이 연구는 출자자는 연구 설계, 자료 수집 및 분석, 게시하는 결정, 또는 원고의 준비를 전혀 역할을 없었다 EAK 할 수있는 국립 종합 의료 과학 연구소 (GM099883와 GM074675)에서 보조금에 의해 지원되었다. (: 접촉 우리는 행동 장치의 설계를 위해 하버드 의과 대학에서 우리의 기계 공장에서 사람들에게 감사 <a href="http://mikesmachine.com">http://mikesmachine.com</a> ). 저자 공헌 : ST는, 기원전 행동 장치를 설계했다. ST의 설계 및 실험 프로토콜을 최적화. ST와 BC 수행하고 실험을 분석 하였다. ST, EAK와 BC는 종이를 썼습니다.

참고 : 다음은 우리가 남성 초파리 쌍의 사이에 신뢰할 수있는 침략의 트리거를 허용하는 데 사용하는 실험 프로토콜 (D. melanogaster의)의 단계별 설명입니다. 이 절차는 &quot;패자&quot;효과의 형성을 유도한다. 이 프로토콜을 사용하여도있다 단기 &quot;승자&quot;효과는 최근 5,6를보고했다. 그림 1은 행동 실험의 타임 라인을 보여줍니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig1.jpg" /> 침략 실험 1. 타임 라인을 그림. 1 일에, 말기 남성 번데기는 (날개는 검은 색이 될 때) 새로 제조 된 절연 유리 병에 격리됩니다. 성인으로 부상 후 5 일에서 4 일 된 수컷 파리는 이산화탄소로 마취하고 식별을 위해 서로 다른 색상으로 색칠. 7 일에, 음식 컵과 싸움 챔버는행동 실험을 설정할 준비. 두 6~7일 된 성인 남성은 챔버에로드와 상호 작용을 할 수있다. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/53395/53395fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 1. 1 일 : 번데기의 사회적 고립 <ol><li> 올려 25 ℃, 상대 습도 50 %에서 환경 제어 12 시간 조명 / 12 시간 어두운주기 배양기에서 플라이 주식을 유지한다. </li><li> 절연 유리 병을 준비 녹은 때까지 신선한 플라이 음식을 가열한다. 파스퇴르 피펫을 사용하여, 하나의 빈 유리 테스트 튜브 (1.6 X 10cm)에 약 1.5 ml의 용융 플라이 음식을 전송합니다. 음식이 응고하도록 허용합니다. </li><li> 번데기를 분리 (날개는 검은 색이 될 때) 좋은 붓으로 부드럽게 주식 유리 병에서 말기 남성 번데기를 제거하고 신선하게 준비된 음식을 포함하는 테스트 튜브의 측면에 배치합니다. 면과의 긴밀한 절연 튜브 (그림 2). </li><lI&gt; 25 ° C와 50 %의 상대 습도에서 12 시간 조명 / 12 시간 어두운 인큐베이터에 번데기를 포함하는 장소 격리 병. </li></ol><img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig2.jpg" /> 그림 2. 사회적 고립. 한 말기 남성 번데기가 새로 제조 된 절연 유리 병에 측면에 배치됩니다. 번데기를 포함하는 절연 유리 병은 25 ℃, 상대 습도 50 %에서 12 시간 조명 / 12 시간 어두운 인큐베이터에 배치됩니다. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/53395/53395fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 2. 제 5 일 : 개인 식별 목적으로 파리 회화 <ol><li> CO 2 마취의 부정적인 영향을 최소화하기 위해 사일 세 남자 파리와 행동 실험 전에 이일과 5 일에서이 단계를 수행합니다. </li><li> CO 2와 함께 파리를 마취. </lI&gt; <li> 고급 이쑤시개로, 가슴에 아크릴 물감의 작은 점을 배치합니다. 머리, 날개, 복부 또는 다리 (그림 3)에 페인트를 두지 마십시오. </li><li> 약 10 초 동안 페인트 건조하자, 부드럽게 원래 절연 유리 병에 다시 파리를 전송합니다. </li><li> 25 ° C와 50 %의 상대 습도에서 12 시간 조명 / 12 시간 어두운 인큐베이터에 절연 튜브를 돌려줍니다. </li></ol><img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig3.jpg" /> 그림 3. 개인 식별이. CO 2, 아크릴 페인트의 작은 방울과 함께 파리를 마취 한 후 흉부에 적용됩니다. 개인 식별 목적을 위해 서로 다른 색상 (흰색, 여기에 파란색) 사용됩니다. 이 단계에서 이산화탄소의 사용에 대한 아래의 설명을 참조하십시오. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/53395/53395fig3large.jpg" target="_blank">이 figu의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오</a>레. 3 일 7 : 장치 준비 <ol><li> 식품 컵을 준비합니다 : <ol><li> 이 녹을 때까지 신선한 플라이 음식을 가열한다. </li><li> 파스퇴르 피펫을 사용하여 스크류 캡 바이알 (1.5 cm 직경 1cm 높이)의 뚜껑에 약 0.8 ml의 음식을 전송하고 냉각 할 수 있습니다. 공기 방울을 피하십시오. </li><li> 물을 몇 방울과 건조 효모를 혼합하여 신선한 효모 붙여 넣기를합니다. 두꺼운 경우, 이쑤시개 (도 4)와 음식물 컵 표면의 중심에 효모 페이스트의 작은 방울을 적용한다. </li></ol></li></ol><img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig4.jpg" /> 식품 컵 준비 그림 4. 음식 컵 신선한 플라이 음식을 준비한다. 음식 응고 후, 효모 페이스트의 점은 음식 컵 표면의 중앙에 배치됩니다. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/53395/53395fig4large.jpg" target="_blank">V하려면 여기를 클릭하십시오</a>이 그림의 더 큰 버전을 서평. <ol start="2"><li> 개인 파이팅 챔버를 준비합니다 : <ol><li> 철저하게 사용하기 전에 물을 때마다 장치 및 개별 전투 실을 씻는다. 사용하기 전에 종이 타월 드라이. </li><li> 각 전투 실의 중심에 음식 컵을 놓고 퍼티의 드롭 위치에 고정한다. </li><li> 장치 뚜껑 (그림 5)와 전투 실을 커버. </li><li> 25 ° C에서 고습 환경 (60 %)로 장치를 배치했다. </li><li> 전투 실을 조명하고 위에서 기록하는 비디오 카메라를 설정하는 장치 위에 광원을 배치합니다. </li></ol></li></ol><img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig5.jpg" /> 그림 5. 개별 전투 실을 준비. 표면에 효모 페이스트의 점이 신선하게 준비된 음식 컵 세척 개별 인터넷에 고정되어실을 조명. 챔버스는 개별 전투 실에 불투명 한 플라스틱 디바이더의 삽입을 허용 투피스 커버 닫혀있다. <a href="https://jove.unicartagenaproxy.elogim.com/files/ftp_upload/53395/53395fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 4. 7 일 : 행동 실험 <ol><li> 6-7일 세 남자 파리와 행동 실험을 수행합니다. </li><li> 각 전투 실에 플라스틱 칸막이를 삽입합니다. </li><li> 분리 튜브로부터 면화 플러그를 분리 장치의 측면에 열린 구멍 아래 튜브를 위치. </li><li> 비행은 일반적으로 몇 초 내에, 부정적인 geotaxis에 의해 전투 실에 들어 보자. </li><li> 비행 튜브를 떠나 챔버를 입력 한 후 슬라이딩 벽을 닫습니다. </li><li> 상기 장치의 다른 측면에 싸움 챔버로 제 2 플라이를 도입하는 과정을 반복한다. </li><li> 조명 videotapi 다시 장치를 배치NG 위치. </li><li> 비디오 녹화를 시작하고 파리가 상호 작용할 수 있도록 플라스틱 칸막이를 제거합니다. <ol><li> 침략 실험의 경우 : <ol><li> 이 실험에서 기록 강한 지배 관계의 형성을 보장하기 위해, 적어도 20 분 동안 싸운다. </li><li> 원하는 시간 후, 비디오 녹화를 중지합니다. </li><li> 위에서 설명한 절차를 반대로하여 전투 실에서 파리를 제거합니다. </li><li> 철저하게 각 사용 린스 후 중성 세제와 물을 행동 장치를 씻는다. </li></ol></li><li> &quot;패자&quot;효과 실험 : 주 :이 실험에서, 제 싸움은 시험 위상 조절 단계 및 제 시합으로 간주된다. 싸움 사이의 휴식 기간은 다를 수 있지만 10 분 강력한 &quot;패자&quot;효과의 형성을 할 수 있습니다. <ol><li> 첫 시합을 수행하기 위해 위에서 설명한 절차를 따르십시오. </li><li> 중요한 단계는 : 「패자 &quot;지성, (E)의 형성을 유도 할제 싸움은 적어도 20 분 강한 우성 관계를 설정하기 위해 긴 nsure. 20 분 후, 파리를 분리하는 전투 실에 플라스틱 디바이더를 다시 삽입합니다. </li><li> 나머지의 10 분 기간 후, 부드럽게 파리는 두 번째 경기에 대한 상호 작용을 할 수 있도록 플라스틱 칸막이를 제거합니다. </li><li> 제 20 분간 싸움의 끝에서, 녹화를 중지. </li><li> 위와 같이 행동 챔버에서 파리를 제거합니다. </li><li> 다시 한번, 철저하게 행동 장치를 청소하십시오. </li></ol></li></ol></li></ol> 5. 행동 분석 <ol><li> 동영상을 전송 <ol><li> 컴퓨터에 카메라를 연결합니다. </li><li> &quot;선택한 클립에 가입&quot;비디오 변환 소프트웨어와 옵션을 사용하여, 파리를 하셔도과 함께 영화 클립을 가입 파리의 MTS에 변환합니다. </li><li> 관찰하고 비디오 판독기 소프트웨어와 각 영화를 분석 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 채점 행동 이 수동으로 수행 할 수 있습니다 또는 우리 참고 :가능한 경우 행동 분석 프로그램 소프트웨어를 보내고. 아래 그림은 &quot;패자&quot;효과를 가능한 수동 분석을 설명합니다. <ol><li> 음식 컵 파리 사이의 첫 만남의 시간을 점수 및 제 찌르기의 외관의 시간 (한 비행에 높은 상승하는 행동 패턴 (만남은 적어도 2 초 지속 파리 쌍 사이의 상호 작용은) 그 뒷다리와 아래에 스냅) 상대를 잡기 위해 시도합니다. 이어서, (제 만남과 제 런지 간의 간격) 런지하는 지연 점수. </li><li> 싸움을하는 동안 만남과 런지의 총 수를 계산합니다. 참고 : 원하는 경우, 하나는 날개 위협, 복싱, 펜싱, 후퇴 또는 예를 들어 첫 번째 찌르기 전에 만남의 숫자, 같은 다른 행동 패턴을 득점 할 수 있습니다. </li><li> 우성 (첫 만남과 하나가 음식 컵 선미 떨어져 세 번 연속을위한 피정 비행 시간 사이의 시간의 설립시 점수어) 런지를 수신하는 단계를 포함한다. 비행 주 승자와 어떤 싸움의 패자입니다. </li></ol></li><li> &quot;패자&quot;효과를 계산 <ol><li> 이전 패자는 2 차 싸움 (손실 패자 : LL)을 잃게하는 싸움의 수를 나누어 싸움의 총 수에 의해, 그리고 100 얻은 백분율이 &quot;패자&quot;효과를 나타냅니다 곱 : [(#은 LL 파리) / (# 총 싸움)] × 100 </li><li> &quot;패자&quot;효과가 50 %의 기대 값에서 통계적으로 차이가 있는지 비교하기 위해 카이 제곱 테스트를 사용합니다. </li></ol></li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

침략의 연구를위한 모델 생물로 강력한 유전 적 방법과 초파리를 사용하는 현대 시대, 안정적인 전투 행동이 파리 1,7의 단일 쌍으로 얻을 수있는 새로운 실험 무대의 도입으로 12 년 전 약 시작 8,17,19. 이 경기장은 원하는 자원 (식품 컵, 잠재적 인 동료)와 패자를위한 공간으로 후퇴 (으)로 운항하는 항공사를 포함했다. 이 경기장 얻은 결과는 초파리의 싸움 동작에 ?...

동물 시스템의 침략 강하게 수집 및 식품, 영토와 동료와 같은 자원의 유지와 연관되어있다. 이 개인의 피트니스에서 활약 중요한 역할을 감안할 때, 그것은 침략은 동물의 왕국에 걸쳐 진화 것은 놀라운 일이 아니다. 직접 개인에게 혜택을 적응 특성으로, 강한 학습과 기억 구성 요소는 침략과 연관되어 있습니다. 사회 계급에 대한 경쟁에서, 이전의 전투 경험은 이후 대회의 결과에 영향을 미친다. 일반적으로, 이전의 패배 경험이 증가하고, 우승 경험은 감소, 나중에 경연을 잃을 확률은 ( &quot;패자&quot;과 &quot;승자&quot;효과라고도 함). &quot;패자&quot;효과 종의 넓은 범위에서 관찰하고, 일부 리포트는 &quot;승자&quot;효과는 일반적으로 짧은 시간 동안의 2,10,11이 며칠 동안 지속될 수 있다는 것을 시사하고있다. 공격적인 행동의 첫 번째 보고서초파리에서 (D.의 ampelophila) 성 인식과 성 선택 (12)과 관련 논문에서 1915 년 Sturtevant로했다. 나중에, 남성 과일의보다 완벽한 검사가 침략을 비행 반세기가 초파리의 싸움 중에 관찰 된 행동 패턴의 대부분을 설명하는, 만들어졌다. 이들 실험은 대부분 13-15 시간 동안 관찰 암수 파리의 소그룹을 실시 하였다. 최근 강력한 유전자 도구, 이항 단일 섹스 싸움 설정과 관찰, D의 짧은 시간의 추가와 melanogaster의 침략 1.16의 생물학의 연구에 중요한 모델 시스템으로 떠오르고있다. 남성과 여성의 파리의 동성 쌍 사이의 싸움의 분석은 침략가 통계적으로 신뢰할 수있는 방식으로 1,17의 다른 하나의 전환에 박힌 행동 패턴을 포함 것을 보여 주었다. 다른 사람이 싸움에서 관찰하는 동안 관찰 된 행동 패턴 중 일부는 성 특정남녀 모두의. 남성 싸움은 분명 &#39;승자&#39;와 &#39;패자&#39;와 지배 관계의 형성에 여성 싸우면 결과보다 더 높은 강도의 레벨로 이동합니다. 현재, 많은 실험실은 생화학 (18), 신경 7,19-21, 침략의 유전 (22) 토대 조사를 시작했습니다. 불행하게도, 연구의 메타 분석으로 인해 서로 다른 실험실에서 실험 절차의 다양성의 사용 싸움 역학에 대한 통찰력과 형성과 지배 관계의 유지 보수 문제가를 얻을 수 있습니다. 본질적으로 문헌에 기재된 기술은 모두 경기장 밖으로 날아 전송 경기장으로 19,23,24 및 행동 실험 중에 3,4-들을 소개하는 파리의 취급 및 조작을 포함한다. 부드러운 흡입은 파리에게 3,4,23-25를 조작하는 가장 일반적인 방법이지만, 감기 또는 CO 2 마취는 심지어 P 불구하고, 9,26를 사용하는revious 연구는 이미 이러한 절차가 비행 행동 27, 28에 해로운 영향을 미칠 것으로보고있다. 적어도 24 시간의 기간은 동작 (29, 30)에 미치는 영향을 최소화하기 위해 임의의 마취제의 사용 후 권장된다. 파리는 이전 전투 경험에서 배우고 학습과 기억이 동반 아고 니스트 만남의 결과임을 시사, 새로운 상황에서 자신의 행동 패턴의 사용을 수정합니다. 그런 의미에서, 싸움은 이후의 만남 동안 점점 더 자주 사용 후 전략이 일 것을 배우고 날아간 조건화 학습 상황과 유사 비행. 지배 관계가 싸움 중에 설립 된 후 파리 승자는 점점 더와 패자가 갈수록를 lunging으로, 자신의 전투 전략을 변경합니다. 분리의 기간이 지난 후에, 이전 패자는 훨씬 더 복종하는 동작을 보여 순진한 플로리다와 결합 할 때 싸움 차 2를 잃을 가능성이 높다이거 또는 이전 수상자 3,4. 그러나, 파리 처리는 제외된다 실험 절차의 부재는 어렵다 &quot;패자&quot;효과의 상세한 연구를했다. 최근의 연구에서, 우리는 일상적으로 처리를 제거 새로운 절차와 행동 챔버에 파리를 소개하는 실험실 (흡인과 추위 마취)에 사용되는 두 개의 실험 절차를 비교했다. 결과는 저온 마취가 흡인보다 공격에 훨씬 더 큰 부정적인 영향을했지만, 심지어 열망은 파리에서 공격성의 수준을 감소 것을 보여 주었다. 포부는, 그러나, 침략을 함께 학습과 기억에 매우 심각한 영향을 야기했다. 두 실험 절차 (흡인없이 처리), 파리의 처리가 실험 절차 5,6에서 제거 될 때 강력한 &quot;패자&quot;효과 만 관찰과 동일한 프로토콜을 다음과 같습니다. 이상적으로, 라보에 초파리 침략의 연구ratories는 일반적으로 (탈출을 방어하기 위해 자원에 대한 경쟁, 영토와 공간) 야생에서 발생 날아 환경 상황을 포함해야한다. 또한, 실험 조건은 확실하게 유도 관찰 및 검사 하에서 동작을 해석하도록 최적화되어야한다 (동물의 취급을 최소화 마취제 CO (2)의 사용을 제한하고, 실험 방법을 표준화하려고). 대부분 또는 모든 이러한 문제를 해결하기위한 시도에서, 우리는 동안 행동 경기장에 도입 전후 파리의 처리를 없애 새로운 행동 장치를 설계 하였다. 이 장치로, 파리는 자신의 타고난 부정적인 geotaxis이 이동로와 싸움 챔버 밖으로 전송하는 데 사용합니다. (a) 개인 중 행동 변화를 감소; 파리의 취급을 제거함으로써, 프로토콜은 목표 파리는 상호 작용하고 맑은 우성 관계 (수컷)를 생성하는 (b) 필요한 시간을 감소; 및 (c) 안정적으로 충분히 강한 behavio을 유도RAL 변화는 &quot;패자&quot;효과의 형성을 허용합니다. 이 프로토콜은 새로운 실험 장치 및 단계 절차에 의해 단계 공격성을 분석하고 D.에 강한 &quot;패자&quot;효과의 형성을 허용하도록 설명 melanogaster의. 우리는이 행동 장치는 쉽게 초파리에 의해 전시 다른 사회적 행동의 연구에 적용 할 수 있습니다 기대합니다.

<table><tbody><tr><td>Drosophila melanogaster pupa</td><td>Bloomington Stock Center</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standard fly food</td><td></td><td></td><td>Fabricated in-house.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Behavioral chambers</td><td>Mike machine</td><td></td><td>Fabricated in-house. Directly&amp;nbsp; contact the compagny for more informations.</td></tr><tr><td>Borosilicate glass vials</td><td>VWR International&amp;nbsp;</td><td>47729-576</td><td>16 x 10 mm</td></tr><tr><td>Cotton</td><td>Fisherbrand</td><td>22-456-881</td><td>Any brand can be used</td></tr><tr><td>Pasteur pipettes</td><td>VWR International&amp;nbsp;</td><td>53300-567</td><td></td></tr><tr><td>Paintbrush&amp;nbsp;</td><td>Blick Art Material</td><td>06157-7030</td><td>Round , Size 3/0</td></tr><tr><td>Toothpick</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Any brand can be used</td></tr><tr><td>Acrylic paint (blue/white)</td><td>Blick Art Material</td><td>01637-5172/01637-1022</td><td>Any brand can be used</td></tr><tr><td>Dry active yeast</td><td>Sigma</td><td>YSC2-500G</td><td></td></tr><tr><td>Srew cap tube</td><td>VWR International&amp;nbsp;</td><td>10011-394&amp;nbsp;</td><td>15 mm diameter, 10 mm height</td></tr><tr><td>Eppendorf</td><td>VWR International&amp;nbsp;</td><td>22363212</td><td></td></tr><tr><td>Tape</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Any brand can be used</td></tr><tr><td>Plastic slices</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>70329-40</td><td>22 x 40 x 0.25 mm Thickness</td></tr><tr><td>Light source (bulb)</td><td>VWR International&amp;nbsp;</td><td>500003-418</td><td>Any brand can be used</td></tr><tr><td>Timer</td><td>VWR International&amp;nbsp;</td><td>62344-641</td><td>Any brand can be used</td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Percival</td><td></td><td>Directly contact the constructor for more informations.</td></tr><tr><td>Carbon Dioxide Dry (CO&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;)</td><td>Medical-Technical Gases, Inc</td><td>14H31</td><td></td></tr><tr><td>Binocular</td><td>Nikon</td><td>SMZ-745</td><td>Any brand can be used</td></tr><tr><td>Camera (SONY Handycam&amp;nbsp; HDR-CX330)</td><td>B&amp;amp;H</td><td>SOHDRCX330B</td><td>Any brand can be used</td></tr><tr><td>Computer</td><td></td><td></td><td>With a minimum of 1.4 Ghz Processor, running Microsoft Windows or Machintosh HD</td></tr><tr><td>ClipWrap</td><td>Download online</td><td></td><td>Any importing software can be used</td></tr><tr><td>QuickTime Player</td><td>Download online</td><td></td><td>Any reading software can be used</td></tr><tr><td>GraphPad Software</td><td>Online</td><td></td><td>Any statistical software can be used</td></tr></tbody></table>

a new approach that eliminates handling for studying aggression and the "loser" effect in drosophila melanogaster

초파리의 공격적인 행동은 전형적인 행동 패턴의 연속 식으로 구성된다 (분석 1 참조). 이 복잡​​한 동작은, 유전, 호르몬, 환경 적 요인에 의해 영향을 받는다. 많은 생물과 마찬가지로, 이전 전투 경험은 파리의 전투 전략과 이후 대회의 결과에 영향을 미친다 : 싸움을 잃고 가능성이 학습과 기억 2-4을 포함 &quot;패자&quot;효과를 공개, 나중에 경연을 잃을 확률이 높아집니다. 침략 같은 복잡한 사회적 행동의 발현을 함께 학습과 기억은, 동물 5,6의 처리 테스트 사전에 민감합니다. 많은 실험 절차는 그러나 침략 7-9, 파리의 처리는 현재 사용할 제외없이 일상적으로 사용되는 프로토콜을 연구하기 위해 다른 실험실에서 사용된다. 여기, 우리는 instea를 사용하여, 파리의 처리하지 않고 새로운 행동 장치를보고D 자신의 타고난 부정적인 geotactic 응답으로 또는 전투 실에서 동물을 이동합니다. 이 프로토콜에서는, 음식 컵을 포함하는 작은 원형의 싸​​움 경기장 전에 파리의 도입에 이동식 플라스틱 슬라이더에 의해 동일한 두 반으로 나누어집니다. 파리 챔버 문과 geotaxis 슬라이딩을 통해 자신의 집에 격리 병에서 챔버를 입력합니다. 플라스틱 슬라이더를 제거하여, 파리는 상호 작용하는 무료입니다. 지정된 기간 후, 파리 후속 실험에 대한 슬라이더로 다시 분리된다. 이 모든 개별 파리 처리없이 쉽게 이루어진다. 이 장치는 침략과 비행 싸움에서 &quot;패자&quot;효과의 형성을 포함한 관련 학습과 기억을 연구하는 새로운 접근 방식을 제공한다. 또한,이 새로운 행동 범용 장치는 파리의 다른 사회적 행동을 연구하기 위해 이용 될 수 있고, 일반적으로, 기본적인 행동 공정에서 경험 관련 변화를 조사하는 관심을 가져야한다.

이 섹션은 행동 챔버의 설계 및 공격성 ​​&quot;패자&quot;효과의 형성을 측정하는 상술 프로토콜에 따라 행동 실험의 전형적인 세트의 분석을 제시한다. 또한,이 장치를 이용하여 측정 될 수있는 다른 행동의 샘플은 그림. 도 6은 신규 장치의 개략도를 나타낸다. 장치는 세 개의 원통형 우물 구성되어 (크기 : 22.86 mm 직경 17 mm 높이) 전투 실 수 있습니다. 두 조각 ?...

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A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

과일 동안 행동 패턴은 역학 싸움, 관찰 및 관련 학습과 기억은 실험 조건에 의해 영향을 받는다, 싸움을 비행. 여기에 제시된 프로토콜은 전체 실험 기간 동안 파리의 처리를 제거하는 새로운 절차를 설명합니다. 이 싸움 역학을 개선하고 강력한 &quot;패자&quot;효과의 형성을 할 수 있습니다.

침략 유학을위한 처리 제거하는 새로운 접근하고 &quot;낙오자&quot;효과<em&gt; 초파리</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

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Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

9.5K 조회수.  Harvard Medical School.  과일 동안 행동 패턴은 역학 싸움, 관찰 및 관련 학습과 기억은 실험 조건에 의해 영향을 받는다, 싸움을 비행. 여기에 제시된 프로토콜은 전체 실험 기간 동안 파리의 처리를 제거하는 새로운 절차를 설명합니다. 이 싸움 역학을 개선하고 강력한 "패자"효과의 형성을 할 수 있습니다. 

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Studying Aggression in Drosophila (fruit flies)

Aggression is an innate behavior that evolved in the framework of defending or obtaining resources. This complex social behavior is influenced by genetic, hormonal and environmental factors. In many organisms, aggression is critical to survival but controlling and suppressing aggression in distinct contexts also has become increasingly important. In recent years, invertebrates have become increasingly useful as model systems for investigating the genetic and systems biological basis of complex social behavior. This is in part due to the diverse repertoire of behaviors exhibited by these organisms. In the accompanying video, we outline a method for analyzing aggression in Drosophila whose design encompasses important eco-ethological constraints. Details include steps for: making a fighting chamber; isolating and painting flies; adding flies to the fight chamber; and video taping fights. This approach is currently being used to identify candidate genes important in aggression and in elaborating the neuronal circuitry that underlies the output of aggression and other social behaviors.

Studying Aggression in Drosophila fruit flies

(과일 파리) Drosophila의 침략을 유학

Aggression is an innate behavior that evolved in the framework of defending or obtaining resources.  This complex social behavior is influenced by ...

연구

생물학

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

In the following we describe the methodological details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with genetic interference, provides a handle to analyze the neuronal and molecular fundamentals of specifically associative learning in a simple larval brain.
Organisms can use past experience to adjust present behavior. Such acquisition of behavioral potential can be defined as learning, and the physical bases of these potentials as memory traces1-4. Neuroscientists try to understand how these processes are organized in terms of molecular and neuronal changes in the brain by using a variety of methods in model organisms ranging from insects to vertebrates5,6. For such endeavors it is helpful to use model systems that are simple and experimentally accessible. The Drosophila larva has turned out to satisfy these demands based on the availability of robust behavioral assays, the existence of a variety of transgenic techniques and the elementary organization of the nervous system comprising only about 10,000 neurons (albeit with some concessions: cognitive limitations, few behavioral options, and richness of experience questionable)7-10.
Drosophila larvae can form associations between odors and appetitive gustatory reinforcement like sugar11-14. In a standard assay, established in the lab of B. Gerber, animals receive a two-odor reciprocal training: A first group of larvae is exposed to an odor A together with a gustatory reinforcer (sugar reward) and is subsequently exposed to an odor B without reinforcement 9. Meanwhile a second group of larvae receives reciprocal training while experiencing odor A without reinforcement and subsequently being exposed to odor B with reinforcement (sugar reward). In the following both groups are tested for their preference between the two odors. Relatively higher preferences for the rewarded odor reflect associative learning - presented as a performance index (PI). The conclusion regarding the associative nature of the performance index is compelling, because apart from the contingency between odors and tastants, other parameters, such as odor and reward exposure, passage of time and handling do not differ between the two groups9.

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

Drosophila larvae are able to associate odor stimuli with gustatory reward. Here we describe a simple behavioral paradigm that allows the analysis of appetitive associative olfactory learning.

에 Appetitive 연관 강한 학습<em&gt; Drosophila</em&gt; 애벌레

In the following we describe the methodological  details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with ...

신경과학

Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning

This protocol describes a new paradigm for analyzing aversive associative learning in adult flies (Drosophila melanogaster). The paradigm is analogous to passive avoidance behavior in laboratory rodents in which animals learn to avoid a compartment where they have previously received an electric shock. The assay takes advantage of negative geotaxis in flies, which manifests as an urge to climb up when they are placed on a vertical surface. The setup consists of vertically oriented upper and lower compartments. On the first trial, a fly is placed into a lower compartment from where it usually exits&#160;within 3-15 s, and steps into the upper compartment where it receives an electric shock. During the second trial, 24 h later, the latency is significantly increased. At the same time, the number of shocks is decreased compared to the first trial, indicating that flies formed long-term memory about the upper compartment. The recordings of latencies and number of shocks could be performed with a tally counter and a stopwatch or with an Arduino-based simple device. To illustrate how the assay can be used, the passive avoidance behavior of D. melanogaster and D. simulans male and female were characterized here. Comparison of latencies and number of shocks revealed that both D. melanogaster and D. simulans flies efficiently learned the passive avoidance behavior. No statistical differences were observed between male and female flies. However, males were a little faster while entering the upper compartment on the first trial, while females received a slightly higher number of shocks in every retention trial. The Western diet (WD) significantly impaired learning and memory in male flies while flight exercise counterbalanced this effect. Taken together, the passive avoidance behavior in flies offers a simple and reproducible assay that could be used for studying basic mechanisms of learning and memory.

Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning

This work describes a simple behavioral paradigm that allows the analysis of aversive associative learning in adult fruit flies. The method is based on suppressing the innate negative geotaxis behavior due to the association formed between a specific environmental context and an electric shock.

초파리 연관적 역경 학습을 연구하는 새로운 패러다임으로서의 수동적인 회피 행동

This protocol describes a new paradigm for analyzing aversive associative learning in adult flies (Drosophila melanogaster). The paradigm is analogous to ...

행동분석학

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by stressed conspecifics due to an odorant released during stress known as the Drosophila stress odorant (dSO). Through the use of the T-maze apparatus, one can quantify the avoidance of the dSO by responder flies in a very affordable and robust assay. Conditions necessary to obtain a strong performance are presented here. A stressful experience is necessary for the flies to emit dSO, as well as enough emitter flies to cause a robust avoidance response to the presence of dSO. Genetic background, but not their group size, strongly altered the avoidance of the dSO by the responder flies. Canton-S and Elwood display a higher performance in avoiding the dSO than Oregon and Samarkand strains. This behavioral assay will allow identification of mechanisms underlying this social behavior, and the assessment of the influence of genes and environmental conditions on both emission and avoidance of the dSO. Such an assay can be included in batteries of simple diagnostic tests used to identify social deficiencies of mutants or environmental conditions of interest.

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

사회 회피의 정량화에 대한 간단한 분석<em&gt; 초파리</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. When selecting sites to deposit their eggs, female flies are capable of ranking the relative attractiveness of their options and choosing the &#34;greater of two goods.&#34; However, most egg-laying preference assays are not practical if one wants to take a systematic genetic screening approach to search for the circuit basis underlying this simple decision-making process, as they are population-based and laborious to set up. To increase the throughput of studying of egg-laying preferences of single females, we developed custom chambers that each can simultaneously assay egg-laying preferences of up to thirty individual flies as well as a protocol that ensures each female has a high egg-laying rate (so that their preference is readily discernable and more convincing). Our approach is simple to execute and produces very consistent results. Additionally, these chambers can be equipped with different attachments to allow video recording the egg-laying animals and to deliver light for optogenetics studies. This article provides the blueprints for fabricating these chambers and the procedure for preparing the flies to be assayed in these chambers.

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

This protocol describes a high throughput assay for testing egg-laying preferences of Drosophila melanogaster at single-animal resolution. This assay provides a simple, efficient, and scalable platform to identify genes and circuit components that control a simple decision-making process.

높은 처리량 분석은 개인의 알을 낳는 환경 설정을 검사합니다<em&gt; 노랑 초파리</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

사용 보상 추구 행동의 변화를 측정하는 간단한 방법<em&gt; 노랑 초파리</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

Many insights into the molecular mechanisms underlying learning and memory have been elucidated through the use of simple behavioral assays in model organisms such as the fruit fly, Drosophila melanogaster. Drosophila is useful for understanding the basic neurobiology underlying cognitive deficits resulting from mutations in genes associated with human cognitive disorders, such as intellectual disability (ID) and autism. This work describes a methodology for testing learning and memory using a classic paradigm in Drosophila known as courtship conditioning. Male flies court females using a distinct pattern of easily recognizable behaviors. Premated females are not receptive to mating and will reject the male&#39;s copulation attempts. In response to this rejection, male flies reduce their courtship behavior. This learned reduction in courtship behavior is measured over time, serving as an indicator of learning and memory. The basic numerical output of this assay is the courtship index (CI), which is defined as the percentage of time that a male spends courting during a 10 min interval. The learning index (LI) is the relative reduction of CI in flies that have been exposed to a premated female compared to na&#239;ve flies with no previous social encounters. For the statistical comparison of LIs between genotypes, a randomization test with bootstrapping is used. To illustrate how the assay can be used to address the role of a gene relating to learning and memory, the pan-neuronal knockdown of Dihydroxyacetone phosphate acyltransferase (Dhap-at) was characterized here. The human ortholog of Dhap-at, glyceronephosphate O-acyltransferase (GNPT), is involved in rhizomelic chondrodysplasia punctata type 2, an autosomal-recessive syndrome characterized by severe ID. Using the courtship conditioning assay, it was determined that Dhap-at is required for long-term memory, but not for short-term memory. This result serves as a basis for further investigation of the underlying molecular mechanisms.

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

This protocol describes a Drosophila learning and memory assay called courtship conditioning. This classic assay is based on a reduction of male courtship behavior after sexual rejection by a non-receptive premated female. This natural form of behavioral plasticity can be used to test learning, short-term memory, and long-term memory.

학습과 기억의 척도 로서의 Drosophila Courtship 컨디셔닝

Many insights into the molecular mechanisms underlying learning and memory have been elucidated through the use of simple behavioral assays in model ...

초파리 자폐 스펙트럼 장애의 유전 및 행동 특성에 대한 모델

Paradigms for Behavioral Assessment in Drosophila Model of Autism Spectrum Disorder

Autism Spectrum Disorder (ASD) encompasses a heterogeneous group of neurodevelopmental disorders with common behavioral symptoms including deficits in social interaction and ability for communication, enhanced restricted or repetitive behaviors, and also, in some cases, learning disability and motor deficit. Drosophila has served as an unparalleled model organism for modeling a great number of human diseases. As many genes have been implicated in ASD, fruit flies have emerged as a powerful and efficient way to test the genes putatively involved with the disorder. As hundreds of genes, with varied functional roles, are implicated in ASD, a single genetic fly model of ASD is unfeasible; instead, individual genetic mutants, gene knockdowns, or overexpression-based studies of the fly homologs of ASD-associated genes are the common means for gaining insight regarding molecular pathways underlying these gene products. A host of behavioral techniques are available in Drosophila which provide easy readout of deficits in specific behavioral components. Social space assay and aggression and courtship assays in flies have been shown to be useful in assessing defects in social interaction or communication. Grooming behavior in flies is an excellent readout of repetitive behavior. Habituation assay is used in flies to estimate the ability for habituation learning, which is found to be affected in some ASD patients. A combination of these behavioral paradigms can be utilized to make a thorough assessment of the human ASD-like disease state in flies. Using Fmr1 mutant flies, recapitulating Fragile-X syndrome in humans, and POGZ-homolog row knockdown in fly neurons, we have shown quantifiable deficits in social spacing, aggression, courtship behavior, grooming behavior, and habituation. These behavioral paradigms are demonstrated here in their simplest and straightforward forms with an assumption that it would facilitate their widespread use for research on ASD and other neurodevelopmental disorders in fly models.

저자 스포트라이트: 초파리의 자폐 스펙트럼 장애 증상 탐구 - 유전자 모델 및 행동 검사

Autism Spectrum Disorder (ASD) is associated with impaired social and communicative behavior and the emergence of repetitive behavior. For studying the interrelation between ASD genes and behavioral deficits in the Drosophila model, five behavioral paradigms are described in this paper for assaying social spacing, aggression, courtship, grooming, and habituation behavior.

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임

Autism Spectrum Disorder (ASD) encompasses a heterogeneous group of neurodevelopmental disorders with common behavioral symptoms including deficits in ...

침략 유학을위한 처리 제거하는 새로운 접근하고 "낙오자"효과

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(과일 파리) Drosophila의 침략을 유학

에 Appetitive 연관 강한 학습

초파리 연관적 역경 학습을 연구하는 새로운 패러다임으로서의 수동적인 회피 행동

사회 회피의 정량화에 대한 간단한 분석

높은 처리량 분석은 개인의 알을 낳는 환경 설정을 검사합니다

사용 보상 추구 행동의 변화를 측정하는 간단한 방법

학습과 기억의 척도 로서의 Drosophila Courtship 컨디셔닝

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임