תא Fractionation של תאים U937, בהעדר צנטריפוגה במהירות גבוהה

פרוטוקול זה מאפשר לחוקרים להשיג שברים ברורים של תא ללא שימוש בציוד מיוחד, רייגנטים יקרים או טכניקות מורכבות. היתרון העיקרי של פרוטוקול זה הוא הפשטות של הטכניקות המאפשרות לו להיות ניתן לשכפול וקל לביצוע. הדגמת ההליך יהיה מאט Deragon, רוב Haluska ואלכסה הודג'ס.שלושה סטודנטים לתואר שני מהמעבדה שלי. כדי להתחיל צנטריפוגה ההשעיה התא מוכן כדי ליצור גלולה. הסר את supernatant ולהשעות מחדש את גלולה בטמפרטורת החדר PBS. צנטריפוגה ההשעיה התא ב 400 xg במשך עשר דקות. ואז להסיר את supernatant מחדש להשעות את גלולת התא במאגר קר קרח. הכנת מאגר פתרון בהתאם לפרוטוקול הטקסט. צנטריפוגה ההשעיה התא ב 400 xg במשך עשר דקות ולהסיר את supernatant. להשעות מחדש את גלולה במאגר פתרון לריכוז סופי של 200 מיליון תאים לכל מ"ל, ו pipette בעדינות כדי לשבור את כל הגושים. לאחר דגירה זו ההשעיה התא על קצה מעל מסובב קצה ב 4