Surveillance des oscillations circadiennes à l’aide d’un rapporteur de bioluminescence dans les organoïdes

Notre champ de recherche actuel est d’étudier les rôles des rythmes circadiens dans la prolifération et la différenciation des cellules épithéliales intestinales. Nous essayons de déterminer si l’horloge circadienne régule la prolifération cellulaire et la différenciation des cellules souches intestinales. Ce protocole présente une méthode de surveillance en temps réel pour les études circadiennes dans des organoïdes tridimensionnels à l’aide d’un test de bioluminescence.

Contrairement à la réalisation de tests de bioluminescence dans une culture cellulaire bidimensionnelle conventionnelle, cette approche nous permet d’étudier les rythmes circadiens et leurs fonctions dans un modèle organoïde plus pertinent sur le plan physiologique. Nos résultats montrent des rythmes circadiens perturbés dans des conditions enrichies en cellules souches tout en démontrant des oscillations circadiennes robustes dans les organoïdes intestinaux humains différenciés, suggérant un remodelage de la machinerie de l’horloge circadienne des cellules souches aux cellules différenciées. L’utilisation d’organoïdes dérivés de patients avec des rapporteurs bioluminescents circadiens nous aidera à faire progresser notre compréhension des rythmes circadiens dans les organes périphériques et différents états pathologiques.