成体マウス脳室下領域からの神経幹細胞の単離、増殖、およびヌクレオフェクション

私たちの研究は、成体哺乳類の脳内で神経幹細胞集団がどのように制御されているかを研究することに焦点を当てています。神経原性ニッチ内の神経幹細胞を調節する内因性および外因性の分子メカニズムを理解することは、生物学を理解し、将来の潜在的な治療応用を開発するために重要です。神経幹細胞の挙動を研究するために、in vivoおよびin vitroの両方のアプローチが広く使用されています。

In vitro神経幹細胞培養は、制御された環境を提供し、この細胞集団を容易に操作および監視する可能性を提供します。in vitroでの遺伝子発現保存技術は、細胞生物学を支配する分子メカニズムを研究するための汎用性の高いアプローチです。しかし、神経幹細胞の候補遺伝子を過剰発現させ、ノックダウンするための効率的で再現性の高い方法は、この分野ではまだ課題となっています。

遺伝子導入のための従来のトランスフェクション法は、中枢神経系細胞で有効であることが証明されています。さらに、これらの方法は細胞の生存率と機能に影響を与えます。したがって、神経幹細胞の遺伝子発現を操作するためには、代替アプローチの改良が重要です。

このプロトコルにより、成体マウス脳室下ゾーンからの神経幹細胞培養における遺伝子導入の高効率と、80%を超える生存率を達成する改良されたヌクレオフェクションシステムを紹介します