המעבדה שלנו מוקדשת ליישום נקודתי של טכנולוגיות מבוססות אולטרסאונד לחקר תפקוד המוח וטיפול בהפרעות מוחיות. המחקר הנוכחי שלנו סובב בעיקר סביב שתי שגיאות מרכזיות: הדמיית אולטרסאונד תפקודית ונוירומודולציה ממוקדת של אולטרסאונד. התמקדות בנוירומודולציה של אולטרסאונד נחשבת לגישה פוטנציאלית להתערבות מוחית בבני אדם, אולם המנגנונים שלה אינם ברורים.
לאחרונה, השילוב של אופטומטריית סיבים והתמקדות בנוירומודולציה של אולטרסאונד אושר כשימושי לפרמטרים יעילים למסך לוויסות סוגי נוירולוגיים ספציפיים באזורים שונים הניתנים לפיתוח. פרוטוקול זה נועד את שני החוקרים לזהות נוירואקטיביות מווסתת אולטרסאונד בעכברים הנעים בחופשיות ללא הרדמה או קיבוע מסגרת סטריאוטקטית על ידי שימוש בטכנולוגיית אופטומטריית סיבים זעיר פולשנית כדי ללכוד דינמיקה של סידן כמדד לנוירואקטיביות מתחת לשתל. זה מפחית את ההשפעות המבלבלות הפוטנציאליות של רטט צליל התרבות של הגשושית עצמה.
פרוטוקול זה מתאים לחקר תפיסה, קואורדינציה והתנהגות. זה מאפשר לחקור אנזימים תואמים מעורבים של נוירומודולציה אולטרסאונד ופיתוח אתרי פרמטרים חדשים לטיפול בהפרעות מוחיות. כדי להתחיל, הכינו צלחת פיזואלקטרית.
בעזרת משחת כסף אפוקסי, חבר את החוט לשני צידי הצלחת הפיזואלקטרית. לאחר שמשחת האפוקסי התמצקה, השתמש במולטימטר כדי למדוד את ההתנגדות בשני קצוות החוט כדי להבטיח שהיא בערך אפס. לאחר מכן מרחו שכבה של סרט דו צדדי על משטח יריעת זכוכית נקי.
הדביקו היטב את הצלחת הפיזואלקטרית וטבעת הנחושת ליריעת הזכוכית. הכנס היטב את צינור הפוליפרופילן בקוטר חיצוני של שלושה מילימטרים למרכז הצלחת הפיזואלקטרית והצמיד אותו היטב ליריעת הזכוכית. כעת, שואב את דבק שרף האפוקסי המוכן.
בעזרת מזרק חד פעמי מחלצים את האפוקסי ומזריקים אותו לאט לתוך טבעת הנחושת. בעזרת מלחם אלקטרוני, הלחמו את הקצוות הרופפים של שני חוטים על מחבר אגוז הכידון. לאחר הסרת יריעת הזכוכית, יש לנקות את פני המתמר באלכוהול.
כדי להתחיל, הנח את ההידרופון והמתמר במיכל מים מלא במים נטולי יונים. גלה שדה מקסימלי במישור המוקד באמצעות סריקה דו-ממדית. לאחר מכן זהה מקסימום שדה במישור אחר עם מקסימום ברור.
לאחר השוואת קואורדינטות X ו-Y של שני המקסימום, התאם את המיקום והכיוון של המתמר במידת הצורך. כוונן את קצה ההידרופון כך שיהיה מילימטר אחד ממשטח המתמר, ומקם אותו באמצע הקצה הימני. לאחר מכן הפעל את תוכנית הסריקה כדי ללכוד את השדה האקוסטי החופשי במישור ה-XC.
הזז את ההידרופון לאורך ציר ה-Z כדי לקבוע את העומקים הקשורים ללחץ השיא המרחבי. לאחר מכן, העבר את ההידרופון לפינה הימנית התחתונה של המתמר במישור XY. הפעל והפעל את תוכנית הסריקה כדי ללכוד את השדה האקוסטי החופשי במישור XY.
לאחר הנחת המתמר על גולגולת העכבר המוכן, רכוש את ה-XC בשדה האקוסטי הטרנס-גולגולתי של מישור XY באמצעות סריקת הידרופון. קרא את אמפליטודות הלחץ. קרא את מידות המוקד ב-3 דציבלים ואת המיקום במישורי XY ו-XC בתוך השדה האקוסטי הטרנס-גולגולתי, דווח על פרמטרי תזמון הדופק, כולל Amax, משך הדופק, מרווח חזרת הדופק, משך רכבת הדופק והמעטפת.
כדי להתחיל, השתמש בפיידר כדי לקצץ את השיער על ראשה של החיה המורדמת ולחטא את האזור עם 70% אתנול ופובידון יוד. הנח את העכבר במצב נוטה על המסגרת הסטריאוטקסית. בצע חתך לאורך התפר הסגיטלי, החל מהעצם העורפית ועד לתחילת עצם האף.
לאחר הסרת העור המכסה את ההמיספרות, השתמש במי מלח סטריליים כדי לנקות את הגולגולת ולחסל את כל הפריאוסטאום שנותר. בעזרת צמר גפן, מרחו מי חמצן 3% על הגולגולת החשופה למשך כשתיים עד שלוש שניות ליצירת מיקרו-נקבוביות. לאחר מכן, יש לשטוף היטב במי מלח סטריליים ולוודא שהאזור יבש לחלוטין.
לאחר מכן, צור קרניוטומיה של חור בקוטר 0.6 מילימטר. שטפו את כל הפסולת במי מלח סטריליים. הכנס את טבעת הסיבים האופטיים למחזיק הבדיקה וחבר אותו לזרוע הסטריאוטקסית.
השתמש בזרוע הסטריאוטקסית כדי ליישר את השתל ישירות מעל אזור העניין ולהכניס אותו לאזור העניין. כעת השתמש בקיסם סטרילי כדי לפזר שכבה דקה של צמנט דנטלי מוכן על הגולגולת ועל החלק התחתון של השתל. נתק בזהירות את מחזיק הבדיקה.
הכינו צינור פוליפרופילן וחתכו אותו לאורכו. בעזרת פינצטה, חבר את הצינור לתחתית השתל. לאחר ששפכו את אבקת המלט הדנטלי לתוך הצינור, הוסיפו את הנוזל הנדרש ואפשרו מספר דקות להתמצקות המלט הדנטלי.
אתר את פתח הצינור והדק אותו בזהירות כדי להסיר אותו באמצעות פינצטה. לאחר הכנת תערובת המלט הדנטלי למריחה, יש להקפיד על פיזור שכבה אחידה ודקה על פני הגולגולת. לאחר מכן קדחו שלושה חורים בטבעת המודפסת בתלת מימד.
אבטח את הברגים לחורים שלהם. הכנס את החלק העליון של השתל לתוך החור של המתמר המיוצר מראש. ודא שהדופן הפנימית של הטבעת המודפסת בתלת מימד חלקה.
לאחר מכן הנח אותו סביב המתמר הממוקם על גולגולת העכבר. מרחו מלט דנטלי על הצומת שבין הטבעת לגולגולת. לאחר מכן המתן מספר דקות עד שהמלט הדנטלי יתמצק.
הסר בזהירות את המתמר והדק היטב את הברגים. לאחר מיקום העכבר המורדם על המסגרת הסטריאוטקסית, נקה את המשטח העליון של השתל באלכוהול. הזרקת מים וחומר צימוד לחלל שבין השתל לטבעת המודפסת בתלת מימד.
הכנס את כבל תיקון הסיב האופטי למרכז המתמר המוכן. לאחר מכן חבר את השתל לכבל תיקון הסיבים האופטיים. הכנס בזהירות את המתמר לאזור.
לאחר מכן, הנח את העכבר בשדה פתוח ואפשר לו להתעורר. חבר את המתמר למערכת העירור האולטראסוני וחבר את כבל תיקון הסיבים האופטיים למערכת הקלטת הסיבים האופטיים. הפעל גם את מכשיר העירור האולטראסוני וגם את מערכת הקלטת הסיבים האופטיים.
אותות הסיבים האופטיים נרשמו תחת נוירומודולציה אולטרסאונד ממוקדת כאשר המעטפות מרובעות וסינוסואידיות בהתאמה. האות המרובע נמשך 300 אלפיות השנייה, בעוד שהאות הסינוסואידלי הרציף נמשך 471 אלפיות השנייה.