We thank Terry Shelley for manufacturing the fly arena and the light-tight enclosure, Liz Marr for help with fly stock maintenance, and Xiaojing Gao and Junjie Luo for help with the Matlab code used for data analysis. We thank Johan Lundstr&#246;m at the Monell Chemical Senses Center for demonstrating his odor delivery setup. This work was supported by grants from the Whitehall Foundation (CJP) and NIH NIDCD (R01DC013070, CJP).

1. הגדרת עצרת <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ייצור בזירה בצורת כוכב (19.5 ס&quot;מ על 19.5 ס&quot;מ על 0.7 ס&quot;מ) מתוך polytetrafluoroethylene (PTFE) פי (חומרים משלים, SupplementalSketch_StarShapedArena.pdf) ציור מסופק. הזירה עשויה להיות מיוצרת על ידי בפרסומת או מתקן מותאם אישית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רוכשת שתי צלחות זכוכית (20.25 ס&quot;מ על 20.25 ס&quot;מ עם עובי של 2 מ&quot;מ), לקדוח חור (~ 0.7 ס&quot;מ קוטר) בדיוק במרכז אחד מלוחות הזכוכית באמצעות המקדח מצופה יהלומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ייצור תיבת התנהגות אור חזק עבור התנהגותית. גם לייצר קופסות מצלמת אור חזקה עבור מצלמת וידאו CCD-אדום אינפרא לי תרשים סיפק (חומרים משלימים, SupplementalSketch_LightTightBox.pdf). התיבות עשויות להיות מיוצרות על ידי מסחרי או מתקן מותאם אישית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתקין את יחידת המזגן על הקיר האחורי ואת מערכי LED על הקירות הצדדיים של תיבת ההתנהגות. מניח את חללית הטמפרטורהבתיבת התנהגות דרך חור בצד משוב וכוונון טמפרטורה בזמן אמת (ראה איורים 1 ו -2 לפרטים נוספים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את מסנן IR ו מקטב מעגלי למצלמה, ולעגן את המכלול לתוך תיבת המצלמה. תיבת התנהגות תיבת מצלמה מופרדת חלון זכוכית עבור בקרת טמפרטורה טובה יותר של תיבת ההתנהגות (ראה איורים 1 ו -2 לפרטים נוספים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את מצלמת CCD אינפרא האדומה למתאם מצלמה. חבר את מתאם מצלמת ממיר USB. חבר את ממיר ה- USB ליציאת USB במחשב לרכישת נתונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התקן את מנהל ההתקן עבור ממיר וידאו במחשב על פי הוראות היצרן. לחלופין, להתקין תוכנות עיבוד תמונה שסיפק היצרן של ממיר וידאו USB לגשת למגוון רחב יותר של הגדרות המצלמה ופרמטרים הרכישה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את יחידת המזגן (באמצעות &quot;פלט&quot;על גביו של בקר טמפרטורה) ואת בדיקת הטמפרטורה (באמצעות&quot; תרמי &quot;בגב בקר טמפרטורה) אל בקר הטמפרטורה. מניח את החללית לתוך תיבת ההתנהגות. הערה: מערכת בקרת הטמפרטורה בפריסה שלנו היא מסוגלת לשמור על טמפרטורת התיבה בין 18 ° C ו- 30 ° C. כאשר טמפרטורה סביבתית גבוהה או נמוכה יותר יכולה להיות שימושית עבור thermogenetic (dTrpA1, TS TrpM8 או shibire) ניסויים לתמרן פעילות עצבית או לעכב בשידור סינפטי. עבור רוב הניסויים, הטמפרטורה נשמרת על 25 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרכיבו את מערכת המסירה ריח בשלבים הבאים (ראה איור 1B עבור שרטוטים מפורטים ואביזרים חיבור): <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש ווסת לחץ האוויר לשלוט קלט האוויר ממערכת האוויר המרכזית. חבר מסנן אוויר פחמן (מלא פחם) אל ווסת הלחץ כדי לטהר את האוויר מן המרכזימערכת ir. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרכב את מערכת בקרת זרימה המורכבת של ערוצים מרובים מוסדרים על ידי צינורות flowmeter ברזולוציה גבוהה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חברו את יציאת ממסנן האוויר פחמן אל צינורות flowmeter דרך סעפת כפי שמוצג באיור 1B ו 2F. כוון את הפלט של צינורות flowmeter דרך שסתומי סולנואיד 3 כיוונים נשלטו אלקטרוני להסדיר אם אוויר נקי לעזוב את למדידת התצרוכת מסולק לחדר או התקשר תאי ריח מחוייט 24. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התקן את בקר שסתום סולנואיד פי הוראות היצרן. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן מד זרימת האוויר האלקטרוני על ידי חיבורו להתקן רכישת נתונים (DAQ) וכן אספקת חשמל בהתאם למדריך של היצרן. התקן את תוכנת ממשק DAQ לאמת ספיקות שווות בכל רבע של הזירה לפני כל ניסוי. </li></ol> 2. הכנת גירויי חוש ריח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן ריח 5תאי נמלה 24 מורכבות של מכל חיצוני פלסטיק, זכוכית מיכל פנימי, להכניס מכסת מחוייט PTFE, מכסה מיכל מקורי עם חלק מרכזי הוסרו, ושני שסתומים חד כיווניים. הערה: O-Ring מסביב למכסת PTFE יכול לשמש כדי למנוע דליפת אוויר מאולם הריח במהלך זלוף ריח. ראה איור 1 עבור סכמטי באיור 2 לתמונות של תאי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש ארבעה תאי odorant עבור פקדי ממס, קאמרית אחת עבור odorant הבדיקה. מלאו את מיכלי זכוכית עם 1,000 μl של דילול ממס או odorant (ניחוחי מבחן + ממיסים המתאים, ומערבבים היטב לפני ניסויים), מניחים את מיכל זכוכית בפנים הקאמרית פלסטיק המקביל (לא לשפוך את הנוזל לתוך תא פלסטיק) והדק את המכסה . הקפד תמיד להשתמש בתא נקי עבור odorant מבחן ובקרות ממס. הערה: משיכת חוש ריח יכולה להיות מופעלת על ידי 1/16 דילול של חומץ תפוחים (5% חומציות) ב wאטר. לעומת זאת, התנהגות דחייה חוש הריח עלול להיחקר באמצעות דילול 10% של propionate אתיל בשמן מינרלי. גירויי בקרה במקרים אלה הם תאי ריח עם שמן מינרלים טהור. </li></ol> 3. הכנה טס <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחורי זבובים על מדיום קמח תירס רגיל. מניח 30 זכר 30 זבובים הוריים נשיים בקבוק סטנדרטי, ולתת להם להטיל ביצים במשך 5 ימים של 25 מעלות צלזיוס או בטמפרטורת חדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור כל ניסוי, לאסוף eclosed החדש (&lt;1 יממה) 25 גברים ו 25 נשים זבובים בהרדמה CO 2 קצר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור זבובי בקבוקון עם מדיום לטוס תקן 2-4 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 40-42 שעות לפני הניסוי, להעביר את הזבובים בלי CO 2 הרדמה &#160; בקבוקון עם ג&#39;ל agarose ~ 10 מ&quot;ל 1%. זה ישמור על הזבובים humidified ללא מזון, אשר מסייע להגביר את הפעילות של התנועה שלהם. הערה: יותר מ -90% של הזבובים צריכים לשרוד את הרעב. גנוטיפים חלקם פחות לרפאעמך וייתכן שלא לעשות את זה דרך רעב 40 שעות. במקרים אלה, לתקופות קצרות כגון 24-28 שעות תתקבלנה, אבל צריך להישמר זהה עבור כל התנאים והחוזרים ניסיוני. </li></ol> 4. תגובות התנהגותיות ניחוחות אטרקטיביים ודוחים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את בקר הטמפרטורה ולהגדיר אותו ל -25 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את תאי odorant (ניחוחי מלא בדיקה) על ידי החדרת צינורות לשקע של תא odorant ואל שכיבות כדי להתחבר הולם על קופסא ההתנהגות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את קצב הזרימה בכל רבע באמצעות מד זרימת אוויר לוודא כי מלאה איירסטרים odorant שווים ל -100 מ&quot;ל / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקו את הזירה PTFE זבוב ואת לוחות זכוכית עם 70% 2-3 פעמים אתנול ולאפשר להם אוויר יבש לגמרי (~ 3-4 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הצמד את לוחות הזכוכית לזירה עם מהדק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת זבובים בלי CO 2 הרדמה לזירה דרך החור אחד מלוחות הזכוכית. אָחוֹראה ההעברה, להציב רשת מעגלית על החור כדי למנוע זבובים לברוח. הערה: הרדמת CO 2 הוכחה כדי להשפיע על התנהגות תסיסנית 25 ולא אמור לשמש תוך 24 שעות של ניסוי התנהגותי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את הזירה עם זבובים לתוך תא האור חזק, לחבר את זרמי אוויר ארבע שליטה על ידי חיבור הצינור המחובר אל שכיבות כדי להתחבר הולם על קופסא ההתנהגות לפינות הזירה, לסגור את הדלת של החדר ולחכות 10- 15 דקות כדי לתת את הזבובים להתאקלם בסביבה החדשה. במידת האפשר, כיבתה את האורות בחדר שבו הניסויים מבוצעים, כדי למנוע דליפת אור מינימלית האפשריים שעשויים להטות את התוצאה הניסיונית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל ניסוי בניהול 5-10 דקות, שבו זבובים נחשפים פרצי אוויר 4 שליטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את הנתונים באופן מיידי (ראה סעיף ניתוח נתונים להלן) כדי לוודא כי הזבובים מופצים באופן אחיד בזירה, ואת משיכת האינדקס קרובהצעד ל -0 זה חיוני, כפי שהוא מוודא כי אין מקורות בלתי מבוקרים של העדפה או הימנעות בתוך הזירה (למשל חדר אור דולף מבחוץ, התפלגות טמפרטורה אחידה, בזירה אחידה, זיהום ריח, וכו &#39;). אם הזבובים מופצים שוויוניים או הפעילות של התנועה שלהם היא נמוכה, לבטל את הזבובים, לנקות את הזירה שוב (שלב 4.4) ולהשתמש קבוצה חדשה של זבובים לחזור על הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את תא odorant המבחן כדי ההתקנה כשיפעיל שסתומי 3 הכיוונים או מחדש חיבור הצינורות המחברים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל ניסוי מבחן למשך 5-10 דקות ולנתח את הנתונים כפי שפורט בסעיף 5 להלן (ראה גם הפניה 14 ו איור 3). הקלטות ארוכות מ -20 דקות יכולות לגרום קבצי נתונים שעשויות להיות קשה תהליך מחשוב. אם הקלטות ניסיוניות יותר הם רצויות, במהירות לעצור מחדש להפעיל את תכנית המעקב. התוצאה היא פער ~ 10 שניות בין הקלטות ניסיוניות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Discarזבובים ד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזירה וזכוכית נקיות צלחות עם אתנול 70% (שלב 4.4), ולהחליף צינורות מחבר בתוך מתחם האור חזק. כדי לזרז את ניסויים, זירה נקיה חדשה יכולה לשמש, ובזירה המלוכלכת לנקות בעת ביצוע ריצות ניסיון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל ניסוי נוסף עם קבוצה חדשה של זבובים, אם נדרש. אם מספר ניסויים מנוהלים באותו היום, לקחת בזהירות רבה, כדי לוודא ששום odorant נשאר במערכת מריצת בדיקה קודמת. זה בדרך כלל לא בעיה עם ריכוזים נמוכים של ניחוחי או עם CO 2, אבל עבור מרוכז מאוד גירויים עד פער 24 שעות בין ריצות ניסיוניות עשויים להיות נחוץ. בנוסף, כל הצינורות לאחר צינורות הזרימה יכולים להיות מוחלפים אם זיהום odorant חשוד במהלך ניסויים שליטים. תמיד להשאיר באוויר היבש בין הניסויים כדי לרוקן את המערכת באופן רציף </li></ol> ניתוח 5. נתונים הערה: softwar רכישת מעקב זבוב הציעדואר (המפורטים חומרים), עוקב אחר הזבובים בזמן אמת במהלך הרכישה, ושומר את חותמת זמן הקואורדינטות של כל הזבובים מזוהה בפורמט .dat *. פיתחנו שגרה מחוייט Matlab כדי להמיר את הנתונים לפורמט Matlab, ולנתח את הנתונים. דוגמאות קוד ניתנות חומרים משלימים, אך פרטים של יישום יהיו תלויים בתוכנה המשמשת לרכישת נתונים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טען את הנתונים הגולמיים. יצירת מסכה מרחבית, בהתאם לקווי המתאר של הזירה ולהחיל את המסכה על הנתונים הגולמיים כדי להסיר את כל נקודות נתונים שנופלים מחוץ לזירה כפי שהם מייצגים רעש (איור 4 א, ​​משלים קוד MaskSpatialFiltering.m, Score.m, DrawCircularMask. M). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל נקודות נתונים שנעים במהירות מתחת 0.163 ס&quot;מ / s עבור יותר -3, מכיוון שמידע זה עשוי להיות רעש או שנוצר על ידי זבובים שאינו זז (איור 4 ב &#39;, משלים קוד TemporalFiltering.m). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דמיינו נתונים הנותריםנקודות על ידי התוויית אותם בבת אחת או כמו מסלולי יחיד (איור 3, קוד משלים SingleTrajectoryViewer.m). הערה: המיקום של גבולות ריח של שדה ארבעה תלוי סביר על מספר גורמים, כגון המאפיינים של כל odorant ושיעורי זרימת האוויר בשימוש. לדוגמא, ניחוחי בתנודתיות גבוהה ימלא ברבע הריח סביר באופן מלא יותר מאשר ניחוחי תנודתי פחות. לפיכך סביר להניח כי כל odorant עשוי להפגין גבולות ריח שונים במקצת. השימוש בגלאי photoionization למדוד גבולות ריח יכול להיות בעייתי כפי שהיא משתמשת בוואקום לדגום אוויר מנקודה מסוימת, וכך משבש את הריכוז odorant בנקודה זו. עם זאת, גבולות ריח יכולים יוערכו בהתבסס במהירות על נתונים התנהגותיים זבוב. לדוגמא, גבול ריח המבוסס על מסלולי זבוב שנצברו בתגובת ריחות שונים ניתן להבחין בבירור 3C דמויות 3D. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קאלculate אינדקס משיכה כדי לקבוע אם ניסויים שליטים לייצר שום תגובת העדפה, וגם לגשת בתגובת odorant (או 9 optogenetic) גירוי. כדי לחשב אטרקצית האינדקס (AI), להשתמש ב -5 הדקות האחרונות של הקלטה מלאה או בדיקה. כדי להשיג מידה של משיכה שנופלת בין +1 (משיכה מוחלטת) ו -1 (דחייה מוחלטת), הנוסחא הבאה משמשת לחישוב AI: <img alt="משוואה 1" src="/files/ftp_upload/54346/54346eq1.jpg" /> שם בדיקת N היא מספר נקודות נתונים ברבע הבדיקה, בקרת N הוא המספר הממוצע של נקודות נתוני הרביעים המלאים השלושה. צעד זה הוא אינטואיטיבי כמו העדפה תצוין ערכים אפסיים. עם זאת, זה לא נכון לציין את חלקם של המספר הכולל של זבובים ממוקמים ברבע odorant. כדי להשיג מידה זו, אחוז במדד (PI) ניתן להשתמש: <img alt="משוואה 2" src=&quot;/files/ftp_upload/54346/54346eq2.jpg&quot; /&gt; שם בדיקת N היא מספר נקודות נתונים ברבע הבדיקה, ומוחלט N הוא המספר הכולל של נקודות נתונים בכל ארבעת הרביעים. נוסחה זו מספקת מדד שנופל בין 0 ל -1, עם 0.25 המתאים אין העדפה התנהגותית (איור 3E ו 4C, משלים קוד AttractionIndex.m). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל 5-10 חזרות על כל תנאי הניסוי, באמצעות קבוצה חדשה של זבובים לכל חוזרים. השוואת מדדי משיכה בין התנאים או נגד שולטת באמצעות מבחן קולמוגורוב-סמירנוב הלא פרמטרית (איור 3F, פונקציה kstest2 ב- Matlab). </li></ol>

<ol>
	<li>Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+mutants+of+Drosophila+isolated+by+countercurrent+distribution.">Behavioral mutants of Drosophila isolated by countercurrent distribution.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 58 (3), 1112-1119 (1967).</li><li>Thorpe, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Further+studies+on+pre-imaginal+olfactory+conditioning+in+insects.">Further studies on pre-imaginal olfactory conditioning in insects.</a> Proc R Soc B. 127 (848), 424-433 (1939).</li><li>Tully, T., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical+conditioning+and+retention+in+normal+and+mutant+Drosophila+melanogaster.">Classical conditioning and retention in normal and mutant Drosophila melanogaster.</a> J Comp Physiol A. 157 (2), 263-277 (1985).</li><li>Anholt, R. R., Mackay, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+genetic+analyses+of+complex+behaviours+in+Drosophila.">Quantitative genetic analyses of complex behaviours in Drosophila.</a> Nat Rev Genet. 5 (11), 838-849 (2004).</li><li>Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Into+the+mind+of+a+fly.">Into the mind of a fly.</a> Nature. 450 (7167), 193-197 (2007).</li><li>Wu, M. N., Koh, K., Yue, Z., Joiner, W. J., Sehgal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+genetic+screen+for+sleep+and+circadian+mutants+reveals+mechanisms+underlying+regulation+of+sleep+in+Drosophila.">A genetic screen for sleep and circadian mutants reveals mechanisms underlying regulation of sleep in Drosophila.</a> Sleep. 31 (4), 465-472 (2008).</li><li>Dankert, H., Wang, L., Hoopfer, E. D., Anderson, D. J., Perona, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+monitoring+and+analysis+of+social+behavior+in+Drosophila.">Automated monitoring and analysis of social behavior in Drosophila.</a> Nat Methods. 6 (4), 297-303 (2009).</li><li>Branson, K., Robie, A. A., Bender, J., Perona, P., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+ethomics+in+large+groups+of+Drosophila.">High-throughput ethomics in large groups of Drosophila.</a> Nat Methods. 6 (6), 451-457 (2009).</li><li>Aso, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mushroom+body+output+neurons+encode+valence+and+guide+memory-based+action+selection+in+Drosophila.">Mushroom body output neurons encode valence and guide memory-based action selection in Drosophila.</a> Elife. 3, e04580 (2014).</li><li>Pfeiffer, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tools+for+neuroanatomy+and+neurogenetics+in+Drosophila.">Tools for neuroanatomy and neurogenetics in Drosophila.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (28), 9715-9720 (2008).</li><li>Pfeiffer, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refinement+of+tools+for+targeted+gene+expression+in+Drosophila.">Refinement of tools for targeted gene expression in Drosophila.</a> Genetics. 186 (2), 735-755 (2010).</li><li>Venken, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+engineering:+Drosophila+melanogaster+and+beyond.">Genome engineering: Drosophila melanogaster and beyond.</a> Wiley Interdiscip Rev Dev Biol. , (2015).</li><li>Diao, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plug-and-play+genetic+access+to+drosophila+cell+types+using+exchangeable+exon+cassettes.">Plug-and-play genetic access to drosophila cell types using exchangeable exon cassettes.</a> Cell Rep. 10 (8), 1410-1421 (2015).</li><li>Lin, C. C., Prokop-Prigge, K. A., Preti, G., Potter, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+odors+trigger+Drosophila+males+to+deposit+a+pheromone+that+guides+aggregation+and+female+oviposition+decisions.">Food odors trigger Drosophila males to deposit a pheromone that guides aggregation and female oviposition decisions.</a> Elife. 4, (2015).</li><li>Pettersson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+aphid+sex+attractant.">An aphid sex attractant.</a> Insect Systematics &amp; Evolution. 1 (1), 63-73 (1970).</li><li>Semmelhack, J. L., Wang, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Select+Drosophila+glomeruli+mediate+innate+olfactory+attraction+and+aversion.">Select Drosophila glomeruli mediate innate olfactory attraction and aversion.</a> Nature. 459 (7244), 218-223 (2009).</li><li>Vet, L. E. M., Lenteren, J. C. V., Heymans, M., Meelis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+airflow+olfactometer+for+measuring+olfactory+responses+of+hymenopterous+parasitoids+and+other+small+insects.">An airflow olfactometer for measuring olfactory responses of hymenopterous parasitoids and other small insects.</a> Physiological Entomology. 8 (1), 97-106 (1983).</li><li>Faucher, C., Forstreuter, M., Hilker, M., de Bruyne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+responses+of+Drosophila+to+biogenic+levels+of+carbon+dioxide+depend+on+life-stage,+sex+and+olfactory+context.">Behavioral responses of Drosophila to biogenic levels of carbon dioxide depend on life-stage, sex and olfactory context.</a> J Exp Biol. 209 (Pt 14), 2739-2748 (2006).</li><li>Katsov, A. Y., Clandinin, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motion+processing+streams+in+Drosophila+are+behaviorally+specialized.">Motion processing streams in Drosophila are behaviorally specialized.</a> Neuron. 59 (2), 322-335 (2008).</li><li>Gao, X. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+kinematics+and+motor-related+neurons+for+aversive+chemotaxis+in+Drosophila.">Specific kinematics and motor-related neurons for aversive chemotaxis in Drosophila.</a> Curr Biol. 23 (13), 1163-1172 (2013).</li><li>Gao, X. J., Clandinin, T. R., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extremely+sparse+olfactory+inputs+are+sufficient+to+mediate+innate+aversion+in+Drosophila.">Extremely sparse olfactory inputs are sufficient to mediate innate aversion in Drosophila.</a> PLoS One. 10 (4), e0125986 (2015).</li><li>Ronderos, D. S., Lin, C. C., Potter, C. J., Smith, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Farnesol-detecting+olfactory+neurons+in+Drosophila.">Farnesol-detecting olfactory neurons in Drosophila.</a> J Neurosci. 34 (11), 3959-3968 (2014).</li><li>Riabinina, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+and+expanded+Q-system+reagents+for+genetic+manipulations.">Improved and expanded Q-system reagents for genetic manipulations.</a> Nat Methods. 12 (3), 219-222 (2015).</li><li>Lundstrom, J. N., Gordon, A. R., Alden, E. C., Boesveldt, S., Albrecht, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+building+an+inexpensive+computer-controlled+olfactometer+for+temporally-precise+experiments.">Methods for building an inexpensive computer-controlled olfactometer for temporally-precise experiments.</a> Int J Psychophysiol. 78 (2), 179-189 (2010).</li><li>Colinet, H., Renault, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+effects+of+CO2+anaesthesia+in+Drosophila+melanogaster.">Metabolic effects of CO2 anaesthesia in Drosophila melanogaster.</a> Biology Letters. 8 (6), 1050-1054 (2012).</li><li>Ramdya, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanosensory+interactions+drive+collective+behaviour+in+Drosophila.">Mechanosensory interactions drive collective behaviour in Drosophila.</a> Nature. 519 (7542), 233-236 (2015).</li><li>Ofstad, T. A., Zuker, C. S., Reiser, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+place+learning+in+Drosophila+melanogaster.">Visual place learning in Drosophila melanogaster.</a> Nature. 474 (7350), 204-207 (2011).</li><li>Beshel, J., Zhong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+encoding+of+food+odor+value+in+the+Drosophila+brain.">Graded encoding of food odor value in the Drosophila brain.</a> J Neurosci. 33 (40), 15693-15704 (2013).</li><li>Steck, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+behavioral+paradigm+for+Drosophila+olfaction+-+The+Flywalk.">A high-throughput behavioral paradigm for Drosophila olfaction - The Flywalk.</a> Sci Rep. 2, 361 (2012).</li><li>Thoma, M., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+Quantification+of+Odor-guided+Behavior+in+Drosophila+melanogaster+Using+the+Flywalk+Paradigm.">High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm.</a> J. Vis. Exp. (106), (2015).</li><li>Claridge-Chang, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Writing+memories+with+light-addressable+reinforcement+circuitry.">Writing memories with light-addressable reinforcement circuitry.</a> Cell. 139 (2), 405-415 (2009).</li><li>Parnas, M., Lin, A. C., Huetteroth, W., Miesenbock, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor+discrimination+in+Drosophila:+from+neural+population+codes+to+behavior.">Odor discrimination in Drosophila: from neural population codes to behavior.</a> Neuron. 79 (5), 932-944 (2013).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

אולפקטומטר ארבע השדה המתוארת כאן הוא מערכת התנהגותית צדדית ללימוד תגובות חוש הריח של אוכלוסיות גדולות של wild-type ו מוטצית תסיסנית זבובים. כל ניסוי לוקח ~ 1 hr (כולל התקנה, ריצות ניסיון, וניקוי), ו 4-6 ניסויים ניתן לבצע באופן שיגרתי בכל יום. Assay טיפוסי באמצעות 40-50 זבובים ב...

היכולת להסתגל ולהגיב הסביבה החיצונית היא קריטית להישרדות של כל בעלי החיים. בעל חיים צריכים למנוע סכנות, לחפש מזון למצוא בנות זוג, וללמוד מניסיונם הקודם. מערכות חושיות לתפקד לקבל מגוון של גירויים, כגון חזותי, כימי mechanosensory, ולשלוח אותות אלה למערכת העצבים המרכזית צורך לפרש מפוענח. המוח ואז מפנה התנהגויות מוטוריות המתאים בהתבסס על הסביבה הנתפסת, כגון תר אחר מזון או לברוח טורף. הבנה כיצד מערכות חושיות לזהות את העולם החיצוני, וכיצד המוח מפענח ומפנה החלטות, הוא אתגר גדול בנוירוביולוגיה. תסיסנית היא מערכת מודל עוצמה על חקירת התנהגויות מדריך מעגלים עצביים איך. מלבד היותו פשוט וזול יותר לתחזק, תסיסנית תערוכה רבות התנהגויות מגוונות ומורכבות סטריאוטיפיות, עדיין עושה זאת עם compact מערכת העצבים של כ 100,000 נוירונים. טכניקות גנטיות עצמה קיימות מניפולציה של הגנום תסיסנית, ואלף קווים מהונדסים נוצרו כי סלקטיבי reproducibly לתייג אותה תת הקבוצות של נוירונים 10-13. קווים מהונדסים אלה יכולים לשמש כדי לתפעל את הפעילות באופן סלקטיבי של נוירונים שכותרתו (להפעיל או לעכב), ואת המניפולציות האלה יכולים לשמש כדי לחקור התנהגויות מדריך פונקציות איך עצבי. מבחני התנהגות נפוצים פותחו ללימוד התנהגויות תסיסנית שונות. תסיסנית, כמו בעלי חיים רבים, להשתמש בחוש הריח שלהם להדרכת בחירות התנהגותיים רבות, כגון מציאת מזון, מציאת בני זוג, לבין הימנעות סכנות. Olfaction לכן מערכת חושית טובה חוקר כיצד לגירויים חיצוניים מזוהים ופורשו על ידי מערכת העצבים של בעלי חי להנחות בחירות מתאימות. ככזה, מספר מבחני פותחו עבור investigaזחל טינג והתנהגויות הרחה מבוגרת. באופן מסורתי, התנהגויות ההרחה תסיסנית היו assayed ידי פרדיגמת שתי הבחירה T-מבוך, אשר ניתן להשתמש בהם עבור assaying מולד למדו התנהגויות ההרחה 3. ב assay זה, כ -50 זבובים מקבלים בחירה בין שני צינורות: צינור אחד מכיל את הריח מדובר והשני מכיל odorant מלא (בדרך כלל ממס הריח). הזבובים ניתנים לתקופה קצובה של זמן לעשות בחירה, ולאחר מכן את מספר הזבובים הנמצאים בתאים השונים נספר. למרות T-המבוך הוא assay פשוט עבור ניסויים רבים, ישנם מספר מגבלות. לדוגמא, התנהגויות הרחה נמדדות רק בנקודת זמן אחת, ואת האפשרויות שונות שנעשו לפני נקודת זמן זו מבוטלות. בדומה לכך, התנהגויות הפרט של הזבובים בתוך האוכלוסייה מוזנחות. בנוסף, T-המבוך דורש ספירה ידנית של זבובים, אשר עשוי להציג שגיאות. לבסוף, שכן יש רק שתי אפשרויות מדודות, זהמקטין את הכח הסטטיסטי נדרש לעתים קרובות כדי לזהות שינויי התנהגותיים עדינים. חלופת מבוך T ושתיים בחירה היא של ארבעה רביעים (ארבעה-שדה) אולפקטומטר 14-18. ב assay זה, חיות לחקור זירה שבה כל אחת מארבע הפינות של הזירה מתמלאת מקור פוטנציאלי של אוויר odorized. הזירה יש צורת כוכב המכווץ על מנת למקסם את ההיווצרות של ארבעה רביעי ריח מוגדרים באופן ניסיוני. אם ריח מסופק באחת הפינות ואז הוא מוכל רק באותה ברבע אחד. ההתנהגויות של בעלי החיים ניתן לעקוב כפי שהוא להיכנס ולצאת ברבעים הריח, ובקלות לעומת התנהגותם הרביעים המלאים השלושה. את assay אולפקטומטר הארבעה ברבע ובכך רשום בתגובה במרחב ובזמן התנהגותיות לגירויי הריח פני זירה ניסיונית גדולה. אולפקטומטר ארבע ברבע פותחה לראשונה על ידי Pettersson et al. 15 Vet et al. 17 לחקור את olתגובות מפעל התנהגותיים של דבוראים טפילים פרט. Faucher et al. 18 Semmelhack וואנג 16 התאימו את ההגדרה כדי לפקח על התגובות חוש הריח של תסיסנית הפרט. אולפקטומטר הארבעה ברבע רגיש לא פחות לתגובות אטרקטיביות ודוחות, המאפשר מגוון רחב של בדיקה ניחוחי ותנאים. תוכנת מעקב-אישית בכתב זבוב, שפותחה על ידי אלכס Katsov 19 ומתוחזק כיום על ידי ג&#39;וליאן בראון (המפורטים חומרים), הציג יתרונות נוספים למימושים עדכנית יותר של אולפקטומטר ארבע ברבע 14,20-23. עכשיו זה אפשרי כדי assay עד 100 זבובים בו זמנית מרחבית גבוהה (27.5 פיקסלים / ס&quot;מ) ובזמן (30 פריימים לשנייה) רזולוציה, המאפשר חילוץ פרמטרים שונים, כגון מיקום, מהירות ותאוצה של זבובים בכל נקודת זמן. זה מאפשר חקירות הדינמיקה של תגובות התנהגותיות &quot;הזבובים לריחות 20 </sעד&gt;. יצוין, עם זאת, כי זהותו של זבובים בודדים בתוך האוכלוסייה בתקופת המעקב כולו אינו נשמר. במקום זאת, כל מסלול זבוב נרשם עוד שני מסלולי זבוב לא מצטלבים. בנקודה זו, שירים חדשים מוקצים לאחר הזבובים לסטות. על ידי שילוב תוכנה לכיד וידאו אחר (המפורטים חומרי טבלה), אותה התצורה מאפשרת תקופות מעקב גמישות ויכולה לשמש למעקב אחר זבובים עד 24 שעות על ידי לקיחת תמונות בקצב מסגרת נמוכה. אפשרות זו שמשה ללמוד התנהגויות הטלה של זבובים ולהשוות תנוחות הגוף שלהם עם העדפות ovipositional 14. אולפקטומטר ארבעה השדה עשוי לשמש גם כדי ללמוד תגובות מולטימודליות (למשל חוש ריח וחזותי) גירויים, או לשלב optogenetic 9 או thermogenetic 21 גירוי עם מצגות של גירויים חושיים. יתר על כן, הרזולוציה הגבוהה הזמנית מאפשרת המיצוי של מסלולי FOr כל זבובי פירות בערכת הנתונים האנסמבל. לכן, השיטה מאפשרת חקירת התנהגויות אוכלוסיית הרחה מודרכת גם אינטראקציות חברתיות פרט. הנתונים שנוצרו על ידי assay זה הם חזקים מאוד לשחזור, המאפשרים את השימוש אולפקטומטר ארבעת שדה למסכים התנהגותי. אנו מתארים כאן את הרכבת ההתקנה עבור אולפקטומטר של ארבעה רביעים. בנוסף, אנו מראים את השימוש בו מנסה לאמוד משיכה ההרחה בתגובה חומץ תפוחים ודחייה בתגובה propionate אתיל מרוכז מאוד. לבסוף, אנו מתארים ולספק קוד לדוגמא עבור הניתוח של נתוני מעקב זבוב המוקלטים.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1935">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Air delivery system&#160;</td>
			<td style="width:397px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td style="width:960px;">(Quantity needed)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Tubing and connectors</td>
			<td style="width:397px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thermoplastic NPT(F) Manifolds</td>
			<td>Cole-Parmer, IL, USA</td>
			<td>R-31522-31</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hex reducing&#160; nipple (1/4MNPT-&#62;1/8MNPT)</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>5232T314</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tubing (ID:1/8)</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>5108K43</td>
			<td>50Ft</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tubing (ID:1/16)</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>52355K41</td>
			<td>100Ft</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Barbed tube fittings</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>5117K71</td>
			<td>1pack</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Push-to-connect tube fittings</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>5779K102</td>
			<td>4</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Barbed Tube Fittings (1/4MNPT-&#62;1/8BF)</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>5463K439</td>
			<td>1 pack (10)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Barbed Tube Fittings (1/8MNPT-&#62;1/8BF)</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>5463K438</td>
			<td>2 pack (10)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Barbed Tube Fittings (1/8MNPT-&#62;1/16BF)</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>5463K4</td>
			<td>2 pack (10)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Barbed Tube Fittings (1/4MNPT-&#62;1/4BF)</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>&#160; 5670K84</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hex head plug</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>48335K152</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:335px;">Air pressure regulator, air filter and flowmeters</td>
			<td style="width:397px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>(Quantity needed)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Labatory gas drying unit</td>
			<td>W A HAMMOND DRIERITE CO LTD, OH, USA</td>
			<td>Model: L68-NP-303; stock #26840</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Multitube frames for 150-mm flowtubes</td>
			<td>Cole-Parmer, IL, USA</td>
			<td>R03215-30</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Multitube frames for 150-mm flowtubes</td>
			<td>Cole-Parmer, IL, USA</td>
			<td>R03215-76</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">150-mm flowtubes</td>
			<td>Cole-Parmer, IL, USA</td>
			<td>R-03217-15</td>
			<td>9</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Valve Cartridge</td>
			<td>Cole-Parmer, IL, USA</td>
			<td>R-03218-72</td>
			<td>9</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Precision Air regulator</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td style="width:244px;">6162K13</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Soleniod valves</td>
			<td>Automate Scientific, Berkeley, CA</td>
			<td style="width:244px;">02-10i</td>
			<td>4</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Solenoid valve controller</td>
			<td>ValveLink 8.2, Automate Scientific, Berkeley, CA</td>
			<td style="width:244px;">01-18</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Electronic flow meter</td>
			<td>Honeywell</td>
			<td style="width:244px;">AWM3100V</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DAQ (NI USB-6009, National Instruments) and a&#160;</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td style="width:244px;">NI USB-6009</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Power supply</td>
			<td>Extech Instruments</td>
			<td style="width:244px;">382200</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Odor chambers</td>
			<td style="width:397px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Polypropylene Wide Mouth jar 2oz; 60ml</td>
			<td style="width:397px;">Nalgene</td>
			<td style="width:244px;">562118-0002</td>
			<td>At least 5 are required per experiment, but a separate chamber is required for each dillution of each odorant. Available at Container Store, part #635114)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Glass odor chamber, 0.25 oz</td>
			<td style="width:397px;">Sunburst Bottle</td>
			<td style="width:244px;">LB4B</td>
			<td>At least 5 are required per experiment&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">&#34;In&#34; valve for odor chamber</td>
			<td style="width:397px;">Smart Products, Inc., CA, USA</td>
			<td style="width:244px;">214224PB-0011S000-4074</td>
			<td>1 of these parts is used per odor chamber but they need to be replaced frequently</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">&#34;Out&#34; valve for odor chamber</td>
			<td style="width:397px;">Smart Products, Inc., CA, USA</td>
			<td style="width:244px;">224214PB-0011S000-4074</td>
			<td>1 of these parts is used per odor chamber but they need to be replaced frequently</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">O ring</td>
			<td style="width:397px;">RT Dygert International, MN, USA</td>
			<td style="width:244px;">AS568-029 Buna-N O-R</td>
			<td>1 pack (100)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Fly arena, camera and behavior boxes</td>
			<td style="width:397px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>(Quantity needed)</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:335px;">Behavior and camera box material</td>
			<td style="width:397px;">Interstate plastics, CA, USA</td>
			<td style="width:244px;">ABS black extruded (https://www.interstateplastics.com/Abs-Black-Extruded-Sheet-ABSBE~~ST.php)</td>
			<td>1803 sq inch</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:335px;">Teflon for fly arena and odor chamber inserts, 3/8&#34; thick, 12&#34;x12&#34;</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>8545K27&#160;</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Glass plates, 1/8&#34; Thick, 9&#34;x 9&#34;</td>
			<td>McMaster-Carr, IL, USA</td>
			<td>8476K191&#160;</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Dual action thermoelectric controller</td>
			<td>WAtronix Inc, CA, USA</td>
			<td style="width:244px;">DA12V-K-0</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">IR LED array</td>
			<td>Advanced Illumination, Rochester, VT, USA</td>
			<td style="width:244px;">AL4554-88024, PS24-TL</td>
			<td>2 LED arrays and one power supply</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Air conditioner Unit</td>
			<td style="width:397px;">Melcor Store</td>
			<td style="width:244px;">&#160;MAA280T-12</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Imaging system</td>
			<td style="width:397px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>(Quantity needed)</td>
		</tr>
		<tr height="31">
			<td height="31" style="height:31px;">Cosmicar/Pentax C21211TH (12.5mm F/1.4) C-mount Lens</td>
			<td style="width:397px;">B AND H PHOTO AND ELECTRONICS CORP, NY, USA</td>
			<td style="width:244px;">PEC21211 KP</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">CCXC-12P05N Interconnect Cable</td>
			<td style="width:397px;">B AND H PHOTO AND ELECTRONICS CORP, NY, USA</td>
			<td style="width:244px;">SOCCXC12P05N</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">DC-700 Camera Adapter</td>
			<td style="width:397px;">B AND H PHOTO AND ELECTRONICS CORP, NY, USA</td>
			<td style="width:244px;">SODC700</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">B+W 40,5 093 IR filter</td>
			<td style="width:397px;">B AND H PHOTO AND ELECTRONICS CORP, NY, USA</td>
			<td>65-072442</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TiFFEN 40.5mm Circular polarizer</td>
			<td style="width:397px;">Amazon</td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">IR Videocamera</td>
			<td style="width:397px;">Industrial Vision Source, FL, USA</td>
			<td>Sony XC-EI50 (SY-XC-E150)</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">USB video converter</td>
			<td>The Imagingsource, NC, USA</td>
			<td style="width:244px;">DFG/USB2-It</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">iFlySpy2 (fly tracking software)</td>
			<td style="width:397px;">Julian Brown, Stanford, Calfornia: julianrbrown@gmail.com</td>
			<td style="width:244px;">iFlySpy2</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:335px;">IC Capture 2.2 software</td>
			<td style="width:397px;">The Imagingsource, NC, USA (http://www.theimagingsource.com/en_US/products/software/iccapture/)</td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Miscellaneous</td>
			<td style="width:397px;"></td>
			<td style="width:244px;"></td>
			<td>(Quantity needed)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Dremel rotary tool</td>
			<td style="width:397px;">Dremel, Racine, WI, USA</td>
			<td style="width:244px;">Dremel 8000-03&#160;</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:335px;">Diamond-coated drill bits for glass cutting</td>
			<td style="width:397px;">Available from various suppliers; MSC industrial Supply Co, Melville, NY</td>
			<td style="width:244px;">90606328</td>
			<td>1</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

olfactory behaviors assayed by computer tracking of drosophila in a four-quadrant olfactometer

אתגר מרכזי בנוירוביולוגיה הוא להבין כיצד מעגלים עצביים לתפקד להנחות התנהגויות בעלי חיים מתאימות. תסיסנית היא מערכת מודל מצוינת עבור חקירות כאלה בשל ההתנהגויות המורכבות שלה, טכניקות גנטיות חזקות, ומערכת עצבים קומפקטית. מבחני התנהגות מעבדה כבר זמן רב בשימוש עם תסיסנית לדמות תכונות של הסביבה הטבעית לחקור את המנגנונים העצביים שבבסיס את ההתנהלויות (למשל phototaxis, chemotaxis, למידה חושית וזיכרון) 1-3. עם הזמינות האחרונות של אוספים גדולים של קווי תסיסנית מהונדס כי תווית תת עצביים ספציפיים, מבחני התנהגות לקחו על תפקיד בולט לקשר נוירונים עם התנהגויות 4-11. פרדיגמות צדדית לשחזור, יחד עם השגרה חישובית הבסיסית לניתוח נתונים, הן הכרחיות עבור בדיקות מהירות של קווים לטוס מועמד עם genotyp השונהes. שימושי במיוחד הם setups גמישים במספר לחיות ניסוי, משך הניסויים והטבע בגירויים מוצגים. את assay של בחירה צריך גם להפיק נתונים לשחזור כי הוא קל לרכוש ולנתח. כאן, אנו מציגים תיאור מפורט של מערכת ופרוטוקול עבור assaying תגובות התנהגותיות של תסיסנית זבובים בתוך זירת ארבעה שדה גדולה. ההתקנה משמשת כאן assay תגובות של זבובים לגירוי חוש ריח יחיד; עם זאת, אותה התכנית ההתקנה עשויה להיות שונה כדי לבדוק הרחה מרובה, גירויים חזותיים או optogenetic, או שילוב של אלה. התקנת אולפקטומטר מתעדת את הפעילות של אוכלוסיות זבוב להגיב לריחות, ושיטות אנליטיות חישובית מוחלות לכמת התנהגויות זבוב. הנתונים הנאספים מנותחים לקבל לקריאה מתוך מהירה של ריצת ניסיוני, אשר הינה הכרחית עבור איסוף נתונים יעיל אופטימיזציה של תנאי הניסוי.

רשומות assay אולפקטומטר הארבעה ברבע ומנתחות את פעילות הליכת זבובים רבים על פני שטח גדול התנהגותי. יכולים להיות הציגו ניחוחות לתוך הנחלים-האוויר שנכנסים אחת, שתיים, שלוש, או כל ארבעה רביעים. בהעדר ריחות, הזבובים יהיה לנוע בחופשיות בין כל ארבעת הרביעים. ?...

Watch this Scientific Journal Video about Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer at JoVE.com

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

We describe here a behavioral setup and data analysis method for assaying olfactory responses of up to 100 vinegar flies (Drosophila melanogaster). This system may be used with single or multiple olfactory stimuli, and adaptable for optogenetic activation or silencing of neuronal subsets.

התנהגויות חוש הריח assayed ידי מעקב ממוחשב של<em&gt; תסיסנית</em&gt; בתוך אולפקטומטר ארבעה-רביע

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an ...

olfactory-behaviors-assayed-computer-tracking-drosophila-four

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

15.6K Views.  Johns Hopkins University School of Medicine. We describe here a behavioral setup and data analysis method for assaying olfactory responses of up to 100 vinegar flies (Drosophila melanogaster). This system may be used with single or multiple olfactory stimuli, and adaptable for optogenetic activation or silencing of neuronal subsets.

Video: Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

Combining Computer Game-Based Behavioural Experiments With High-Density EEG and Infrared Gaze Tracking

Experimental paradigms are valuable insofar as the timing and other parameters of their stimuli are well specified and controlled, and insofar as they yield data relevant to the cognitive processing that occurs under ecologically valid conditions. These two goals often are at odds, since well controlled stimuli often are too repetitive to sustain subjects' motivation. Studies employing electroencephalography (EEG) are often especially sensitive to this dilemma between ecological validity and experimental control: attaining sufficient signal-to-noise in physiological averages demands large numbers of repeated trials within lengthy recording sessions, limiting the subject pool to individuals with the ability and patience to perform a set task over and over again. This constraint severely limits researchers' ability to investigate younger populations as well as clinical populations associated with heightened anxiety or attentional abnormalities. Even adult, non-clinical subjects may not be able to achieve their typical levels of performance or cognitive engagement: an unmotivated subject for whom an experimental task is little more than a chore is not the same, behaviourally, cognitively, or neurally, as a subject who is intrinsically motivated and engaged with the task. A growing body of literature demonstrates that embedding experiments within video games may provide a way between the horns of this dilemma between experimental control and ecological validity. The narrative of a game provides a more realistic context in which tasks occur, enhancing their ecological validity (Chaytor &amp; Schmitter-Edgecombe, 2003). Moreover, this context provides motivation to complete tasks. In our game, subjects perform various missions to collect resources, fend off pirates, intercept communications or facilitate diplomatic relations. In so doing, they also perform an array of cognitive tasks, including a Posner attention-shifting paradigm (Posner, 1980), a go/no-go test of motor inhibition, a psychophysical motion coherence threshold task, the Embedded Figures Test (Witkin, 1950, 1954) and a theory-of-mind (Wimmer &amp; Perner, 1983) task. The game software automatically registers game stimuli and subjects' actions and responses in a log file, and sends event codes to synchronise with physiological data recorders. Thus the game can be combined with physiological measures such as EEG or fMRI, and with moment-to-moment tracking of gaze. Gaze tracking can verify subjects' compliance with behavioural tasks (e.g. fixation) and overt attention to experimental stimuli, and also physiological arousal as reflected in pupil dilation (Bradley et al., 2008). At great enough sampling frequencies, gaze tracking may also help assess covert attention as reflected in microsaccades - eye movements that are too small to foveate a new object, but are as rapid in onset and have the same relationship between angular distance and peak velocity as do saccades that traverse greater distances. The distribution of directions of microsaccades correlates with the (otherwise) covert direction of attention (Hafed &amp; Clark, 2002).

Procedures for recording high-density EEG and gaze data during computer game-based cognitive tasks are described. Using a video game to present cognitive tasks enhances ecological validity without sacrificing experimental control.

משחק מחשב המבוסס על שילוב של ניסויים ההתנהגות עם מעקב צפיפות גבוהה מבט EEG ו אינפרא אדום

Experimental paradigms are valuable insofar as the timing and other parameters of their stimuli are well specified and controlled, and insofar as they ...

Assessment of Social Interaction Behaviors

Social interactions are a fundamental and adaptive component of the biology of numerous species. Social recognition is critical for the structure and stability of the networks and relationships that define societies. For animals, such as mice, recognition of conspecifics may be important for maintaining social hierarchy and for mate choice 1.
A variety of neuropsychiatric disorders are characterized by disruptions in social behavior and social recognition, including depression, autism spectrum disorders, bipolar disorders, obsessive-compulsive disorders, and schizophrenia. Studies of humans as well as animal models (e.g., Drosophila melanogaster, Caenorhabditis elegans, Mus musculus, Rattus norvegicus) have identified genes involved in the regulation of social behavior 2. To assess sociability in animal models, several behavioral tests have been developed (reviewed in 3). Integrative research using animal models and appropriate tests for social behavior may lead to the development of improved treatments for social psychopathologies.
The three-chamber paradigm test known as Crawley's sociability and preference for social novelty protocol has been successfully employed to study social affiliation and social memory in several inbred and mutant mouse lines (e.g. 4-7). The main principle of this test is based on the free choice by a subject mouse to spend time in any of three box's compartments during two experimental sessions, including indirect contact with one or two mice with which it is unfamiliar. To quantitate social tendencies of the experimental mouse, the main tasks are to measure a) the time spent with a novel conspecific and b) preference for a novel vs. a familiar conspecific. Thus, the experimental design of this test allows evaluation of two critical but distinguishable aspects of social behavior, such as social affiliation/motivation, as well as social memory and novelty. "Sociability" in this case is defined as propensity to spend time with another mouse, as compared to time spent alone in an identical but empty chamber 7. "Preference for social novelty" is defined as propensity to spend time with a previously unencountered mouse rather than with a familiar mouse 7. This test provides robust results, which then must be carefully analyzed, interpreted and supported/confirmed by alternative sociability tests. In addition to specific applications, Crawley's sociability test can be included as an important component of general behavioral screen of mutant mice.

Here we describe a detailed protocol for examination of sociability in mice by using Crawley's sociability and preference for social novelty test. We describe the advantages and possible applications for this procedure, including critical details important for correct interpretation of the results.

הערכת התנהגויות אינטראקציה חברתית

Social interactions are a fundamental and adaptive component of the biology of numerous species. Social recognition is critical for the structure and ...

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

In the following we describe the methodological details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with genetic interference, provides a handle to analyze the neuronal and molecular fundamentals of specifically associative learning in a simple larval brain.
Organisms can use past experience to adjust present behavior. Such acquisition of behavioral potential can be defined as learning, and the physical bases of these potentials as memory traces1-4. Neuroscientists try to understand how these processes are organized in terms of molecular and neuronal changes in the brain by using a variety of methods in model organisms ranging from insects to vertebrates5,6. For such endeavors it is helpful to use model systems that are simple and experimentally accessible. The Drosophila larva has turned out to satisfy these demands based on the availability of robust behavioral assays, the existence of a variety of transgenic techniques and the elementary organization of the nervous system comprising only about 10,000 neurons (albeit with some concessions: cognitive limitations, few behavioral options, and richness of experience questionable)7-10.
Drosophila larvae can form associations between odors and appetitive gustatory reinforcement like sugar11-14. In a standard assay, established in the lab of B. Gerber, animals receive a two-odor reciprocal training: A first group of larvae is exposed to an odor A together with a gustatory reinforcer (sugar reward) and is subsequently exposed to an odor B without reinforcement 9. Meanwhile a second group of larvae receives reciprocal training while experiencing odor A without reinforcement and subsequently being exposed to odor B with reinforcement (sugar reward). In the following both groups are tested for their preference between the two odors. Relatively higher preferences for the rewarded odor reflect associative learning - presented as a performance index (PI). The conclusion regarding the associative nature of the performance index is compelling, because apart from the contingency between odors and tastants, other parameters, such as odor and reward exposure, passage of time and handling do not differ between the two groups9.

Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae

Drosophila larvae are able to associate odor stimuli with gustatory reward. Here we describe a simple behavioral paradigm that allows the analysis of appetitive associative olfactory learning.

למידה אסוציאטיבית הרחה באפטטיבית<em&gt; דרוזופילה</em&gt; זחלים

In the following we describe the methodological  details of appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae. The setup, in combination with ...

Drosophila Adult Olfactory Shock Learning

Drosophila have been used in classical conditioning experiments for over 40 years, thus greatly facilitating our understanding of memory, including the elucidation of the molecular mechanisms involved in cognitive diseases1-7. Learning and memory can be assayed in larvae to study the effect of neurodevelopmental genes8-10 and in flies to measure the contribution of adult plasticity genes1-7. Furthermore, the short lifespan of Drosophila facilitates the analysis of genes mediating age-related memory impairment5,11-13. The availability of many inducible promoters that subdivide the Drosophila nervous system makes it possible to determine when and where a gene of interest is required for normal memory as well as relay of different aspects of the reinforcement signal3,4,14,16.
Studying memory in adult Drosophila allows for a detailed analysis of the behavior and circuitry involved and a measurement of long-term memory15-17. The length of the adult stage accommodates longer-term genetic, behavioral, dietary and pharmacological manipulations of memory, in addition to determining the effect of aging and neurodegenerative disease on memory3-6,11-13,15-21.
Classical conditioning is induced by the simultaneous presentation of a neutral odor cue (conditioned stimulus, CS+) and a reinforcement stimulus, e.g., an electric shock or sucrose, (unconditioned stimulus, US), that become associated with one another by the animal1,16. A second conditioned stimulus (CS-) is subsequently presented without the US. During the testing phase, Drosophila are simultaneously presented with CS+ and CS- odors. After the Drosophila are provided time to choose between the odors, the distribution of the animals is recorded. This procedure allows associative aversive or appetitive conditioning to be reliably measured without a bias introduced by the innate preference for either of the conditioned stimuli. Various control experiments are also performed to test whether all genotypes respond normally to odor and reinforcement alone.

Drosophila Adult Olfactory Shock Learning

The method to measure adult Drosophila associative memory is described. The assay is based on the ability of the fly to associate an odor presented with a negative reinforcer (electric shock) and then recall this information at a later time, allowing memory to be measured.

דרוזופילה מבוגרים חוש הריח הלם למידה

Drosophila have been used in classical conditioning experiments for over 40 years, thus greatly facilitating our understanding of memory, including the ...

A Computer-assisted Multi-electrode Patch-clamp System

The patch-clamp technique is today the most well-established method for recording electrical activity from individual neurons or their subcellular compartments. Nevertheless, achieving stable recordings, even from individual cells, remains a time-consuming procedure of considerable complexity. Automation of many steps in conjunction with efficient information display can greatly assist experimentalists in performing a larger number of recordings with greater reliability and in less time. In order to achieve large-scale recordings we concluded the most efficient approach is not to fully automatize the process but to simplify the experimental steps and reduce the chances of human error while efficiently incorporating the experimenter's experience and visual feedback. With these goals in mind we developed a computer-assisted system which centralizes all the controls necessary for a multi-electrode patch-clamp experiment in a single interface, a commercially available wireless gamepad, while displaying experiment related information and guidance cues on the computer screen. Here we describe the different components of the system which allowed us to reduce the time required for achieving the recording configuration and substantially increase the chances of successfully recording large numbers of neurons simultaneously.

Multi-electrode patch-clamp recordings constitute a complex task. Here we show how, by automating of many of the experimental steps, it is possible to accelerate the process leading to qualitative improvement in performance and number of recordings.

מערכת תיקון מהדק Multi-אלקטרודה בסיוע מחשב

The patch-clamp technique is today the most  well-established method for recording electrical activity from individual  neurons or their subcellular ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this information to the brain. As such, determining how olfactory information is transferred to the brain, modifying both perception and behavior, merits investigation. Interestingly, there is emerging evidence that cellular transduction and transcriptional factors are involved in the diversification of olfactory receptor neuron. Here we provide a robust whole mount immunological labeling method to assay in vivo olfactory receptor neuron organization. Using this method, we identified all olfactory receptor neurons with anti-ELAV antibody, a known pan-neural marker and Or49a-mCD8::GFP, an olfactory receptor neuron specifically expressed in Nba neuron using anti-GFP antibody.

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Herein we describe the process of whole mount immunostaining of Drosophila antennae, which enables us to better understand the molecular mechanisms involved in the diversification of olfactory receptor neurons (ORN)s.

הר immunolabeling השלם של חוש הריח קולטן נוירונים<em&gt; דרוזופילה</em&gt; אנטנה

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

A Low-cost Method for Analyzing Seizure-like Activity and Movement in Drosophila

Video tracking systems have been used widely to analyze Drosophila melanogaster movement and detect various abnormalities in locomotive behavior. While these systems can provide a wealth of behavioral information, the cost and complexity of these systems can be prohibitive for many labs. We have developed a low-cost assay for measuring locomotive behavior and seizure movement in D. melanogaster. The system uses a web-cam to capture images that can be processed using a combination of inexpensive and free software to track the distance moved, the average velocity of movement and the duration of movement during a specified time-span. To demonstrate the utility of this system, we examined a group of D. melanogaster mutants, the Bang-sensitive (BS) paralytics, which are 3-10 times more susceptible to seizure-like activity (SLA) than wild type flies. Using this novel system, we were able to detect that the BS mutant bang senseless (bss) exhibits lower levels of exploratory locomotion in a novel environment than wild type flies. In addition, the system was used to identify that the drug metformin, which is commonly used to treat type II diabetes, reduces the intensity of SLA in the BS mutants.

A Low-cost Method for Analyzing Seizure-like Activity and Movement in Drosophila

Using a webcam and a combination of free and inexpensive software programs, locomotive patterns in Drosophila melanogaster can be analyzed to detect differences in the speed, distance, and time of various motor activities.

שיטה בעלות נמוכה לניתוח כמו פעילות תפיסה ותנועה ב<em&gt; דרוזופילה</em

Video tracking systems have been used widely to analyze Drosophila melanogaster movement and detect various abnormalities in locomotive behavior. While ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first neural circuit in the AOS pathway, called the accessory olfactory bulb (AOB), plays an important role in establishing sex-typical behaviors such as territorial aggression and mating. This small (&#60;1 mm3) circuit possesses the capacity to distinguish unique behavioral states, such as sex, strain, and stress from chemosensory cues in the secretions and excretions of conspecifics. While the compact organization of this system presents unique opportunities for recording from large portions of the circuit simultaneously, investigation of sensory processing in the AOB remains challenging, largely due to its experimentally disadvantageous location in the brain. Here, we demonstrate a multi-stage dissection that removes the intact AOB inside a single hemisphere of the anterior mouse skull, leaving connections to both the peripheral vomeronasal sensory neurons (VSNs) and local neuronal circuitry intact. The procedure exposes the AOB surface to direct visual inspection, facilitating electrophysiological and optical recordings from AOB circuit elements in the absence of anesthetics. Upon inserting a thin cannula into the vomeronasal organ (VNO), which houses the VSNs, one can directly expose the periphery to social odors and pheromones while recording downstream activity in the AOB. This procedure enables controlled inquiries into AOS information processing, which can shed light on mechanisms linking pheromone exposure to changes in behavior.

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

The mouse accessory olfactory bulb (AOB) has been difficult to study in the context of sensory coding. Here, we demonstrate a dissection that produces an ex vivo preparation in which AOB neurons remain functionally connected to their peripheral inputs, facilitating research into information processing of mouse pheromones and kairomones.

Ex Vivo הכנות של הנורה Vomeronasal האיברים ואבזר חוש הריח הפגועה

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

Acquisition of High-Quality Digital Video of Drosophila Larval and Adult Behaviors from a Lateral Perspective

Drosophila melanogaster is a powerful experimental model system for studying the function of the nervous system. Gene mutations that cause dysfunction of the nervous system often produce viable larvae and adults that have locomotion defective phenotypes that are difficult to adequately describe with text or completely represent with a single photographic image. Current modes of scientific publishing, however, support the submission of digital video media as supplemental material to accompany a manuscript. Here we describe a simple and widely accessible microscopy technique for acquiring high-quality digital video of both Drosophila larval and adult phenotypes from a lateral perspective. Video of larval and adult locomotion from a side-view is advantageous because it allows the observation and analysis of subtle distinctions and variations in aberrant locomotive behaviors. We have successfully used the technique to visualize and quantify aberrant crawling behaviors in third instar larvae, in addition to adult mutant phenotypes and behaviors including grooming.

Acquisition of High-Quality Digital Video of Drosophila Larval and Adult Behaviors from a Lateral Perspective

Here we describe a simple and widely accessible microscopy technique to acquire high-quality digital video of Drosophila adult and larval mutant phenotypes from a lateral perspective.

רכישת באיכות גבוהה וידאו דיגיטלי של<em&gt; דרוזופילה</em&gt; Behaviors הזחל ומבוגרים מנקודת מבט רוחבי

Drosophila melanogaster is a powerful experimental model system for studying the function of the nervous system. Gene mutations that cause dysfunction of ...

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

The ability to measure neurotransmitter release on a rapid time scale allows patterns of neurotransmission to be linked to specific behaviors or manipulations; a powerful tool in elucidating underlying mechanisms and circuitry. While the technique of microdialysis has been used for decades to measure nearly any analyte of interest in the brain, this technique is limited in temporal resolution. Alternatively, fast scan cyclic voltammetry is both temporally precise and extremely sensitive; however, because this technically difficult method relies on the electroactivity of the analyte of interest, the possibility to detect nonelectroactive substances (e.g., the neurotransmitter glutamate) is eliminated. This paper details the use of a turn-key system that combines fixed-potential amperometry and enzymatic biosensing to measure both electroactive and nonelectroactive neurotransmitters with temporal precision. The pairing of these two powerful techniques allows for the measurement of both tonic and phasic neurotransmission with relative ease, and permits recording of multiple neurotransmitters simultaneously. The aim of this manuscript is to demonstrate the process of measuring dopamine and glutamate neurotransmission in vivo using a naturally rewarding behavior (i.e., sexual behavior) in female hamsters, with the ultimate goal of displaying the technical feasibility of this assay for examining other behaviors and experimental paradigms.

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

This paper details the use of fixed-potential amperometric recordings using carbon fiber electrodes and enzymatic biosensor technology to measure the release of dopamine and glutamate with high temporal resolution during natural rewarding behavior in the female hamster.

התנהגויות חוש הריח assayed ידי מעקב ממוחשב של

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

משחק מחשב המבוסס על שילוב של ניסויים ההתנהגות עם מעקב צפיפות גבוהה מבט EEG ו אינפרא אדום

הערכת התנהגויות אינטראקציה חברתית

למידה אסוציאטיבית הרחה באפטטיבית

דרוזופילה מבוגרים חוש הריח הלם למידה

מערכת תיקון מהדק Multi-אלקטרודה בסיוע מחשב

הר immunolabeling השלם של חוש הריח קולטן נוירונים

שיטה בעלות נמוכה לניתוח כמו פעילות תפיסה ותנועה ב

Ex Vivo הכנות של הנורה Vomeronasal האיברים ואבזר חוש הריח הפגועה

רכישת באיכות גבוהה וידאו דיגיטלי של

מדידת In Vivo שינויים עצביים חוץ-תאית במהלך טבעי מתגמל בהתנהגויות של אוגרים סוריים הנשי