Questo protocollo descrive un metodo per esaminare la gerarchia sociale in un modello di ratto. Tutti i ratti eseguono un complesso compito di immersione per il cibo in cui formano una gerarchia distinta in base alla volontà di immergersi sott'acqua e nuotare per ottenere un pellet alimentare. Questo metodo viene utilizzato per comprendere il processo decisionale e la relazione sociale tra animali altamente sociali in piccoli gruppi.
Selezionare ratti maschi adulti Sprague Dawley del peso di 300-350 grammi. Fornire chow di ratto e acqua ad libitum. Esegui tutti gli esperimenti tra le 6:00 e le 12:00.
Mantenere i ratti a temperatura ambiente di 22 gradi Celsius con 12 ore di luce e cicli scuri di 12 ore. Una sequenza temporale del protocollo sperimentale. Selezionare casualmente 120 ratti in uno dei tre gruppi sperimentali.
Il primo gruppo, N è uguale a 60, verrà utilizzato come gruppo di controllo. Il secondo gruppo, N è uguale a 30, sarà indotto con depressione. Anche il terzo gruppo, N è uguale a 30, sarà indotto con depressione e sarà successivamente trattato con farmaci antidepressivi.
Alcuni test di preferenza incrociata eseguiti prima e dopo l'induzione di stress cronico imprevedibile e dopo complesse immersioni per attività alimentari. I seguenti fattori di stress sono introdotti in ordine casuale. Alloggi di gruppo posizionando sei ratti per gabbia per 18 ore.
Posizionamento della gabbia inclinata per tre ore 45 gradi lungo l'asse verticale. Privazione di cibo per 18 ore. Depravazione dell'acqua per 18 ore seguita da esposizione immediata a una bottiglia d'acqua vuota.
Posizionamento morbido della gabbia per otto ore composto da 300 millilitri di acqua versati nella biancheria da letto. Illuminazione continua e ciclo scuro inverso per 48 ore a settimana E ambiente caldo di cinque minuti a 40 gradi Celsius. I ratti sono esposti a due dei sette fattori di stress al giorno in ordine casuale.
Uno di giorno e il secondo di notte per cinque settimane sequenziali. Ai ratti del terzo gruppo viene somministrato un trattamento antidepressivo con amicrom hydrofloride, antidepressivo triciclico 20 milligrammi per chilo intraperitonealmente una volta al giorno per tre settimane. Il secondo gruppo del gruppo di controllo viene somministrato 0,9% placebo salino intraperitonealmente una volta al giorno per tre settimane allo stesso volume del gruppo di trattamento antidepressivo.
Preparare l'apparecchio e acclimatare i ratti. Collega due gabbie 50 su 50 su 50 centimetri a un acquario 130 su 35 su 50 centimetri tramite tunnel. Posizionare tubi con pellet di cibo, un pellet alimentare in ogni tubo ad un'estremità dell'acquario.
Contrassegnare tutti e sei i ratti con marcatori colorati diversi all'inizio dell'esperimento per consentire l'identificazione individuale. In un dato momento, sei ratti hanno partecipato agli esperimenti contemporaneamente. Tre di loro servivano come gruppo di controllo uno e gli altri tre erano depressivi del gruppo due, o depressivi dopo il trattamento, gruppo tre.
Il primo giorno dell'esperimento, introdurre ogni gruppo di ratti ad apparecchi sperimentali senza acqua per tre ore di sessione. Riportare i ratti nella gabbia standard dopo la sessione. Registrare continuamente ratti nell'apparecchio durante la sessione di tre ore.
Ripetere queste sessioni per i giorni due e tre. Nei giorni quattro fino a 17, aggiungere progressivamente acqua fino al raggiungere il livello massimo dell'acqua. Il giorno 17 fino al 21, mantenere il livello massimo dell'acqua.
Osserva i ratti che si tuffano per accedere ai pellet. Registrare i parametri seguenti. Frequenza delle entrate nel tunnel, immersioni per il cibo, cibo ottenuto per attacco, cibo ottenuto trasportando e tempo trascorso in gabbie separate.
Durante il ciclo buio posizionare i ratti in gabbie individuali nella stessa stanza dell'alloggiamento. Posizionare una bottiglia di 100 millilitri 1% di peso volumi soluzione di saccarosio in ogni gabbia per 24 ore e consentire l'adattamento. Rimuovere le bottiglie e privare i ratti di cibo e acqua per 12 ore.
Posizionare due bottiglie, una contenente 100 millilitri di soluzione di saccarosio, un volume di peso dell'1% e l'altra 100 millilitri di acqua del rubinetto in ogni caso per quattro ore. Registrare il volume in millilitri sia della soluzione di saccarosio consumata che dell'acqua e calcolare la loro affinità con la preferenza per il saccarosio come segue. La preferenza per il saccarosio in percentuale equivale al consumo di saccarosio in millilitri, diviso per consumo di saccarosio e millilitri più il consumo di acqua in millilitri.
Tutti i tempi 100%Cambiamenti di peso corporeo Un test Nova uni modi non ha mostrato differenze nei cambiamenti nel peso corporeo tra gruppi sperimentali per i 21 giorni del complesso diving for food task. Da giorni a due a 21, ci sono stati cambiamenti nel peso corporeo per tutti e tre i gruppi, il valore p era inferiore a 0,01. I ratti con sintomi depressivi simili erano più attivi e aggressivi dei ratti di controllo.
I ratti indotti dal comportamento aggressivo della luce hanno mostrato un aumento delle entrate nel tunnel 130% più meno 3,7 p valore inferiore a 0,01. Immersioni per il cibo 141% più meno sette, valore p inferiore a 0,01. Cibo ottenuto da un accoppiamento, 168% più meno 12, valore p inferiore a 0,01.
Tempo trascorso in gabbie separate 123% più meno 7,9, valore p inferiore a 0,01 e cibo ottenuto per attacco, 232% più meno 26, valore p inferiore a 0,01. Rispetto ai ratti depressivi che hanno ricevuto la terapia antidepressiva, 67% più meno 3,4, 54% più meno cinque, 53% più meno sei, 55% più meno 4,7, 44% più meno sette rispettivamente. Le differenze che i ratti hanno indotto con sintomi depressivi simili e ratti depressi trattati con antidepressivo erano statisticamente maggiori delle differenze tra i ratti indotti con sintomi depressivi simili e il gruppo di controllo in tutti e cinque i parametri del complesso diving per le prove alimentari, valore p inferiore a 0,05.
All'inizio dell'esperimento non vi era alcuna differenza nel consumo di saccarosio. Al giorno 35 dell'esperimento, il valore p del gruppo depressione era inferiore a 0,01. E il gruppo depressionario trattato con terapia antidepressiva, valore p inferiore a 0,01 aveva una percentuale significativamente inferiore di preferenza per il saccarosio rispetto al gruppo di controllo.
Il giorno 62, i ratti indotti con sintomi depressivi simili avevano una percentuale inferiore di preferenza rispetto al gruppo di controllo e depressione trattato con trattamento antidepressivo, p valutato meno di 0,05.Conclusione. La complessa immersione per il compito alimentare può permetterci di valutare la relazione tra l'ampia gamma di malattie mentali e organizzazione sociale, nonché di studiare l'efficacia della terapia e della disfunzione sociale. La ringrazio molto per l'attenzione.
