מדד במבחנה הוא מדד מתאים לבדיקת פירוק תמיסות של תכשיר מוצק לרפואה סינית אשר לוקחות בחשבון את ההשפעות של פירוק תרופות, ואת התנהגות ההמסה, ואת התוכן של החומר הפעיל. זיהוי רכיב רב-אינדקסי יכול לשקף טוב יותר את ההשפעה הניטרלית, ואת הפרש הפירוק של רכיבים שונים. מי שידגים את ההליך יהיה קוויניון דו, תלמיד יוצא דופן מהמעבדה שלי.
כדי להתחיל, להכין את תמיסת מלאי חומר הייחוס על ידי שקילת 10.6 מיליגרם של salidrocide, 5.24 מיליגרם של חומצה גאלית, ו 5.21 מיליגרם של חומצה גאלית אתילית בנפרד על איזון אנליטי אלקטרוני. לאחר מכן הוסף אותם בנפרד לתוך בקבוק נפח חמישה מיליליטר. לאחר מכן מוסיפים מתנול כיתה HPLC להתמוסס, ומדוללים לחמישה מיליליטר.
ולבסוף, לנער היטב כדי להשיג את תמיסת מלאי חומרי הייחוס עם ריכוזי מסה של 2.120, 1.048 ו 1.042 מיליגרם למיליליטר, בהתאמה. כדי להכין את הפתרון מדגם הבדיקה, לחלץ 2.8 גרם של גרגרי רודיולה עם 10 מיליליטר של מתנול כיתה HPLC, באמצעות מכונת ניקוי קולי במשך 30 דקות. לאחר מכן סנן אותו עם מסנן 0.22 מיקרומטר לבדיקת הסתגלות המערכת.
לאחר מכן הכינו תמיסת ייחוס מעורבת המכילה 0.590 מיליגרם למיליליטר סלידרוסיד, 2.030 מיליגרם למיליליטר חומצה גאלית ו-1.930 מיליגרם למיליליטר אתיל גלאט. כדי לקבל את התוכן התיאורטי של כל מרכיב אופייני של גרגרי רודיולה, מניחים 2.8 גרם של גרגרי רודיולה בבקבוק חרוטי 500 מיליליטר. מוסיפים 200 מיליליטר מים טהורים במיוחד, ומוציאים אולטרה-סאונד למשך 60 דקות.
לאחר מכן סנן אותו עם מסנן 0.22 מיקרומטר. לאחר קביעת התוכן של פתרון הבדיקה, הגדר את התנאים הכרומטוגרפיים עבור כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים כמתואר בכתב היד. כדי לחקור את הקשר הליניארי, דללו את תמיסות מלאי הייחוס של חומצה גאלית ואתיל גלאט, ואת תמיסות מלאי הייחוס של סלידרוסיד כדי לקבל את תמיסת ריכוז השיפוע לשרטוט עקומה סטנדרטית.
לאחר מכן הזריקו 10 מיקרוליטר של תמיסת הייחוס המעורבת למערכת HPLC שש פעמים ביום, והריצו את הדגימות עם אותם תנאי HPLC, תוך רישום אזור השיא של כל רכיב תכונה. לאחר מכן להזריק 10 מיקרוליטר של פתרון מדגם מוכן, ולקבוע את אזורי השיא של HPLC על פי התנאים הכרומטוגרפיים במרווחי זמן שונים. קח שש דגימות של אותה אצווה של גרגרי רודיולה כדי להכין את תמיסת הדגימה כפי שהודגם קודם לכן, והזריק 10 מיקרוליטר מכל דגימה למערכת HPLC.
הפעל את הדגימות כפי שהודגם קודם לכן כדי לקבוע את יכולת השחזור. לאחר הכנת שש מנות של אותה אצווה של גרגרי רודיולה לתמיסת הבדיקה, הוסיפו כ-50% ממצע הייחוס של כל רכיב מדד. הפעל דגימות אלה במערכת HPLC, כפי שהודגם בעבר, כדי לחשב את קצב ההתאוששות כמתואר בכתב היד.
כדי לבצע את בדיקת המסה, להוסיף 100 מיליליטר של מים טהורים במיוחד לתוך המסה של מנגנון המסת התרופה, ולשמור על הטמפרטורה ב 37 מעלות צלזיוס עם מהירות סיבוב של 100 סל"ד. לאחר מכן להוסיף 2.8 גרם של גרגרי רודיולה לתוך המסה, ולהתחיל להקליט את משך המסה מיד. לאסוף סך של מיליליטר אחד של הדגימה עם מזרק במרווחי זמן שונים, ולהשלים את הנפח בכוס המסה עם מדיום המסה באותה טמפרטורה מיד.
מיד למלא את הדגימות שנאספו דרך קרום microporous 0.22 מיקרומטר, ולקחת את הסינון הבא. לאחר קביעת התוכן של כל רכיב, בכל נקודת זמן על ידי HPLC, חשב את הפירוק של כל נקודת זמן, ואת הפירוק המצטבר כמתואר בכתב היד. הכרומטוגרמה של הדגימה, ופתרון הייחוס התקבלו.
שלוש פסגות שונות המקבילות לחומצה גאלית, סלידרוסיד ואתיל גלאט מראות כי לשיפוע האלוציה הייתה רזולוציה טובה עבור שלושת מרכיבי האינדקס בגרגרי רודיולה. עקומות הפירוק של כל רכיב מראות כי ההמסה המצטברת של חומצה גאלית הייתה מעל 80% לאחר דקה אחת. ואילו עבור סלידרוסיד וחומצה גאלית אתילית, זה היה מעל 65% לאחר חמש דקות.
עם זאת, הפירוק המצטבר של כל רכיב מדד ירד לאחר 30 דקות. התאמת נושא הדילול של העקומה הסטנדרטית, על פי הניסוי המקדים של הטיפול בדגימה, יש לאסוף דגימות במהירות כדי למנוע מהן להחמיץ נקודת זמן איסוף מיוחדת.
