マルチプレックスデュアルレポーター法によるウイルス粒子上の表面タンパク質エピトープのプロファイリング

エンベロープウイルスのプロテオミクス解析により、新たに形成されたウイルスには宿主タンパク質が取り込まれ、複製、感染性、病因に影響を与えることが明らかになりました。私たちの研究は、ウイルス粒子中の表面タンパク質をプロファイリングして、ウイルスと宿主の相互作用の主要な要素を見つけ、抗ウイルス薬やワクチンの新たな標的を導き出すことに焦点を当てています。免疫電子顕微鏡は、タンパク質抑制剤ウイルスを直接可視化できる唯一のイメージング技術です。

しかし、質量分析、磁気ビーズによる免疫捕捉、および新しいフローバイオメトリーは、より広範なプロテオームプロファイリングを可能にし、多数のウイルス粒子をスクリーニングするために、現在より一般的に使用されています。私たちの方法では、色分けされたLuminexビーズと、免疫捕捉のためのデュアルレーザー読み出しを使用します。これにより、無傷のビリオン上の宿主表面タンパク質のマルチプレックスプロファイリングや、複数のウイルスや抗原に対する抗体や抗ウイルス薬の同時スクリーニングが可能になります。

質量分析とアフィニティープロテオミクスは、ビリオン表面上のウイルスタンパク質と宿主タンパク質の両方を同定するための強力なツールです。私たちが説明する戦略は、ウイルス粒子に対する宿主タンパク質の役割の理解を深めることにつながり、さまざまな実験セットアップで感染したサンプルのハイスループットプロファイリングが可能になります。