Isolement semi-automatisé de la fraction vasculaire stromale à partir de tissu adipeux blanc murin à l’aide d’un dissociateur tissulaire

Nous nous intéressons aux sous-types d’adipocytes bruns et beiges qui dissipent l’énergie sous forme de chaleur, tandis que les adipocytes blancs stockent généralement de l’énergie car Notre objectif est de développer un nouveau traitement pour l’obésité et le diabète basé sur la promotion de la dépense énergétique, plutôt que sur la suppression de l’apport énergétique. Nous avons identifié un facteur de transcription, NFI, comme régulateur critique de la différenciation des adipocytes bruns par une analyse de la chromatine ouverte à l’échelle du génome. NFI et le régulateur transcriptionnel principal de l’adipogenèse, PPAR-gamma, co-localisent en tant qu’activateurs spécifiques de la graisse brune.

Dans le processus d’isolement de la fraction vasculaire stromale du tissu adipeux de souris, le hachage manuel et la digestion de la collagénase du tissu adipeux peuvent entraîner une variabilité expérimentale et une contamination. Notre méthode utilise un dissociateur tissulaire pour la digestion de la collagénase, ce qui facilite l’isolement de la SVF, réduit la variabilité expérimentale et la contamination, et améliore la reproductibilité. L’expérimentation utilisant des adipocytes différenciés individuellement est indispensable pour la recherche dans notre domaine.

Notre protocole offrirait une isolation SVF facile et reproductible pour la différenciation ultérieure des adipocytes et accélérerait la recherche dans notre communauté. Actuellement, nous étudions le rôle de l’IFN du métabolisme de tout le corps, comme le poids corporel et le glucose, en utilisant des modèles murins de gain et de perte de fonction. Nous explorerons également d’autres activations pharmacologiques de l’IFN pour chaque voie en aval dans un proche avenir.