共焦点顕微鏡によるラット生体骨格筋線維のミトコンドリア密度と縦方向分布の解析

ミトコンドリアネットワークのリモデリングは、生理学的ストレスと病理学的状態で行われます。しかし、骨格筋におけるミトコンドリアリモデリングの効果は、まだ完全には解明されていません。このプロトコルはミトコンドリアの変更と細胞機能間の相互作用の私達の理解を高める生きている骨格筋のミトコンドリアの変更の定量化を可能にする。

生きた骨格筋での作業には、単離時の繊維の収縮や共焦点スキャン中の画像に対する感度が伴うため、課題があります。このプロトコルは、共焦点顕微鏡検査によるミトコンドリア評価のための生存筋線維の分析を可能にする、リラクゼーション溶液を使用した分離プロセスについて説明しています。私たちのプロトコルは、骨格筋線維のミトコンドリアネットワークを定量的に分析するためのワークフローの欠如に対処します。

ここで説明する手順により、ユーザーは、ミトコンドリアの密度と分布の定量化を達成するために、しきい値処理と高速フーリエ分析による画像処理を使用して、共焦点顕微鏡で得られた画像をより有効に活用できます。私たちは、骨格筋の変化、特に逆境時のミトコンドリアダイナミクスとミトコンドリア構造リモデリングの研究と、運動や中間絶食などの介入を通じてそれらをどのように調節できるかに興味を持っています。