La canulation supérieure de l’artère mésentérique chez le rat est difficile et n’est pas souvent utilisée comme modèle expérimental. Cette technique permet d’effectuer une canulation fonctionnelle et ouvre un champ d’expérimentation avec les effets de premier passage des médicaments intra-artériels. Cette méthode évite les saignements et la thrombose tout en consentant à la canulation de l’artère mésentérique supérieure.
Et permettre une perfusion à long terme de médicaments chez un animal relativement libre qui peut manger et se déplacer. La recherche pharmacologique sur les médicaments actifs sur l’intestin peut grandement bénéficier de cette technique. Il n’y a pas d’alternative pour étudier l’effet d’un seul passage direct du médicament.
Commencez par couper la plus grande canule. Ensuite, coupez la plus petite canule et insérez-la d’un centimètre dans la plus grande canule. Fixez les deux canules ensemble avec de la colle cyanoacrylate en évitant l’occlusion de la lumière.
Ensuite, connectez l’extrémité libre de la plus grande canule à un adaptateur de talon de luer monté sur une seringue d’un millilitre remplie de solution saline. Aiguisez l’extrémité libre de la plus petite canule avec des ciseaux pour faciliter l’insertion du cathéter dans la branche de l’artère mésentérique supérieure. Vérifiez la perméabilité de la canule en rinçant avec une solution saline.
Rasez la fourrure des régions chirurgicales du rat anesthésié, y compris l’abdomen pour la branche de l’artère mésentérique supérieure ou canulation SMA, et l’arrière du cou pour la sortie de la canule. Nettoyez les régions chirurgicales de manière aseptique. Et placez l’animal en position couchée en immobilisant les quatre membres.
Utilisez une lame de scalpel pour ouvrir la paroi abdominale avec une incision droite de trois centimètres sur la ligne médiane de la région méso-gastrique à travers tous les plans abdominaux dans le péritoine. Placez des gazes imbibées de solution saline autour de l’incision de laparotomie, en utilisant des sutures pour garder l’incision chirurgicale ouverte. Utilisez des cotons-tiges pour identifier et exposer l’intestin grêle, et extrayez le mésentère de la coupe de laparotomie et posez-le vers le bas sur les gazes.
Identifiez le SMA en ressentant une pulsation. À l’aide de cotons-tiges, séparez la graisse mésentérique et découvrez le SMA et deux à trois de ses branches proximales. Choisissez une branche proximale de la SMA suffisamment grande pour permettre les manœuvres chirurgicales de canulation.
Attachez cette branche de trois à quatre centimètres en aval de son origine pour permettre son expansion en gardant les extrémités de suture assez longtemps pour être manipulées plus tard. Placez un support rigide sous la branche du SMA et maintenez l’extrémité de la plus petite canule à l’aide d’une pince, puis tirez les extrémités de suture avec l’autre main pour forcer le vaisseau et faciliter l’entrée du cathéter. Tenez la pointe de la canule à un angle de 20 degrés par rapport au plan du vaisseau dans la direction opposée au flux sanguin.
Appuyez ensuite légèrement sur la pointe pour pénétrer dans la paroi de l’artère et insérez la canule. Poursuivre l’insertion de la canule sur un centimètre dans la branche artérielle proche de l’origine de la SMA. Fixez la canule à l’artère avec un nœud chirurgical et vérifiez son bon fonctionnement en rinçant un millilitre de solution saline stérile ou par prélèvement sanguin.
Faites une incision d’un centimètre dans la région postérieure du cou et accueillez une valve sphérique. Ensuite, passez la canule de l’accès à la laparotomie à la valve placée dans le cou à travers les tissus sous-cutanés et fermez l’extrémité distale de la canule avec un bouchon de cathéter pour éviter l’entrée d’air. Remplacez la petite valve dans la cavité abdominale et fermez la paroi abdominale.
Ensuite, fixez la valve à la peau suivante avec des points de suture. Habillez le rat avec une veste pour protéger la valve bouton. Protégez la partie exposée de la canule avec une tige d’acier pendant la perfusion et fixez-la à la valve.
Connectez l’extrémité distale de la canule à une pompe élastomère remplie de 50 millilitres de solution saline stérile et procédez à la perfusion pendant 24 heures. Après la perfusion, démontez le système de perfusion externe de l’animal en retirant la pompe, la gaine, la tige d’acier et la valve du rat. Fermez et coupez la canule comme elle sort du cou, en laissant l’extrémité sous la peau du cou après la suture de la plaie.
Dans cette étude, 15 rats ont été soumis à cette procédure et la consommation quotidienne moyenne de nourriture et d’eau a augmenté progressivement jusqu’à la normale après trois jours. La prise de poids était également régulière et augmentait progressivement jusqu’à la fin de la période d’observation. Après 24 heures, il y avait des résidus de solution saline dans seulement deux pompes à ballonnet, tandis que les 13 autres étaient complètement vides.
De plus, après la période de perfusion, 12 canules étaient encore fonctionnelles pour le prélèvement sanguin et la perfusion de solution saline, tandis que trois canules n’étaient plus brevetées. Lors de la nécropsie, 100% des canules étaient situées dans la succursale SMA. Et aucun rat n’avait de signes d’ischémie intestinale ou de saignement intraabdominal.
Une angiographie a été obtenue chez cinq rats en injectant du produit de contraste iodoné dans la canule mésentérique. Le cercle artériel mésentérique, en particulier le SMA et ses branches principales, ont été observés sans que le produit de contraste ne se propage dans l’abdomen, confirmant que la canule était bien placée et fixée à la branche du SMA. Brevet, une désolation méticuleuse de la branche à la ligature canulaire du vaisseau en aval en passant la suture sous le vaisseau et en choisissant la position la plus appropriée pour percer et insérer la canule sont les aspects les plus importants de ce protocole.
Les erreurs ne sont pas corrigibles.
