השראת דלקת חניכיים באמצעות שילוב של ליגטורה והזרקת ליפופוליסכריד במודל חולדה

זהו מודל חולדה של דלקת חניכיים ניסיונית, המבוסס על טכניקות של זריקות ליפופוליסכריד בשילוב עם מיקום רצועות, ומציע שיטה יעילה לחקר התקדמות המחלה ולהערכת טיפולים לדלקת חניכיים. שילוב שתי הטכניקות עם שיטות בודדות מגיע לשיאו בהשראת מחלה מהירה, הגברת התגובה הדלקתית ההרסנית והגדלת אובדן רקמת החיבור וספיגת עצם הנאדית. שיטה זו מספקת הזדמנות חשובה להעריך את ההשפעה של טיפולי פריודונטיטיס.

הדגמת ההליך תהיה ד"ר אוסקר וילה, PhD. התחל על ידי עיקור כל כלי הניתוח לפני הניתוח. הכינו תערובת של קטמין וקסילזין על ידי ערבוב של 1.6 מיליליטר קטמין עם מיליליטר אחד של קסילזין, מדולל ב-PBS או מלוחים, ואחסנו את המלאי בארבע מעלות צלזיוס.

לדלל atipamezole לריכוז סופי של 0.25 מיליגרם למיליליטר ו buprenorphine לריכוז סופי של 0.03 מיליגרם למיליליטר PBS או מלוחים, ולאחסן את המלאי בארבע מעלות צלזיוס. הכינו מיליליטר אחד של PG-LPS במי מלח סטריליים ואחסנו את המלאי בטמפרטורה של מינוס 20 מעלות צלזיוס. השתמשו בחולדות וויסטאר נקבות וזכרים לצורך הניסוי.

שמרו על בעלי החיים בקבוצות תחת הסביבה המתאימה, עם מזון ומים סטנדרטיים המוצעים אד ליביטום. לאחר שהחולדה מורדמת, הניחו את החיה על גבה על משטח כירורגי מחומם. לכסות את הגוף של החיה במהלך ההליך כדי למנוע אובדן חום.

מתן 100% חמצן באמצעות חרוט אף קטן, ולפקח על קצב הדופק וריווי החמצן על ידי אוקסימטריה הדופק. כעת, פתחו את פי החולדה באמצעות פה אלומיניום סביב החותכות. משכו את הלשון באמצעותה וייצבו את המקסילה והלסת התחתונה בתנוחת עבודה פתוחה ונוחה, המאפשרת גישה לטוחנות מנדיבולאריות.

יש לאסוף GCF באמצעות ארבע נקודות נייר סופגות מספר 30, על ידי הכנסתו לנקיק החניכיים סביב המזיופלטל של M1 עד להתנגדות קלה. שמור את נקודת הנייר באותו מיקום למשך 30 שניות לפני ההסרה המיידית. לאחר האיסוף, מעבירים את נקודת הנייר מיד לבקבוקון פלסטיק ומאחסנים בטמפרטורה של מינוס 80 מעלות צלזיוס עד לביצועי הבדיקה.

מקמו את הזנב הדיסטלי של התפר בצד החיך של השיניים והכניסו את המקטע הפרוקסימלי בין המגע של M1 לטוחנות מקסילריות שניות. השתמש במעלית המיקרוכירורגית הפריאוסטאלית כדי להחדיר את התפר בתוך החריץ. לעטוף את הרצועה סביב פני השטח buccal של M1 בזהירות רבה, כמו הרקמות ברמה זו להציג אזור צר של חניכיים מחובר.

ודא שהתפר מהודק בשני הקצוות כדי להידחף לתוך חריץ החניכיים. לאחר מכן, קשרו את קצות התפר בקשר מנתח וקצצו את הזנבות קצרים ככל האפשר. הכנס את הקשר לחריץ.

לאחר מיקום הליגטורה, יש להזריק 40 מיקרוליטר של PG-LPS במי מלח סטריליים לרקמה התת-חניכית בצד המזיופלטלי של ה-M1 באופן דו-צדדי. כדי לבחון ולהתאים את הליגטורה, הניחו את בעל החיים המרדים על גבו והשתמשו במהלך ההליך בחרוט אף קטן עם 1% איזופלורן ו-100% חמצן לתחזוקת ההרדמה של בעל החיים. יש לפתוח את הפה העוטף באמצעות פה אלומיניום סביב החותכות, למשוך את הלשון באמצעותו ולייצב את המקסילה והלסת התחתונה בתנוחת עבודה פתוחה ונוחה, המאפשרת גישה לליגטורות.

הדקו את הרצועות כנגד החניכיים בעזרת מעלית מיקרוכירורגית פריאוסטאלית וודאו שתפר הליגטורות מוכנס, מה שיוצר דלקת סביב החניכיים. לאחר התאמת הליגטורה, הזריקו באופן דו-צדדי 40 מיקרוליטר של PG-LPS לרקמה התת-חניכית בצד המזיופלטלי של ה-M1, כפי שהודגם קודם לכן. לאחר הקרבת החיה ביום ה -14, לאסוף GCF כפי שמוצג קודם לכן.

מעבירים את נקודת הנייר מיד לבקבוקון פלסטיק ומאחסנים בטמפרטורה של מינוס 80 מעלות צלזיוס עד לביצועי הבדיקה. התמונות הדו-ממדיות של עצם הנאדית של הטוחנות המקסילריות מראות נפח עצם גדול יותר בבקרה הבסיסית ואובדן עצם מכתשית גבוה יותר לאחר הקמת דלקת חניכיים. ניתוח של תמונות sagittal מדגיש אובדן עצם alveolar משמעותי יותר באזור העצם interradicular של M1 ו M2 לאחר הקמת periodontitis, בהשוואה לקבוצת הביקורת הבסיסית.

לאחר הקרבה, החיך הציג הבדלים בנסיגת חניכיים ב-M1 בין קבוצות שונות. קבוצת פריודונטיטיס מראה נדידת חניכיים אפיקלית מרשימה יותר ודלקת של החניכיים סביב הטוחנות המקסילריות בהשוואה לקבוצת הביקורת הבסיסית. כמו כן, קבוצת דלקת חניכיים הראתה שחרור גבוה משמעותית של ציטוקין 1L-1 בטא מעודד דלקת מ-GCF בהשוואה לקבוצת הביקורת.

שלבים מכריעים בהליך הם מיקום נכון של התפר והקשר בחריץ, התאמה נכונה של הליגטורה, והזרקת ליפופוליסכריד מדויקת במהלך פרוטוקול 14 יום.