The authors declare that they have no competing financial interests.

בעלי חיים הם שוכנו במתקן הפתוגן ללא מחסום. כל בעלי החיים לקבל טיפול אנושי בקנה אחד עם &quot;המנהלים של מעבדה טיפול בבעלי חיים&quot;, שגובשו על ידי האגודה הלאומית למחקר רפואי &quot;ואת&quot; המדריך לטיפול והשימוש בחי מעבדה &quot;שהוכנו על ידי האקדמיה הלאומית למדעים ופורסמו על ידי הלאומי מכוני בריאות (NIH הפרסום לא. 86-23, מתוקנים 1985). כל הניסויים אושרו על ידי המשרד האוסטרי של חינוך, מדע ותרבות. .1 נמען הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את החיה הנמען עם הזרקת im של xylazine (5 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף) וקטמין (100 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל השיער באזור צוואר הרחם לרוחבו של בעל החיים ולשפשף את שדה ניתוח שלוש פעמים באמצעות chlorhexdine. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את העכבר בעמדת פרקדן על שדה הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבא לעשות חתך בעור מצוואר incision ללסת התחתונה הימנית התחתונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהמשך לכך, בבוטות לגייס את הווריד הנכון החיצוני הצוואר (EJV) ולחלק את הסניפים בין חיבורי אותיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ואז לחלק את EJV בין חיבורי אותיות והקפד להשאיר מספיק אורך לאוורט הגדם הפרוקסימלי מעל גוף השרוול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבא להסיר את האונה הימנית של בלוטת submandibular. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשקת הוורידים להעביר את הקצה הפרוקסימלי של EJV דרך שרוול פוליאתילן ולתקן אותה בידית של השרוול עם מהדק מיקרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הקשירה בסוף של כלי השיט, אוורט לומן על השרוול ולתקן את זה עם 8-0 משי לולאה (איור 1 א). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהמשך לכך יחצה את שריר sternocleidomastoid תקין עם כויה דו קוטבית כדי לקבל גישה לעורק התרדמה המשותפת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבא לגייס את עורק תרדמה המשותף ולחתוך את הספינה בין חיבורי האותיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבא לגייס את עורק תרדמה המשותף ולחתוך את הספינה בין חיבורי האותיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Pass דיססוף הטל של כלי דרך השרוול ולתקן אותה עם מהדק העורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הקשירה בסוף של כלי השיט ולהתנפח לומן באמצעות dilatators כלי דם. בשלב הבא, באנלוגיה לEJV, אוורט העורק מעל השרוול ולתקן את זה עם לולאת 8-0 משי. </li></ol> רכש לב .2 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכבר התורם עם הזרקת im של xylazine (5 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף) וקטמין (100 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף). ואז להסיר את כל השיער באזור הבטן של בעלי החיים. לשפשף שדה שלוש זמן הניתוח באמצעות chlorhexdine. המקום הבא בעכבר במצב שכיבה על המגרש האופרטיבי כפי שתואר לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות חתך בבטן קו האמצע, לחזור בו מהקרביים עם Q-טיפים לשמאל במטרה לחשוף את נחות הווריד הנבוב (IVC). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק 400 μl של 1: פתרון sodium- 4 heparin- לIVC לheparinization. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע פתיחת בית החזה ולקפל את דופן בית החזה הקדמית מעל cranially להשיג ACCESS ללב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב הבא, להסיר את בלוטת התימוס ולעשות אוורור חתכים בווריד הנבוב העליון ימין ועל השמאל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהמשך לכך, ינקב לבו באופן מדרדר עם 4 מעלות צלזיוס HTK פתרון על ידי cannulation של קשת אב העורקים עם מזרק G 27 ברמה של סניף brachiocephalic. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ולקשור את הווריד הנבוב הנחות ומעולה עם 8-0 משי ולחלק אותם distally ליגטורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבא לחלק את קשת אב העורקים ברמה של cannulation הקודם ולנתח חופשי תא המטען ריאתי ולחלק אותו כמה שיותר רחוק distally ככל האפשר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות כך, לקשור את ורידי ריאה עם קשירה בתפזורת ולחלק אותם distally ליגטורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבסוף, להסיר את הלב מאתר התורם ולאחסן אותו ב4 מעלות צלזיוס פתרון HTK (איור 1b). </li></ol> .3 השרשה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את שתל לב באזור צוואר נמען במורד עמדה הפוכה (איור 1 ג </strong&gt;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבא למשוך את תא המטען ריאתי של הלב על פני מבנה שרוול וריד של הנמען ולתקן את זה עם משי לולאה (1D איור). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע ההשקה בין אב העורקים של השתל והעורק מופנה החוצה של החיה הנמען באותו אופן (איור 1e). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהמשך לכך, להסיר את מהדק הוורידים ראשון, ואחריו את המהדק העורק. לב reperfused ומתחיל לפעום בתוך 1-2 דק &#39;. במהלך reperfusion ללחלח את הלב עם מי מלח חמים (35 מעלות צלזיוס). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבסוף לסגור את פצע הניתוח עם 6-0 תפרים רציפים (איור 1e). </li></ol> .4 לאחר ניתוח טיפול, Endpoint <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תן עד 0.3 מ&quot;ל ip מלח הרגיל לאחר הניתוח להחלפת נוזל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה תחת מנורת חום עד שהתעורר מהרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע ער, להחזיר את בעל החיים למתקן הדיור שבו הם מקבלים כרצונך מזון ומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לmiכאב המזער במהלך 7 הימים לאחר הניתוח הראשונים לנהל carprofen (4mg / קילוגרם כל תת עורי 12 שעות (sc). בנוסף, לתת Buprenorphin (0.1 מ&quot;ג / קילוגרם) מייד אחרי הפעולה בכל שעה 12 במשך 5 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשיג המשקל (גרם) של כל שבוע חיה נמען להעריך לצריכת תזונה נכונה. אם יש ראיות של יותר מ 10-15% ירידה במשקל בהשוואה למשקל בניתוח עדכני, אדישות, משתק או גב מאוד כפוף, להקריב החיה באמצעות שאיפת isoflurane מסוף לפני שהגיע לנקודת הסיום הקלינית. גם להקריב את החיה אחרי הלב נדחה. </li></ol>

<ol>
	<li>Brandacher, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tetrahydrobiopterin+compounds+prolong+allograft+survival+independently+of+their+effect+on+nitric+oxide+synthase+activity.">Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity.</a> Transplantation. 81, 583-589 (2006).</li><li>Schneeberger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+secretory+leukocyte+protease+inhibitor+(SLPI)+on+ischemia/reperfusion+injury+in+cardiac+transplantation.">The effect of secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) on ischemia/reperfusion injury in cardiac transplantation.</a> Am J Transplant. 8, 773-782 (2008).</li><li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IDO+and+regulatory+T+cell+support+are+critical+for+cytotoxic+T+lymphocyte-associated+Ag-4+Ig-mediated+long-term+solid+organ+allograft+survival.">IDO and regulatory T cell support are critical for cytotoxic T lymphocyte-associated Ag-4 Ig-mediated long-term solid organ allograft survival.</a> JImmunol. 188, 37-46 (2012).</li><li>Yamashita, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+oxygenase-1+is+essential+for+and+promotes+tolerance+to+transplanted+organs.">Heme oxygenase-1 is essential for and promotes tolerance to transplanted organs.</a> FASEB J. 20, 776-778 (2006).</li><li>Kienzl, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomic+profiling+of+acute+cardiac+allograft+rejection.">Proteomic profiling of acute cardiac allograft rejection.</a> Transplantation. 88, 553-560 (2009).</li><li>Aurora, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Registry+of+the+International+Society+for+Heart+and+Lung+Transplantation:+tenth+official+pediatric+lung+and+heart/lung+transplantation+report--2007.">Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: tenth official pediatric lung and heart/lung transplantation report--2007.</a> J Heart Lung Transplant. 26, 1223-1228 (2007).</li><li>H&#228;yry, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+allograft+vasculopathy+new+strategies+for+drug+development.">Chronic allograft vasculopathy new strategies for drug development.</a> Transplant Proc. 30, 3989-3990 (1998).</li><li>Hosenpud, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+mechanisms+of+cardiac+allograft+vasculopathy+an+update.">Immune mechanisms of cardiac allograft vasculopathy an update.</a> Transpl Immunol. 1, 237-249 (1993).</li><li>Libby, P., Pober, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+rejection.">Chronic rejection.</a> Immunity. 14, 387-397 (2001).</li><li>Kouwenhoven, E. A., de Bruin, R. W., Heemann, U. W., Marquet, R. L., Ijzermans, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Late+graft+dysfunction+after+prolonged+cold+ischemia+of+the+donor+kidney+inhibition+by+cyclosporine.">Late graft dysfunction after prolonged cold ischemia of the donor kidney inhibition by cyclosporine.</a> Transplantation. 68, 1004-1010 (1999).</li><li>Kouwenhoven, E. A., Ijzermans, J. N., de Bruin, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Etiology+and+pathophysiology+of+chronic+transplant+dysfunction.">Etiology and pathophysiology of chronic transplant dysfunction.</a> Transpl Int. 13, 385-401 (2000).</li><li>Chen, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+of+cervical+heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).</li><li>Huang, X., Chen, D., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[A+modified+model+of+cervical+heterotopic+cardiac+transplantation+for+chronic+rejection+research].">[A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research].</a> Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22, 1508-1510 (2008).</li><li>Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+vascularized+murine+cardiac+transplantation+to+study+graft+arteriopathy.">Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy.</a> Nat Protoc. 2, 471-480 (2007).</li><li>Wang, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+murine+cardiac+allograft+arteriopathy+by+long-term+blockade+of+CD40-CD154+interactions.">Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions.</a> Circulation. 105, 1609-1614 (2002).</li><li>Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+mouse+cervical+heart+transplantation+using+a+cuff+technique.">Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique.</a> Transplantation. 51, 896-898 (1991).</li><li>Tomita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice.">Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 64, 1598-1601 (1997).</li><li>Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+study+on+suture+versus+cuff+anastomosis+in+mouse+cervical+cardiac+transplant.">A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant.</a> Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).</li><li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primarily+vascularized+allografts+of+hearts+in+mice.+The+role+of+H-2D,+H-2K,+and+non-H-2+antigens+in+rejection.">Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li><li>Zimmermann, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat+and+some+studies+of+the+immunologic+responses+to+fully+allogeneic+liver+grafts.">Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts.</a> Transplant Proc. 11, 571-577 (1979).</li><li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+pretreatment+with+tetrahydrobiopterin+saves+pancreatic+isografts+from+ischemia+reperfusion+injury+in+a+mouse+model.">Donor pretreatment with tetrahydrobiopterin saves pancreatic isografts from ischemia reperfusion injury in a mouse model.</a> Am J Transplant. 10, 2231-2240 (2010).</li><li>Heron, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+accessory+cervical+heart+transplantation+in+rabbits+and+rats.">A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats.</a> Actapathologica et microbiologica Scandinavica Section A, Pathology. 79, 366-372 (1971).</li></ol>

This study has been supported by grant #207 of the &#8220;Medizinischer Forschungsfond Tirol&#8221;, grant #2010022010 of the &#8220;MUI-START F&#246;rderungsprogramm&#8221; of the Innsbruck Medical University.

דחייה של allografts כלי הדם כרוך שפע של צעדים שונים שניתן להעריך רק באמצעות מספיק במודלים חוץ גופית. תופעות כמו הרגישות של המקבלים, עיבוד אנטיגן באיברי הלימפה משניים אלא גם הבידול וההתפשטות של תאים חיסוניים המוסמכים הן טובים יותר מאופיינות in vivo. מודלים של בעלי ה?...

השתלת לב מייצגת את טיפול בחירה בחולים הסובלים ממחלות לב בשלב סופי שונות. התקדמות בטכניקות כירורגיות, טיפול מונע יעיל יותר של זיהומים, ומשטרי דיכוי המערכת החיסונית רומן הביאה תוצאה בשיפור ניכרת של השתלת איברי 6. עם זאת, הישרדות שתל לטווח ארוך לא השתפרה בקפדנות בשנים האחרונות 7. הדחייה כרונית, מאופיינת בטרשת עורקת השתלה ממשיכה להיות מכשול עיקרי להישרדות שתל לטווח ארוך 8-11. המודל של השתלת לב heterotopic בעכברים מספק כלי חשוב ותקף לניתוח של מנגנון חיסוני במהלך אקוטי כמו גם דחייה כרונית 12-15. נכון להיום מודל ההשתלה השכיח ביותר היא עדיין השתלת לב עכבר הבטן תוך שימוש בטכניקת התפר. אב העורקים העולה של לב תורם anastomosed לאב העורקים bdominal ועורק הריאה הוא anastomosed לווריד הנבוב הנחות של הנמען. חלק ניכר מהקושי מייקרו של מודל התפר מבוסס על גודלו הקטן של כלי השיט, אשר נתפרו 16,17. בניגוד למודל תפר הלב ממוקם באזור הצוואר של הנמען בי וריד הצוואר החיצוני anastomosed לעורק הריאה ועורק תרדמה המשותף אב העורקים של התורם. הרציונל של פיתוח מודל השתלת לב בצוואר הרחם תוך שימוש בטכניקת השרוול היה לי מודל חיה, אשר מאפשר השגת אחוזי הצלחה גבוהה עם מיומנויות מייקרו בסיסיות שתאפשר יישום רחב של מודל זה. היתרונות העיקריים של שיטה זו הם ההשקה מתרחשת באופן משמעותי פחות קשורות לסיבוכים כמו דימומים ופקקת בהשוואה למודל התפר 18.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Yasargil Clip Mini Permanent 7mm</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>FE720K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro vessel clip</td>
			<td>S &#38; T</td>
			<td>B1 00396 V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14075-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Vesseldilatator</td>
			<td rowspan="2">S &#38; T</td>
			<td rowspan="2">D-5a.2 00125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>Dumont 11271- 30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clipapplicator</td>
			<td>S &#38; T</td>
			<td>CAF-4 00072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microvessel clip</td>
			<td>S &#38; T</td>
			<td>B1 00396 V</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique

<html> מודלים של עכברים הם בעלי עניין מיוחד במחקר מאז מגוון רחב של נוגדנים חד שבטיים ומוגדרים באופן מסחרי טהור וזני נוקאאוט זמינים לביצוע מכניסטית במחקרי vivo. בעוד מודלים השתלת לב תוך שימוש בטכניקת תפר היו ראשון שפותחו בהצלחה בחולדות, התרגום למקבילה עכברית משומשת באותה מידה נרחבת מעולם לא הושגה בשל המורכבות הטכנית של הליך מייקרו. בניגוד לכך, טכניקות שרוול שאינו תפר, גם פיתחו בתחילה בחולדות, הותאמו בהצלחה לשימוש בעכברי 1-3. טכניקה זו לrevascularization כוללת שני גדולים צעדי I) everting כלי המקבל על שרוול פוליאתילן; II) מושך את כלי התורם להשתלט על כלי שיט נמען everted לשעבר ומחזיק אותו במקום עם עניבה היקפית. זה מבטיח המשכיות של שכבת האנדותל, זמן פעולה קצר ושיעורי patency גבוהים מאוד 4. t &quot;&gt; שימוש בטכניקה זו להשקת כלי דם שבצעו יותר מ 1,000 השתלות לב בצוואר הרחם עם שיעור הצלחה כולל של 95%. לעורקי זרימה בעורק התרדמה המשותף וקשת אב העורקים הפרוקסימלי היו anastomosed וכתוצאה מכך זלוף מדרדר של הלב המושתל. לניקוז ורידי עורק הריאה של השתל היה anastomosed עם וריד הצוואר החיצוני של הנמען 5. במסמך זה, אנו מספקים פרטים נוספים בטכניקה זו כדי להשלים את הווידאו.

איור 2 מראה נתוני הישרדות נציג allografts לב מתורמי BALB / ג לאחר ההשתלה לתוך C57BL / 6 המקבלים תואמים MHC באופן מלא. לבבות נדחים ביום 7 ± 1 לאחר השתלה. מישוש אצבע של השתל המושתל הוא שיטה רגישה לגילוי כמובן תלויות בזמן של דחיית שתל. כל השתלות לב syngeneic מבוצעות בסדרה שלנו שרדו ל...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique at JoVE.com

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

מודל השתלת לב בצוואר הרחם העכברי הוא גם מתאים חיסוני, כמו גם מחקרי פציעת reperfusion איסכמיה. שינינו את התהליך תוך שימוש בטכניקת שרוול שאינו תפר וביצעו יותר מ 1,000 השתלות מוצלחות עם גישה זו. במסמך זה, אנו מספקים פרטים נוספים בטכניקה זו כדי להשלים את הווידאו.

עכברי צוואר הרחם לב השתלת דגם שימוש בטכניקת חפתים השתנה

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

murine-cervical-heart-transplantation-model-using-modified-cuff

Universidad de Cartagena UDEC

Research

JoVE Journal

Medicine

13.8K Views.  Innsbruck Medical University.  מודל השתלת לב בצוואר הרחם העכברי הוא גם מתאים חיסוני, כמו גם מחקרי פציעת reperfusion איסכמיה. שינינו את התהליך תוך שימוש בטכניקת שרוול שאינו תפר וביצעו יותר מ 1,000 השתלות מוצלחות עם גישה זו. במסמך זה, אנו מספקי?...

Video: Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Murine Model of Wound Healing

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. Impaired wound healing, which occurs in diabetic patients for example, can lead to severe unfavorable outcomes such as amputation. There is, therefore, an increasing impetus to develop novel agents that promote wound repair. The testing of these has been limited to large animal models such as swine, which are often impractical. Mice represent the ideal preclinical model, as they are economical and amenable to genetic manipulation, which allows for mechanistic investigation. However, wound healing in a mouse is fundamentally different to that of humans as it primarily occurs via contraction. Our murine model overcomes this by incorporating a splint around the wound. By splinting the wound, the repair process is then dependent on epithelialization, cellular proliferation and angiogenesis, which closely mirror the biological processes of human wound healing. Whilst requiring consistency and care, this murine model does not involve complicated surgical techniques and allows for the robust testing of promising agents that may, for example, promote angiogenesis or inhibit inflammation. Furthermore, each mouse acts as its own control as two wounds are prepared, enabling the application of both the test compound and the vehicle control on the same animal. In conclusion, we demonstrate a practical, easy-to-learn, and robust model of wound healing, which is comparable to that of humans.

A murine model of cutaneous wound healing that can be used to assess therapeutic compounds in physiological and pathophysiological settings.

מודל עכברי של ריפוי פצע

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed to improve/ameliorate the respiratory failure following high cervical spinal cord injury (SCI). Here we propose a murine pre-clinical model of high SCI at the cervical 2 (C2) metameric level to study diverse post-lesional respiratory neuroplasticity. The technique consists of a surgical partial injury at the C2 level, which will induce a hemiparalysis of the diaphragm due to a deafferentation of the phrenic motoneurons from the respiratory centers located in the brainstem. The contralateral side of the injury remains intact and allows the animal recovery. Unlike other SCIs which affect the locomotor function (at the thoracic and lumbar level), the respiratory function does not require animal motivation and the quantification of the deficit/recovery can be easily performed (diaphragm and phrenic nerve recordings, whole body ventilation). This pre-clinical C2 SCI model is a powerful, useful, and reliable pre-clinical model to study various respiratory and non-respiratory neuroplasticity events at different levels (molecular to physiology) and to test diverse putative therapeutic strategies which might improve the respiration in SCI patients.

Respiratory failure is the leading cause of death following a cervical spinal cord injury. Having a reproducible, quantifiable, and reliable pre-clinical animal model of respiratory failure induced by a partial cervical injury will help to understand the subsequent respiratory and non-respiratory neuroplasticity and allow testing putative repair strategies.

מודל Murine של חוט השדרה הצווארי פגיעה לחקר פוסט lesional הנשימה Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique was developed and reported in 2001 by Niimi. Described here are the techniques that have evolved over more than a decade in the hands of three surgeons (Plenter, Grazia, Pietra) in our center. These techniques are now being passed on to a younger generation of surgeons and researchers.
Based largely on the Niimi experience, the procedures used have evolved in the fine details - details which we will endeavor to relate here in such a way that others may be able to use this very useful model. Like Niimi, we have found that a video aid to learning is a priceless resource for the beginner.

The manuscript describes the steps required to perform the heterotopic heart transplant in the mouse.

טכניקת השתלות Murine Heterotopic לב

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed results. However, the cellular and molecular mechanisms of the neotissue development, valve thickening, and stenosis development are not researched extensively. To answer the above questions, we developed a murine heterotopic heart valve transplantation model. A heart valve was harvested from a valve donor mouse and transplanted to a heart donor mouse. The heart with a new valve was transplanted heterotopically to a recipient mouse. The transplanted heart showed its own heartbeat, independent of the recipient&#8217;s heartbeat. The blood flow was quantified using a high frequency ultrasound system with a pulsed wave Doppler. The flow through the implanted pulmonary valve showed forward flow with minimal regurgitation and the peak flow was close to 100 mm/sec. This murine model of heart valve transplantation is highly versatile, so it can be modified and adapted to provide different hemodynamic environments and/or can be used with various transgenic mice to study neotissue development in a tissue engineered heart valve.

In order to understand the cellular and molecular mechanisms underlying neotissue formation and stenosis development in tissue engineered heart valves, a murine model of heterotopic heart valve transplantation was developed. A pulmonary heart valve was transplanted to recipient using the heterotopic heart transplantation technique.

השתלה של הריאה Valve שימוש במודל עכבר של Heterotopic לב והשתלות

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each year. While several animal models exist for this procedure and mice are the species that is most commonly used. The reasons for using mice are the relative cost of using this species, the existence of many genetically defined strains that allow for the study of immune responses, and the existence of an extensive array of reagents that can be used to further define responses in this species. This model has been used to define factors in the cornea that are responsible for the relative immune privilege status of this tissue that enables corneal allografts to survive acute rejection in the absence of immunosuppressive therapy. It has also been used to define those factors that are most important in rejection of such allografts. Consequently, much of what we know concerning mechanisms of both corneal allograft acceptance and rejection are due to studies using a murine model of corneal transplantation. In addition to describing a model for acute corneal allograft rejection, we also present for the first time a model of late-term corneal allograft rejection.

Mice have been used as a model for studying many forms of transplantation, including corneal transplantation. We describe in this report a murine model for both acute and late-term corneal transplantation.

השתלת קרנית עכברית: דגם לחקר הצורה נפוצה ביותר של Solid השתלות איברים

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient&#8217;s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.

The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.

Heterotopic צוואר הרחם לב השתלה בעכברים

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the aorta in mice using the sleeve method was short and easy averaging 20 min, permitting studies of iso/allo grafts. The following article describes the aortic transplantation procedure used in our laboratory. The mice were anesthetized with a mixture of 1.5% volume isoflurane and 100% oxygen through a face mask. At this point, the segment of the aorta between the renal arteries and its bifurcation was separated from the vena cava, freely prepared and clampedat the proximal and distal segments with a single silk suture. Prior to the removal of the aorta, a saline solution containing heparin was injected into the inferior vena cava. Then the aorta was cut between the clamps and a saline heparin solution was used to flush the lumen. The sleeve technique with monofilament sutures was used in order to transplant the abdominal aorta in the orthotopic position.

We present an orthotopic aortic transplantation model using the sleeve technique in mice. It is a very rapid anastomosis method, which can be employed in studies of vascular disease.

בטכניקה שרוול במודל של עכברים של אבי העורקים השתלת - סרט הדרכה

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the availability of the widest range of molecular probes and reagents to perform in vivo as well as in vitro studies. Based on our experience with various murine transplantation models, we developed a heterotopic pancreas transplantation model in mice with the intent to analyze mechanisms underlying severe ischemia reperfusion injury-associated early graft damage. In contrast to previously described techniques using suture techniques, herein we describe a new procedure using a non-suture cuff technique. 
In recent years, we have performed more than 300 pancreas transplantations in mice with an overall success rate of &gt;90%, a success rate never described before in mouse pancreas transplantation. The backbone of this non-suture cuff technique for graft revascularization consists of two major steps: (I) pulling the recipient vessel over a polyethylene/polyamide cuff and fixing it with a circumferential ligature, and (II) placing the donor vessel over the everted recipient vessel and fixing it with a second circumferential ligature. The resultant continuity of the endothelial layer results in less thrombogenic lesions with high patency rates and, finally, high success rates.
In this model, arterial anastomosis is achieved by pulling the abdominal aorta of the donor graft over the everted common carotid artery of the recipient animal. Venous drainage of the graft is achieved by pulling the portal vein of the graft over the everted external jugular vein of the recipient. This manuscript provides details and crucial steps of the organ recovery and organ implantation procedures, which will allow researchers with microsurgical skills to perform the transplantation successfully in their laboratories.

Among abdominal solid organ transplantation, pancreatic grafts are prone to develop severe ischemia reperfusion injury-associated graft damage, leading eventually to early graft loss. This protocol describes a model of murine pancreas transplantation using a non-suture cuff technique, ideally suited for analyzing these early, deleterious damages.

העכבר מודל עבור השתלת לבלב בטכניקה השינוי הצמיד

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

מודל הפרה-קליני של השתלת לב אורתוטופית

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. However, only minor improvement in the long-term results of transplanted solid organs could be observed over the past decades. In this context, chronic allograft vasculopathy (CAV) still represents the leading cause of late organ failure in cardiac, renal and pulmonary transplantation.
Thus far, the underlying pathogenesis of CAV development remains unclear, explaining why effective treatment strategies are presently missing and emphasizing a need for relevant experimental models in order to study the underlying pathophysiology leading to CAV formation. The following protocol describes a murine heterotopic cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique. In this technique, a segment of the thoracic aorta is interpositioned in the right common carotid artery. With the use of the non-suture cuff technique, an easy to learn and reproducible model can be established, minimizing the possible heterogeneity of sutured vascular micro anastomoses.

Here, we present a protocol of heterotopic aortic transplantation in mice using the non-suture cuff technique in a cervical murine model. This model can be used to study the underlying pathology of chronic allograft vasculopathy (CAV) and can help evaluate new therapeutic agents in order to prevent its formation.

מורי צוואר הרחם מורנה השתלת מודל באמצעות שינוי שאינו תפר שיטה השרוול

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...