완전히 피복 될 때까지 금형 표면에 수직 라드 스프레이. 각 조각은 분무 된 후, 배양 접시에 배치하고 밀봉. 2 시간 동안 4 ° C에서 금형을 놓습니다. </li><li> 30 분 동안 UV 광에 노출시킴으로써 표면을 주형 살균 진행. 그들이 반응 주입 할 준비가 될 때까지 4 ℃에서 그들을 다시 놓습니다. </li></ol> BSA 고무 4. 반응 사출 참고 : 다음 단계에서 BSA 고무의 조기 설정을 방지하기 위해 사용할 준비가 될 때까지 모든 자료와 솔루션은 차가운 유지되어야한다. <ol><li> 다음 단계를 수행하여 금형에 BSA 고무를 전달하기위한 디스펜서를 준비합니다. <ol><li> 혼합 성분 모두 멸균 : 중합 효소 연쇄 반응 (PCR) 후드에서 30 분 동안 UV 광에 노출하여 (두 개의 O 링, 주사기 캡 이중 주사기 팁을 혼합하고, 4 일 디스펜서). 참고 : PCR 후드가 t 있기 때문에 사용그 절차는 고정 제를 포함한다. 이러한 화학 물질로 인해 세포 독성에 대한 노출의 위험을 세포 / 조직 배양 후드에서 사용될 수 없다. 자외선이 포함되어 다른 후드가 적합 할 것이다. </li><li> 솔루션 홀더에 끝 캡을 배치합니다. </li><li> BSA의 1 비율 : 4로 혼합 및 주입을 수행 글루 타르 알데히드를. 솔루션의 가장 높은 금액을 제공 할 것입니다 이중 주사기 챔버에 30 % BSA를 추가 (그것은 채우기 위해 약 4 mL를 취하여 것입니다). 인접 실의 범람과 오염을 방지하기 위해 O 링을 배치하기에 충분한 공간을 남겨해야합니다. </li><li> 다른 챔버에 3 % 글루 타르 알데히드 용액을 추가 (그것은 채우기 위해 약 1 mL를 취하여 것입니다). 인접 실의 범람과 오염을 방지하기 위해 O 링을 배치하기에 충분한 공간을 남겨해야합니다. </li><li> 디스펜서에 이중 주사기를 놓습니다. 주사기 캡 상단에 위치하도록 수직으로 어셈블리를 기울입니다. 믹싱 팁 캡을 교체합니다. </li><li> 사우스 캐롤라이나두 함께 스테인리스 금형 조각 REW. </li><li> 오토 클레이브 가방의 내부 어셈블리를 놓습니다. </li><li> 디스펜서의 모든 공기를 제거하려면 수직 위치에 고정 빠르게 핸들을 글루 타르 알데히드와 혼합 BSA의 작은 금액을 해제 한 시간을 짠다. 그런 다음 신속하게 주사기 팁에 스테인리스 Y 금형의 루어 락 커넥터를 연결합니다. </li><li> 왼쪽과 오른쪽에 BSA-글루 타르 알데히드 혼합물을 디스펜서 스테인리스 Y 금형 잡아. 다른 내부 보이드 용액으로 채워 확인 압력솥 백 측면에 배기를 누름으로써 유출 채널의 좌우의 배기를 각각 덮는. 그리고, 가로 금형을 배치 한 후 다시 주입. </li><li> 25mm 페트리 접시에 디스펜서와 장소에서 금형을 분리합니다. </li><li> 고무의 탈수를 방지하기 위해 페트리 접시 주위에 파라 필름을 배치합니다. </li><li> 4 ° C 냉장고 O / N의 금형을 놓습니다. </li></ol></li></ol> 주 : 콜라겐 과정 항상 얼음에 보관해야한다. <ol><li> 콜라겐 고형분의 비율을 사용하여 콜라겐 농도를 수정한다. <ol><li> 찬물로 초기 콜라겐 농도를 조정하여 1.75 %의 콜라겐 10 ㎖를 확인합니다. </li><li> 조정 pH 측정기를 사용하여, 12 N 염산을 사용하여 pH 3를 조정한다. 콜라겐에 직접 염산 않는다 튜브의 측면에 의해 산을 추가한다. 산을 첨가 한 후, 콜라겐에 의해 산을 밀어 주걱을 사용하여 신속하게 혼합 교반한다. </li><li> 별도의 원뿔 튜브에 콜라겐 4g의 무게를. </li><li> 4 ° C와 20 ~ 30 분 동안 9,343 XG에서 공기를 제거하기 위해 콜라겐을 원심 분리기. </li><li> 30 분 동안 세포 배양 후드 살균 및 4 ml의 콜라겐 라미닌의 14 μL를 추가 UV. 이 10 μg의 / μL의 최종 라미닌 농도가 발생합니다. 참고 : 라미닌이들 제공tructural 무결성, 접착 및 다양한 세포 반응을 촉진한다. </li><li> 이전 살균 후드를 사용하여 PCR UV는 20 ~ 30 분에 불을 켭니다. </li><li> 2 시간 동안 에탄올, 20 ML의 주사기에 부착, 루어 잠금 캡을 놓습니다. 그리고, 건조 및 자외선에 배치 할 수 있습니다. </li><li> 감마 1200 cGy의 도달하도록 8.6 분간 콜라겐을 조사. 주 : 시간 ​​세슘 소스의 감쇠에 의존 할 것이다. 동일한 투여 량에 도달하는 시간을 조정한다. </li></ol></li></ol> BSA 고무에 콜라겐을 6.Casting <ol><li> 1 : 1의 비율 (콜라겐 : HEPES : MEM) 콜라겐을 중합하려면 8을 사용합니다. 다음 절차 (단계 5.1.8)에서 산성화 콜라겐의 초기 4g에 기초한다. <ol><li> 물에 0.2 N HEPES 용액을 만들고, 1-5 M 수산화 나트륨 (NaOH) 용액을 소량의 (1-5 μL)을 첨가하여 9 pH를 조정한다. 조정 pH 측정기를 사용하여, 각각을 첨가 한 후, 용액의 pH를 모니터링한다. 4 ° C 또는 케에서 보관얼음에 EP. </li><li> 후드를 소독하기 위해 20 ~ 30 분 동안 조직 문화 후드의 자외선을 켭니다. </li><li> 오토 클레이브 집게, 주걱, 살균 용 메스. </li><li> 조직 문화 후드를 사용하여 0.2 N HEPES (pH가 9) 및 ml의 10 배 MEM 1.5의 1.5 ml의 혼합. 사용하기 전에 5 초 동안 얼음과 소용돌이를 잘 보관해야합니다. 4 ° C에서 보관 또는 얼음에 보관하십시오. </li><li> PCR 후드를 소독하기 위해 30 분 동안 자외선을 켭니다. </li><li> 10 분 동안 -20 ° C에서 12 웰 플레이트와 20 ML의 주사기를 놓고, 또는 준비가 될 때까지 계속합니다. 참고 : 사용할 준비가 될 때까지 차가운 모든 자료를 보관하십시오. 온도의 증가는 조기 콜라겐 fibrillogenesis를 유도한다. </li><li> 70 % 에탄올로 후드에 살균하기에 건조 할 예정 모든 튜브와 웰 플레이트 스프레이. 나중에 사용하기 위해 냉각 얼음에 20 ML의 주사기를 놓습니다. </li><li> PCR 후드, BSA 고무 메스를 사용 해제하는 스테인리스 금형을 열 BSA (R)의 배출 채널 컷ubber 금형. </li><li> PCR 후드에서 HEPES-MEM 용액 1 ㎖를 멸균 콜라겐 튜브를 열고 추가 (확인 그것이 잘 혼합 더 단단한 보증금은 없는지, HEPES-MEM 솔루션을 추출하기 전에). </li><li> 멸균 주걱을 사용하여, 철저하게 콜라겐과 완충 용액을 혼합한다. </li><li> 닫기과 소용돌이 신속하게 잘 혼합 된 하이드로 겔을 보장합니다. </li><li> 차가운 20 ML의 주사기에 전송합니다. </li><li> 한 손으로도 내부 BSA 고무를 누르고, 다른 쪽을 이용하여, 웰의 바닥에 콜라겐 겔 용액의 절반을 분배. </li><li> 멸균 핀셋을 사용하여, 고무 유입과 유출 끝이 아니라의 측면에 접촉되어 있는지 확인합니다. </li><li> 완전히 덮여 때까지 고무의 상단에 콜라겐 솔루션을 따르십시오. </li><li> BSA 고무가 콜라겐 내에서 정지되어 있고, 특히 고무의 끝 근처에 거품이 없는지 확인합니다. </li><li> 덮개를 놓고 주위 파라 필름 포장잘 둘레. </li><li> 37 ° C에서 1 시간 동안 인큐베이터에 넣어. 의 PCR 자외선을 유지합니다. </li></ol></li><li> 콜라겐의 중합 후, UV는하기 절차를 가교 하이드로 겔. 주 : 콜라겐 가교 에너지의 양을 제어 할 수있는 UV 가교제 장치를 사용하여 수행한다. <ol><li> UV 가교제를 켜고 63 μJ / ㎠로 빈 챔버를 조사하는 에너지 설정을 사용합니다. </li><li> 인큐베이터에서 젤을 제거합니다. </li><li> 에탄올로 손을 스프레이하고, 챔버 내에서 가능한 한 빨리 뚜껑을 제거합니다. </li><li> 챔버를 닫고 UV 에너지 설정을 선택하고 63 μJ / ㎠를 조사하여 하이드로 겔을 가교. </li><li> 가교주기 후, PCR 후드에 자외선을 해제 </li><li> 에탄올로 손 스프레이 빠르게 웰 플레이트에 다시 뚜껑을 배치, 챔버를 엽니 다. 잘 플레이트를 이동PCR의 후드. </li><li> 부드럽게 풀어 우물에서 젤을 제거, 멸균 주걱을 사용. 하이드로 겔의 바닥 가교 후드 겔 플립. 단계를 반복 6.2.3과 6.2.4. </li></ol></li></ol> BSA 고무 7. 효소 소화 <ol><li> 중공 콜라겐 지지체를 위해, 하이드로 겔에 포함 된 차원에 영향을주지 않는 방식으로 BSA 고무를 제거한다. 절차는 다음과 같다. <ol><li> 조직 문화 후드를 소독하기 위해 20 ~ 30 분 동안 자외선을 켭니다. </li><li> 0.25 % 트립신 용액의 pH 7.8을 확인합니다. 예를 들어, 물 15 mL를 들어, 50 ㎖ 원뿔형 튜브에 트립신 0.0376 g을 추가한다. 1 M NaCl을 소량 (2-5 μL)을 추가하여 7.8로 pH를 조정합니다. 20 mL의 주사기에 넣고 용액을 0.20 μm의 주사기 필터로 덮인. 필터를 통해 액체를 추방하고 새로운 튜브에 멸균 솔루션을 수집하는 플런저를 누르십시오. </li><li> 수조를 켜고 (30)의 온도를 설정기음. </li><li> 30 분 후, 자외선을 끕니다. 후드에 사용되는 모든 튜브와 재료에 에탄올을 스프레이. </li><li> 별도의 원뿔 관에서 후드와 장소에 따라 콜라겐 하이드로 겔을 전송합니다. </li><li> 각 튜브에 7.8의 pH와 0.25 % 트립신 용액 (젤을 충당하기에 충분한) 약 3 ~ 5 ML을 추가합니다. </li><li> 약 1 분 동안 가볍게 파라 필름과 소용돌이 튜브를 밀봉합니다. </li><li> 15-24 시간 동안 30 ° C의 물을 욕조에 넣어. BSA 고무 소화 또는 하이드로 겔에서 제거 될 때까지 물을 욕조에있는 동안, 가볍게 자주 젤을 소용돌이. 참고 : 위해 BSA 고무가 제거되었는지 확인하기 위해, 하나 고무 트립신 용액에 떠 또는 고장난 조각이있다. 하이드로 겔 내에서 시각적 어두운 부분이 없어야합니다. </li></ol></li><li> 아래에 설명 된대로 모든 BSA 고무 및 트립신은 하이드로 겔에서 제거되었는지 확인하기 위해, 린스. <ol><li> PCR의 ~이 켭니다20 ~ 30 분 동안 D 자외선. </li><li> Mosconas 솔루션을 준비합니다. 물에서 염화칼륨 (KCl을, 28.6 mM)을 (수 NaHCO3 11.9 mM)을 포도당 (9.4 mM)을하고 (NaH를 2 PO 4, 0.08 mm)를 결합한다. 1 M NaOH를 12 M HCl 용액으로 pH 7.4까지를 조정합니다. 20 ML의 주사기에서 솔루션을 배치하고 솔루션을 소독하기 위해 0.20 ㎛의 주사기 필터를 사용합니다. </li><li> 후드에 그들을 배치하기 전에 에탄올로 모든 스프레이 및 에탄올 건조 할 수 있습니다. </li><li> 튜브를 열고 새 50 ML 원뿔 관에 멸균 Mosconas 솔루션의 5 ~ 10 mL로 전송합니다. </li><li> 효소 용액을 포함하는 원뿔형 튜브에 콜라겐 겔을 전송. 하이드로 겔이 완전히 용액으로 덮여 있는지 확인합니다. 30 분 동안 4 ° C의 냉장고에있는 통에 튜브를 남겨주세요. </li><li> Mosconas 솔루션과 두 번 단계를 반복 7.2.5을 대기음. </li><li> 4 ℃에서 보관하십시오. </li></ol></li></ol>

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N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theory+of+protein+solubility.">Theory of protein solubility.</a> Methods Enzymol. 114, 49-77 (1985).</li><li>Migneault, I., Dartiguenave, C., Bertrand, M. J., Waldron, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutaraldehyde:+behavior+in+aqueous+solution,+reaction+with+proteins,+and+application+to+enzyme+crosslinking.">Glutaraldehyde: behavior in aqueous solution, reaction with proteins, and application to enzyme crosslinking.</a> Biotechniques. 37, 790-796 (2004).</li><li>Burmeister, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutaraldehyde+cross-linked+glutamate+oxidase+coated+microelectrode+arrays:+selectivity+and+resting+levels+of+glutamate+in+the+CNS.">Glutaraldehyde cross-linked glutamate oxidase coated microelectrode arrays: selectivity and resting levels of glutamate in the CNS.</a> ACS Chem Neurosci. 4, 721-728 (2013).</li><li>Chatterji, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gelatin+with+hydrophilic/hydrophobic+grafts+and+glutaraldehyde+crosslinks.">Gelatin with hydrophilic/hydrophobic grafts and glutaraldehyde crosslinks.</a> J. Appl. Polym. Sci. 37, 2203-2212 (1989).</li><li>Freije, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemically+modified,+immobilized+trypsin+reactor+with+improved+digestion+efficiency.">Chemically modified, immobilized trypsin reactor with improved digestion efficiency.</a> J Proteome Res. 4, 1805-1813 (2005).</li><li>Cunha-Filho, M. S., Alvarez-Lorenzo, C., Martinez-Pacheco, R., Landin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temperature-sensitive+gels+for+intratumoral+delivery+of+beta-lapachone:+effect+of+cyclodextrins+and+ethanol.">Temperature-sensitive gels for intratumoral delivery of beta-lapachone: effect of cyclodextrins and ethanol.</a> ScientificWorldJournal. 2012, 126723 (2012).</li><li>Basak, R., Bandyopadhyay, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Encapsulation+of+hydrophobic+drugs+in+Pluronic+F127+micelles:+effects+of+drug+hydrophobicity,+solution+temperature,+and+pH.">Encapsulation of hydrophobic drugs in Pluronic F127 micelles: effects of drug hydrophobicity, solution temperature, and pH.</a> Langmuir. 29, 4350-4356 (2013).</li></ol>

저자는 공개 아무것도 없어.

Biofabrication 생물학 및 공학 원리가 기​​본 조직을 모방 복잡한 물질을 생성하기 위해 병합하는 고도의 전문 분야 필드입니다. 이를 달성하기 위해서, 생체 조직으로부터 수집 한 정보를 사용하여 시험 관내 지지체로 번역 기술을 개발할 필요가있다. 이러한 방식으로, 플랫폼이 밀접 생체 조직, 구조적 기능적, 기계적 특성과 유사한 것으로 설계 될 수있다. 최적 발판 재료, ?...

조직 공학 분야에서 조직 지지체를 제조하는 능력은 중요하다. 적합한 조직 골격이 3 차원 구조를 갖는 생체 적합성 재료로 구성되고, 생체 조직의 구조를 모방은 세포 및 조직의 성장 및 리모델링을 용이. 이 비계는 영양분의 수송 및 폐기물 1-4의 제거를 허용해야합니다. 이러한 지지체의 제조에서 주요 장애물 중 하나는 생체 적합성 물질로 특정 기하학적 특징 요점을 되풀이하는 능력이다. 몇몇 biofabrication 기술은 이러한 지지체의 기하학적 특징을 조절하는 것으로보고 된, 예로는 용매 캐스팅 9 조형 10 5-8 전기 방사되고, 그 중에서도 11 차원 인자. 이러한 기술은 제어 내부 및 외부 건축 기능을 상대적으로 쉽게 전송을 제공하는 짧은 가을, 비싼, 그들의 해상도와 인쇄 적성 (에 의해 제한되어 있습니다 <em&gt; 예를 들면, 노즐 게이지, 소재 제한), 또는 실행 가능한 지지체 (12)를 생성하기 위해 장시간을 요구 후 제조 기술을 필요로한다. 많은 상용 제조 시스템에서, 내부 보이드, 채널 및 기능 생성 모래 또는 다른 적합한 이동식 또는 희생 물질을 사용하여 달성된다. 금속 또는 플라스틱 부분 사형 주위에 형성되고, 그것이 경화되면, 모래가 제거된다. 거의 같은 방법으로, 생체 물질의 차세대 biosand 당량이 필요하다. 따라서, BSA 고무 biosand위한 대용품으로 개발되었다. BSA 고무는 글루 타르 알데히드와 가교 결합 소 혈청 알부민으로 구성된 신규 제형 재료이다. 궁극적 인 목표는 생분해 성 콜라겐 지지체에 특정 건축 기능을 다시하는 것입니다. 원 조직의 금형 치수 충실도를 유지하는 희생 biorubber의 특성을 설명한다. <p cl엉덩이 = &quot;jove_content&quot;&gt; BSA 및 글루 타르 알데히드의 농도의 몇몇 조합은 다양한 용매를 사용하여 테스트 하였다. 이 자료는 BSA와 글루 타르 알데히드의 반응에 의해 만들어졌습니다. BSA 고무 조직 형의 복잡한 형상의 반응에 주입 될 수있다. 가교 BSA는 불안정하고 쉽게 중성 pH 및 온도 조건에서 효소에 의해 분해 트립신된다. 반대로, I 콜라겐 손상 유형은 트립신 소화에 매​​우 강하다. 이러한 기능은 선택적으로 뒤에 콜라겐을 떠나 BSA 고무를 제거하기 위해 대문자로했다. 본 연구는 생체 지지체 특정 구조적 특징을 제공 할 수있는 불안정한 주형을 얻기 위해 필요한 최적 파라미터를 결정하는 단계로 구성되었다. 평가 특정 기능 혼합 성, 효소 절단, 하중 및 네가티브 몰드에 주입 반응 할 수있는 능력을 포함했다. 30 % BSA 및 3 % 글루 타르 알데히드의 조합은 이러한 요구 사항을 충족. 이 프로토콜은 necess을 제공합니다진 가이드 라인은이 세 가지 차원의 발판을 만들 수 있습니다. 프로토 타입은 하나의 유입과 각각 4- 3-mm의 직경이 유출 채널 분지 구조를 나타내는 콜라겐 지지체로 구성되어 있습니다. 이 방법은 관심있는 조직을 다량 및 미세 환경을 모방 할 수있는 잠재력을 갖는다. 이 기술은 생체 조직 탄성 관심 조직의 다른 특성을 모방하기 위해 동조 될 수있는 높은 정확도를 가진 비교적 쉽고 적시 문제에 생분해 성 물질의 특정 기하학적 유익을 제공하기 위해 실행 가능한 기술을 제공한다.

<table><tbody><tr><td>Collagen type I</td><td></td><td></td><td>Collagen extracted from calf hide</td></tr><tr><td>Hydrocloric Acid (HCl)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7647-01-0</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate Buffer Solution (PBS Tablets)</td><td>MP Biomedical</td><td>U5378</td><td>1 tablet per 100 ml makes 1x PBS</td></tr><tr><td>Albumium from bovine serum (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>Glutaraldehyde</td><td>Sigma -Aldrich</td><td>G5882</td><td>Toxic</td></tr><tr><td>Lard</td><td>Fields</td><td>3090</td><td></td></tr><tr><td>Stainless Steel Molds</td><td></td><td></td><td>Milled using Microlution Machine</td></tr><tr><td>Air Brush Kit</td><td>Central Pneumatic</td><td>47791</td><td></td></tr><tr><td>Mixing Tip for double syringe</td><td>Medmix</td><td>ML2.5-16-LLM</td><td>Mixer, DN2,5X16, 4:1 brown, med</td></tr><tr><td>Small O ring for double syringe</td><td>Medmix</td><td>PPB-X05-04-02SM</td><td>Piston B, 5 ml, 4:1, PE natural</td></tr><tr><td>Double Syringe cap&amp;nbsp;</td><td>Medmix</td><td>VLX002-SM</td><td>Cap, 4:1/10:1, PE brown, med</td></tr><tr><td>Big O ring for double syringe</td><td>Medmix</td><td>PPA-X05-04-02SM</td><td>Piston A, 5 ml, 4:1</td></tr><tr><td>Double Syringe</td><td>Medmix</td><td>SDL X05-04-50M</td><td>Double syringe, 5 ml, 4:1</td></tr><tr><td>Double Syringe Dispenser</td><td>Medmix</td><td>DL05-0400M</td><td>Dispenser, 5 ml, 4:1, med , plain</td></tr><tr><td>Laminim</td><td></td><td></td><td>3.6 mg/ml - extracted USC lab</td></tr><tr><td>20 ml Syringe Luer Lock Tip</td><td>BD</td><td>302830</td><td></td></tr><tr><td>Luer Lock Caps</td><td>Fisher</td><td>JGTCBLLX</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma -Aldrich</td><td>H4034</td><td></td></tr><tr><td>Gibco Minimum Essential Media 10x (MEM)</td><td>Life Technologies</td><td>1143-030</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Life Technologies</td><td>27250-018</td><td></td></tr><tr><td>UV Crosslinker&amp;nbsp;</td><td>Spectroline UV</td><td>XLE1000</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Cloride (NaCl)</td><td>Fisher</td><td>S271-10</td><td>To prepare Mosconas</td></tr><tr><td>Potassium chloride (KCl)</td><td>Sigma -Aldrich</td><td>P5405-250</td><td>To prepare Mosconas</td></tr><tr><td>Sodium Bicarbonate (NaHCO&lt;sub&gt;3&lt;/sub&gt;)</td><td>Fisher</td><td>BP328-500</td><td>To prepare Mosconas</td></tr><tr><td>Glucose</td><td>Sigma -Aldrich</td><td>G-8270</td><td>To prepare Mosconas</td></tr><tr><td>Sodium Phosphate didasic (NaH&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;PO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S-7907</td><td>To prepare Mosconas</td></tr><tr><td>Sterile Filter for syringes</td><td>Corning</td><td>431224</td><td></td></tr></tbody></table>

three-dimensional biomimetic technology: novel biorubber creates defined micro- and macro-scale architectures in collagen hydrogels

조직 지지체는 조직 재생 과정에서 중요한 역할을한다. 이상적인 발판는 데 적절한 구성, 대상 계수, 잘 정의 된 아키텍처 기능 같은 몇 가지 요구 사항을 충족해야합니다. 생체 조직의 고유 아키텍처를 요점을 되풀이 생체 적합 물질은 질병을 공부뿐만 아니라 손실과 잘못된 연부 조직의 재생을 촉진하기 위해 매우 중요합니다. 신규 biofabrication 기술이 연구 및 임상 적 적용을위한 생체 재료의 새로운 세대를 만들 아트 화상, 3 차원 (3D) 인쇄, 선택적 효소의 활성 상태를 결합하는 개발되었다. 개발 한 물질, 소 혈청 알부민 고무 특정 기하학적 특징을 지탱 몰드에 주입 반응이다. 이 희생 물질은 자연 골격 물질에 건축 기능의 적절한 전송을 할 수 있습니다. 프로토 타입은 4 3mm 채널에 repr로 3D 콜라겐 지지체로 구성분 지형 구조를 ESENT. 이 논문은 자연 구조의 생성이 biofabrication 기술의 사용을 강조한다. 이 프로토콜은 컴퓨터 지원 소프트웨어 (CAD) 골격 물질 내에서 구조적 특징을두고 고무의 효소 소화 하였다 BSA 고무 주입 반응 것이다 고형 금형 제조를 이용한다.

결과는이 기술이 biofabrication 생체 조직에서 본 공간 배열을 모방 할 수 3D 골격을 생성하는데 효율적임을 보여준다. 구조적 특징들은 조직의 생체 내 상호 작용 및 세포 기능에 중요한 역할을하는 조직 공학 응용을위한 중요한 파라미터이다. BSA 고무의 일관성 및 균일 혼합 성이 그 의도 된 형상을 유지할 수 BSA ?...

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Three-dimensional Biomimetic Technology: Novel Biorubber Creates Defined Micro- and Macro-scale Architectures in Collagen Hydrogels

An innovative biofabrication technique was developed to engineer three-dimensional constructs that resemble the architectural features, components, and mechanical properties of in vivo tissue. This technique features a newly developed sacrificial material, BSA rubber, which transfers detailed spatial features, reproducing the in vivo architectures of a wide variety of tissues.

세 가지 차원 생체 모방 기술 ​​: 소설 Biorubber는 콜라겐 하이드로 겔에 마이크로 및 매크로 스케일 아키텍처를 정의 작성합니다

Tissue scaffolds play a crucial role in the tissue regeneration process. The ideal scaffold must fulfill several requirements such as having proper ...

three-dimensional-biomimetic-technology-novel-biorubber-creates

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Bioengineering

9.1K 조회수.  Medical University of South Carolina. An innovative biofabrication technique was developed to engineer three-dimensional constructs that resemble the architectural features, components, and mechanical properties of in vivo tissue. This technique features a newly developed sacrificial material, BSA rubber, which transfers detailed spatial features, reproducing the in vivo architectures of a wide variety of tissues.

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Printing Thermoresponsive Reverse Molds for the Creation of Patterned Two-component Hydrogels for 3D Cell Culture

Bioprinting is an emerging technology that has its origins in the rapid prototyping industry. The different printing processes can be divided into contact bioprinting1-4 (extrusion, dip pen and soft lithography), contactless bioprinting5-7 (laser forward transfer, ink-jet deposition) and laser based techniques such as two photon photopolymerization8. It can be used for many applications such as tissue engineering9-13, biosensor microfabrication14-16 and as a tool to answer basic biological questions such as influences of co-culturing of different cell types17. Unlike common photolithographic or soft-lithographic methods, extrusion bioprinting has the advantage that it does not require a separate mask or stamp. Using CAD software, the design of the structure can quickly be changed and adjusted according to the requirements of the operator. This makes bioprinting more flexible than lithography-based approaches.
Here we demonstrate the printing of a sacrificial mold to create a multi-material 3D structure using an array of pillars within a hydrogel as an example. These pillars could represent hollow structures for a vascular network or the tubes within a nerve guide conduit. The material chosen for the sacrificial mold was poloxamer 407, a thermoresponsive polymer with excellent printing properties which is liquid at 4 &deg;C and a solid above its gelation temperature ~20 &deg;C for 24.5% w/v solutions18. This property allows the poloxamer-based sacrificial mold to be eluted on demand and has advantages over the slow dissolution of a solid material especially for narrow geometries. Poloxamer was printed on microscope glass slides to create the sacrificial mold. Agarose was pipetted into the mold and cooled until gelation. After elution of the poloxamer in ice cold water, the voids in the agarose mold were filled with alginate methacrylate spiked with FITC labeled fibrinogen. The filled voids were then cross-linked with UV and the construct was imaged with an epi-fluorescence microscope.

A bioprinter was used to create patterned hydrogels based on a sacrificial mold. The poloxamer mold was backfilled with a second hydrogel and then eluted, leaving voids which were filled with a third hydrogel. This method uses fast elution and good printability of poloxamer to generate complex architectures from biopolymers.

모방의 창조 3D 세포 배양을위한 두 구성 요소 히드로 겔에 대한 Thermoresponsive 역 금형 인쇄

Bioprinting is an emerging technology that has its origins in the rapid prototyping industry. The different printing processes can be divided into contact ...

연구

면역학 및 감염병학

Three-Dimensional In Vitro Biomimetic Model of Neuroblastoma Using Collagen-Based Scaffolds

Neuroblastoma is the most common extracranial solid tumor in children, accounting for 15% of overall pediatric cancer deaths. The native tumor tissue is a complex three-dimensional (3D) microenvironment involving layers of cancerous and non-cancerous cells surrounded by an extracellular matrix (ECM). The ECM provides physical and biological support and contributes to disease progression, patient prognosis, and therapeutic response.
This paper describes a protocol for assembling a 3D scaffold-based system to mimic the neuroblastoma microenvironment using neuroblastoma cell lines and collagen-based scaffolds. The scaffolds are supplemented with either nanohydroxyapatite (nHA) or glycosaminoglycans (GAGs), naturally found at high concentrations in the bone and bone marrow, the most common metastatic sites of neuroblastoma. The 3D porous structure of these scaffolds allows neuroblastoma cell attachment, proliferation and migration, and the formation of cell clusters. In this 3D matrix, the cell response to therapeutics is more reflective of the in vivo situation.
The scaffold-based culture system can maintain higher cell densities than conventional two-dimensional (2D) cell culture. Therefore, optimization protocols for initial seeding cell numbers are dependent on the desired experimental timeframes. The model is monitored by assessing cell growth via DNA quantification, cell viability via metabolic assays, and cell distribution within the scaffolds via histological staining.
This model&#39;s applications include the assessment of gene and protein expression profiles as well as cytotoxicity testing using conventional drugs and miRNAs. The 3D culture system allows for the precise manipulation of cell and ECM components, creating an environment more physiologically similar to native tumor tissue. Therefore, this 3D in vitro model will advance the understanding of the disease pathogenesis and improve the correlation between results obtained in vitro, in vivo in&#160;animal models, and human subjects.

Three-Dimensional In Vitro Biomimetic Model of Neuroblastoma Using Collagen-Based Scaffolds

This paper lists the steps required to seed neuroblastoma cell lines on previously described three-dimensional collagen-based scaffolds, maintain cell growth for a predetermined timeframe, and retrieve scaffolds for several cell growth and cell behavior analyses and downstream applications, adaptable to satisfy a range of experimental aims.

콜라겐 기반 스캐폴드를 사용한 신경모세포종의 3차원 체외 생체모방 모델

Neuroblastoma is the most common extracranial solid tumor in children, accounting for 15% of overall pediatric cancer deaths. The native tumor tissue is a ...

암 연구학

Engineering 3D Cellularized Collagen Gels for Vascular Tissue Regeneration

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. Collagen has been extensively used for a wide range of biomedical applications and is considered a valid alternative to synthetic materials due to its inherent biocompatibility (i.e., low antigenicity, inflammation, and cytotoxic responses). However, the limited mechanical properties and the related low hand-ability of collagen gels have hampered their use as scaffold materials for vascular tissue engineering. Therefore, the rationale behind this work was first to engineer cellularized collagen gels into a tubular-shaped geometry and second to enhance smooth muscle cells driven reorganization of collagen matrix to obtain tissues stiff enough to be handled.
The strategy described here is based on the direct assembling of collagen and smooth muscle cells (construct) in a 3D cylindrical geometry with the use of a molding technique. This process requires a maturation period, during which the constructs are cultured in a bioreactor under static conditions (without applied external dynamic mechanical constraints) for 1 or 2 weeks. The &#8220;static bioreactor&#8221; provides a monitored and controlled sterile environment (pH, temperature, gas exchange, nutrient supply and waste removal) to the constructs. During culture period, thickness measurements were performed to evaluate the cells-driven remodeling of the collagen matrix, and glucose consumption and lactate production rates were measured to monitor the cells metabolic activity. Finally, mechanical and viscoelastic properties were assessed for the resulting tubular constructs. To this end, specific protocols and a focused know-how (manipulation, gripping, working in hydrated environment, and so on) were developed to characterize the engineered tissues.

In this work, we present a technique for the rapid fabrication of living vascular tissues by direct culturing of collagen, smooth muscle cells and endothelial cells. In addition, a new protocol for the mechanical characterization of engineered vascular tissues is described.

혈관 조직 재생을위한 엔지니어링 3D Cellularized 콜라겐 젤

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. ...

생체공학

Viability of Bioprinted Cellular Constructs Using a Three Dispenser Cartesian Printer

Tissue engineering has centralized its focus on the construction of replacements for non-functional or damaged tissue. The utilization of three-dimensional bioprinting in tissue engineering has generated new methods for the printing of cells and matrix to fabricate biomimetic tissue constructs. The solid freeform fabrication (SFF) method developed for three-dimensional bioprinting uses an additive manufacturing approach by depositing droplets of cells and hydrogels in a layer-by-layer fashion. Bioprinting fabrication is dependent on the specific placement of biological materials into three-dimensional architectures, and the printed constructs should closely mimic the complex organization of cells and extracellular matrices in native tissue. This paper highlights the use of the Palmetto Printer, a Cartesian bioprinter, as well as the process of producing spatially organized, viable constructs while simultaneously allowing control of environmental factors. This methodology utilizes computer-aided design and computer-aided manufacturing to produce these specific and complex geometries. Finally, this approach allows for the reproducible production of fabricated constructs optimized by controllable printing parameters.

A Cartesian bioprinter was designed and fabricated to allow multi-material deposition in precise, reproducible geometries, while also allowing control of environmental factors. Utilizing the three-dimensional bioprinter, complex and viable constructs may be printed and easily reproduced.

세 디스펜서 데카르트 프린터 사용 Bioprinted 세포를 구축의 생존

Tissue engineering has centralized its focus on the construction of replacements for non-functional or damaged tissue. The utilization of ...

Preparation of 3D Collagen Gels and Microchannels for the Study of 3D Interactions In Vivo

Historically, most cellular processes have been studied in only 2 dimensions. While these studies have been informative about general cell signaling mechanisms, they neglect important cellular cues received from the structural and mechanical properties of the local microenvironment and extracellular matrix (ECM). To understand how cells interact within a physiological ECM, it is important to study them in the context of 3 dimensional assays. Cell migration, cell differentiation, and cell proliferation are only a few processes that have been shown to be impacted by local changes in the mechanical properties of a 3-dimensional ECM. Collagen I, a core fibrillar component of the ECM, is more than a simple structural element of a tissue. Under normal conditions, mechanical cues from the collagen network direct morphogenesis and maintain cellular structures. In diseased microenvironments, such as the tumor microenvironment, the collagen network is often dramatically remodeled, demonstrating altered composition, enhanced deposition and altered fiber organization. In breast cancer, the degree of fiber alignment is important, as an increase in aligned fibers perpendicular to the tumor boundary has been correlated to poorer patient prognosis1. Aligned collagen matrices result in increased dissemination of tumor cells via persistent migration2,3. The following is a simple protocol for embedding cells within a 3-dimensional, fibrillar collagen hydrogel. This protocol is readily adaptable to many platforms, and can reproducibly generate both aligned and random collagen matrices for investigation of cell migration, cell division, and other cellular processes in a tunable, 3-dimensional, physiological microenvironment.

Preparation of 3D Collagen Gels and Microchannels for the Study of 3D Interactions In Vivo

Collagen is a core component of the ECM, and provides essential cues for several cellular processes ranging from migration to differentiation and proliferation. Provided here is a protocol for embedding cells within 3D collagen hydrogels, and a more advanced technique for generating randomized or aligned collagen matrices using PDMS microchannels.

3D 상호 작용의 연구에 대한 3D 콜라겐 젤과 마이크로 채널 준비<em&gt; 생체</em

Historically, most cellular processes have been studied in only 2 dimensions.  While these studies have been informative about general cell signaling ...

κ-Carrageenan Sub-Microgel Medium을 사용한 3D 바이오프린팅의 발전

Embedded Bioprinting of Tissue-like Structures Using &#954;-Carrageenan Sub-Microgel Medium

Embedded three-dimensional (3D) bioprinting utilizing a granular hydrogel supporting bath has emerged as a critical technique for creating biomimetic scaffolds. However, engineering a suitable gel suspension medium that balances precise bioink deposition with cell viability and function presents multiple challenges, particularly in achieving the desired viscoelastic properties. Here, a novel &#954;-carrageenan gel supporting bath is fabricated through an easy-to-operate mechanical grinding process, producing homogeneous sub-microscale particles. These sub-microgels exhibit typical Bingham flow behavior with small yield stress and rapid shear-thinning properties, which facilitate the smooth deposition of bioinks. Moreover, the reversible gel-sol transition and self-healing capabilities of the &#954;-carrageenan microgel network ensure the structural integrity of printed constructs, enabling the creation of complex, multi-layered tissue structures with defined architectural features. Post-printing, the &#954;-carrageenan sub-microgels can be easily removed by a simple phosphate-buffered saline wash. Further bioprinting with cell-laden bioinks demonstrates that cells within the biomimetic constructs have a high viability of 92% and quickly extend pseudopodia, as well as maintain robust proliferation, indicating the potential of this bioprinting strategy for tissue and organ fabrication. In summary, this novel &#954;-carrageenan sub-microgel medium emerges as a promising avenue for embedded bioprinting of exceptional quality, bearing profound implications for the in vitro development of engineered tissues and organs.

저자 스포트라이트: 고해상도 3D 바이오프린팅을 위한 균질 κ-Carrageenan Sub-Microgel Baths 개발

This study introduces a novel &#954;-carrageenan sub-microgel suspension bath, displaying remarkable reversible jamming-unjamming transition properties. These attributes contribute to the construction of biomimetic tissues and organs in embedded 3D bioprinting. The successful printing of heart/esophageal-like tissues with high resolution and cell growth demonstrates high-quality bioprinting and tissue engineering applications.

κ-Carrageenan Sub-Microgel Medium을 사용한 조직 유사 구조의 임베디드 바이오프린팅

Embedded three-dimensional (3D) bioprinting utilizing a granular hydrogel supporting bath has emerged as a critical technique for creating biomimetic ...

공학

Bioprintable Alginate/Gelatin Hydrogel 3D In Vitro Model Systems Induce Cell Spheroid Formation

The cellular, biochemical, and biophysical heterogeneity of the native tumor microenvironment is not recapitulated by growing immortalized cancer cell lines using conventional two-dimensional (2D) cell culture. These challenges can be overcome by using bioprinting techniques to build heterogeneous three-dimensional (3D) tumor models whereby different types of cells are embedded. Alginate and gelatin are two of the most common biomaterials employed in bioprinting due to their biocompatibility, biomimicry, and mechanical properties. By combining the two polymers, we achieved a bioprintable composite hydrogel with similarities to the microscopic architecture of a native tumor stroma. We studied the printability of the composite hydrogel via rheology and obtained the optimal printing window. Breast cancer cells and fibroblasts were embedded in the hydrogels and printed to form a 3D model mimicking the in vivo microenvironment. The bioprinted heterogeneous model achieves a high viability for long-term cell culture (&#62; 30 days) and promotes the self-assembly of breast cancer cells into multicellular tumor spheroids (MCTS). We observed the migration and interaction of the cancer-associated fibroblast cells (CAFs) with the MCTS in this model. By using bioprinted cell culture platforms as co-culture systems, it offers a unique tool to study the dependence of tumorigenesis on the stroma composition. This technique features a high-throughput, low cost, and high reproducibility, and it can also provide an alternative model to conventional cell monolayer cultures and animal tumor models to study cancer biology.

Bioprintable Alginate/Gelatin Hydrogel 3D In Vitro Model Systems Induce Cell Spheroid Formation

We developed a heterogeneous breast cancer model consisting of immortalized tumor and fibroblast cells embedded in a bioprintable alginate/gelatin bioink. The model recapitulates the in vivo tumor microenvironment and facilitates the formation of multicellular tumor spheroids, yielding insight into the mechanisms driving tumorigenesis.

셀 회전 타원 체 형성을 유발 하는 모델 시스템에 3D 생체 외에서 Bioprintable Alginate/젤라틴 하이드로 겔

The cellular, biochemical, and biophysical heterogeneity of the native tumor microenvironment is not recapitulated by growing immortalized cancer cell ...

Protocols of 3D Bioprinting of Gelatin Methacryloyl Hydrogel Based Bioinks

Gelatin methacryloyl (GelMA) has become a popular biomaterial in the field of bioprinting. The derivation of this material is gelatin, which is hydrolyzed from mammal collagen. Thus, the arginine-glycine-aspartic acid (RGD) sequences and target motifs of matrix metalloproteinase (MMP) remain on the molecular chains, which help achieve cell attachment and degradation. Furthermore, formation properties of GelMA are versatile. The methacrylamide groups allow a material to become rapidly crosslinked under light irradiation in the presence of a photoinitiator. Therefore, it makes great sense to establish suitable methods for synthesizing three-dimensional (3D) structures with this promising material. However, its low viscosity restricts GelMA's printability. Presented here are methods to carry out 3D bioprinting of GelMA hydrogels, namely the fabrication of GelMA microspheres, GelMA fibers, GelMA complex structures, and GelMA-based microfluidic chips. The resulting structures and biocompatibility of the materials as well as the printing methods are discussed. It is believed that this protocol may serve as a bridge between previously applied biomaterials and GelMA as well as contribute to the establishment of GelMA-based 3D architectures for biomedical applications.

Presented here is a method for the 3D bioprinting of gelatin methacryloyl.

젤라틴 메타크릴 하이드로겔 기반 바이오잉크의 3D 바이오프린팅 프로토콜

Gelatin methacryloyl (GelMA) has become a popular biomaterial in the field of bioprinting. The derivation of this material is gelatin, which is hydrolyzed ...

세 가지 차원 생체 모방 기술 : 소설 Biorubber는 콜라겐 하이드로 겔에 마이크로 및 매크로 스케일 아키텍처를 정의 작성합니다

요약

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모방의 창조 3D 세포 배양을위한 두 구성 요소 히드로 겔에 대한 Thermoresponsive 역 금형 인쇄

콜라겐 기반 스캐폴드를 사용한 신경모세포종의 3차원 체외 생체모방 모델

혈관 조직 재생을위한 엔지니어링 3D Cellularized 콜라겐 젤

세 디스펜서 데카르트 프린터 사용 Bioprinted 세포를 구축의 생존

3D 상호 작용의 연구에 대한 3D 콜라겐 젤과 마이크로 채널 준비

κ-Carrageenan Sub-Microgel Medium을 사용한 조직 유사 구조의 임베디드 바이오프린팅

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셀 회전 타원 체 형성을 유발 하는 모델 시스템에 3D 생체 외에서 Bioprintable Alginate/젤라틴 하이드로 겔

젤라틴 메타크릴 하이드로겔 기반 바이오잉크의 3D 바이오프린팅 프로토콜

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