L'obiettivo generale di questa procedura è quello di impiantare tag acustici in miniatura all'interno delle cavità corporee della lampreda giovanile del Pacifico e dell'anguilla americana e di monitorarne il comportamento e gli effetti fisici dopo il processo di tagging. Numerosi studi sono stati condotti per comprendere la sopravvivenza, il comportamento e i movimenti dei pesci vicino alle strutture fluviali, come le dighe idroelettriche, che possono impedire rotte migratorie a monte o a valle. Per aiutare a soddisfare questa esigenza continua e di utilizzo, Pacific Northwest National Lab ha sviluppato un nuovo tag acustico in miniatura appositamente progettato per l'uso in lampreda giovanile e anguille chiamate lamprey e etichetta di anguilla.
Questo metodo identifica i protocolli per l'utilizzo di dosi accettabili, la manipolazione di pesci senza lesioni o l'annullamento dello stress e l'identificazione della posizione ottimale in cui è possibile impiantare le etichette. Il vantaggio principale di questa tecnica di tagging è la velocità del processo, perché non sono richieste suture. La posizione del tag all'interno della cavità corporea riduce al minimo lo stress fisiologico, promuove la ritenzione di tag e non causa effetti dannosi alla capacità o al comportamento di nuoto dei pesci.
Per iniziare, preparare i tag per l'impianto disinfettandoli. Posizionare i tag in una soluzione di etanolo al 70% a partire da 20 minuti. Quindi rimuovere le etichette usando una pinzetta di plastica e posizionare in un piccolo piatto di vetro contenente acqua sterile.
Quindi, rimuovere i tag e posizionare in una tazza di pillola sterile. Il passo successivo prevede la preparazione del bagno anestetico che consente di maneggiare e etichettare il pesce. In una piccola tazza di plastica, pesare 40 grammi di tricaina.
Sciogliere la polvere in un bicchiere da 500 millilitri di acqua del rubinetto su una piastra di agitazione e una barra del miscelatore. Quindi trasferire in una bottiglia di plastica da 500 millilitri per ottenere una soluzione stock da 80 grammi per litro. Ripetere la stessa procedura con bicarbonato di sodio e aggiungere a una bottiglia separata da 500 millilitri.
Riempire una vasca di plastica da 10 litri con cinque litri di acqua dalla stessa fonte del pesce da etichettare. Aggiungere 6,25 millilitri di soluzione di tricaina e bicarbonato di sodio da 6,25 millilitri, utilizzando un misuratore di versamento attaccato alla parte superiore delle bottiglie da 500 millilitri. Ciò si traduce in una dose di 100 milligrammi per litro alla vasca.
Il bicarbonato di sodio viene aggiunto ad una dose uguale alla tricaina per mantenere il pH bilanciato, perché la tricaina è acida. Mescolare per mescolare accuratamente la soluzione, nella vasca, e avere un coperchio disponibile per coprire la vasca per garantire che la lampreda non fuorielo mentre si trova nella soluzione anestetica. Questo completa la preparazione della soluzione anestetica.
Posizionare una singola lampreda nel bagno anestetico, utilizzando una piccola rete da immersione. Attendere da quattro a cinque minuti perché la lampreda diventi completamente smobilitata e smetta di nuotare, pur mantenendo un movimento branchiali lento ma costante. Utilizzare una rete da immersione per rimuovere la lampreda.
Prendi la misurazione della lunghezza e del peso e registra il codice di identificazione univoco del tag acustico. Nel frattempo, preparare un cuscinetto di schiuma a celle chiuse dello spessore di 1,3 centimetri, prima saturo d'acqua, e poi 150 microlitri per litro di soluzione di rivestimento protettivo. Il rivestimento aiuta a contrastare l'interruzione delle mucose durante la procedura chirurgica.
Posizionare il lato ventrale della lampreda verso l'alto sulla schiuma preparata. Posizionare una piccola sezione di tubi in modo che una fornitura regolata di acqua da un serbatoio d'acqua elevato fluisca attraverso la regione della bocca della lampreda. Ciò consente la respirazione mentre il pesce è sottoposto a impianto di tag.
Successivamente, individuare dove deve essere effettuata l'incisione, circa 20 millimetri posteriore ai pori branchiali sul lato laterale sinistro o destro. Un righello può essere utilizzato per riferimento o marcatori posizionati sul cuscinetto di schiuma. Utilizzando un bisturi microchirurgico sterile da 3,0 millimetri con una lama di 15 gradi, fare con cura un'apertura da 2,5 a tre millimetri nella direzione laterale, assicurando che il bisturi tagli appena attraverso la parete interna della pelle.
Quindi posizionare con cura l'etichetta disinfettata anteriormente nella cavità corporea, a mano. Applicare una leggera pressione sul sito di tagging per assicurarsi che l'etichetta si sia spostata nella cavità del corpo. Quindi, posizionare la lampreda etichettata in un secchio di recupero, contenente l'approvvigionamento di acqua dolce del fiume con un tubo della pompa di ossigeno e pietra d'aria.
Assicurarsi che la lampreda si sia ripresa dall'anestetico e trasferire al serbatoio di tenuta per uno studio futuro. Segui gli stessi passaggi per taggare l'anguilla americana in fase gialla con queste differenze. Per ottenere un'intensità di dose di 240 milligrammi per litro, utilizzare la soluzione anestetica precedentemente descritta di 80 grammi per litro di tricaina e bicarbonato di sodio.
Aggiungere 15 millilitri di ciascuno al bagno d'acqua da cinque litri. L'incisione deve essere fatta 25 millimetri alla base della pinna pettorale sul lato laterale sinistro o destro o circa 1/3 della lunghezza totale dell'anguilla. Assicurarsi che i pesci nuotano normalmente nel contenitore di recupero.
Questa figura illustra la durata dell'impingement in un tubo di nuoto a velocità costante dell'acqua per i quattro gruppi di dimensioni testati, da 120 a 160 millimetri. I risultati non mostrano alcuna differenza statistica tra i gruppi di controllo con tag e senza tag. Questa figura illustra la velocità critica di nuoto nella lunghezza del corpo al secondo per i test condotti in una camera da bagno.
I gruppi di dimensioni vanno da 111 a 120 a 161 a 175 millimetri. I risultati mostrano che non vi è alcuna differenza statistica tra i gruppi di controllo con tag e non taggati. Questa figura mostra la velocità mediana di nuoto nelle lunghezze del corpo al secondo per tutti i gruppi di dimensioni testati.
Le velocità erano di 4,12 lunghezze del corpo al secondo per taggate e 3,88 per il gruppo di controllo. Anche in questo caso, non vi è alcuna differenza statistica tra i gruppi taggati e di controllo. I risultati di questi studi di laboratorio dimostrano che la procedura di etichettatura e gli effetti di etichettatura non hanno impatti negativi sulla sopravvivenza dei pesci o sulla capacità di nuoto.
La procedura di impianto delle etichette è stata efficace nel posizionare i tag nella cavità corporea senza causare emorragie o infezioni significative nel sito di tagging. La durata del processo di tagging, inferiore a 60 secondi, è utile in quanto riduce lo stress associato all'anestetizza del pesce. Questi risultati caratterizzano un nuovo strumento per la ricerca sulla lampreda giovanile e sul passaggio dell'anguilla e possono essere utilizzati in studi futuri.
Questa tecnologia consentirà ai ricercatori di tracciare i movimenti della lampreda e dell'anguilla all'interno dei sistemi fluviali mentre si avvicinano a dighe idroelettriche o altre strutture che potrebbero impedire il passaggio dei pesci. A loro volta, i risultati possono informare meglio le decisioni di gestione per aiutare a conservare queste specie durante le loro fasi di vita giovanile.
