Évaluation hémodynamique invasive pour le système ventriculaire droit et l'hypertension artérielle pulmonaire induite par l'hypoxie chez les souris

Ce protocole est une évaluation hémodynamique basée sur la chirurgie thoracique ouverte et il est utile pour l’évaluation ventriculaire droite et pulmonaire de pression artérielle chez les petits animaux tels que les souris. L’avantage de cette procédure est qu’elle peut générer à la fois des paramètres VP et PAP en même temps. Il est donc préférable pour les évaluations des modèles pah.

Commencez par mettre en place l’équipement pour la chirurgie. Faire tremper le cathéter transducteur sous pression dans 0,9 % salin à température ambiante pendant au moins 30 minutes avant l’expérience hémodynamique. Ensuite, connectez le cathéter à un système de volume de pression.

Calibrez le transducteur de pression en transformant le bouton d’étalonnage à zéro et 25 millimètres de mercure pour envoyer un signal de pression de vérification au logiciel d’acquisition de données, puis configurez le réglage d’étalonnage. Tournez le bouton en transducteur et ajustez la soupape d’équilibre à zéro ligne de base. Installez un microscope stéréo standard, une table chirurgicale pour petits animaux à température contrôlée et un système d’éclairage léger pour la microchirurgie.

Une fois que la souris est correctement anesthésiée, retirez la fourrure de la poitrine et du cou à l’aide d’un rasoir et d’une lotion d’épilation. Fixez la souris en position supine sur la table chirurgicale à température contrôlée. Après s’être assuré que l’anesthésie est en vigueur, faire une incision midline sur la peau du cou.

Disséquer le muscle squelettique à l’aide de forceps incurvés et exposer la trachée. Effectuez l’intubation par la bouche avec un cathéter intraveineux de gaine de calibre 22, confirmant que le tube est dans la trachée avec des forceps. Connectez le tube à un ventilateur pour petit animal et fixez-le pour la ventilation à l’aide de ruban adhésif.

Ensuite, faire une incision de midline sur la peau de la poitrine et disséquer soigneusement le muscle thoracique à l’aide d’un outil de cautérisation. Couper le sternum à l’aide de ciseaux à travers le milieu, et exposer la cavité thoracique. Assurez-vous d’éviter tout saignement à l’aide de l’outil cautérisation.

Exposez le ventricule droit avec des rétracteurs, puis insérez le cathéter transducteur de pression trempé saline à travers un petit tunnel créé avec une aiguille de calibre 25 dans le ventricule droit pour mesurer la pression ventriculaire droite, ou RVP. Tenez le câble de cathéter et traversez la valve pulmonaire d’une manière coaxiale avec l’artère pulmonaire. Observez la forme d’onde de pression et obtenez une pression artérielle pulmonaire stable ou un signal PAP.

Ensuite, enregistrez les données hémodynamiques à l’aide du logiciel d’acquisition de données. Retirez soigneusement le cathéter du bon système cardiaque et placez-le dans une seringue d’un millilitre contenant une solution enzymatique digestive de 1 %. Ce protocole a été utilisé avec succès pour obtenir des formes d’onde RVP et PAP chez la souris en insérant un cathéter transducteur de pression dans le ventricule droit et l’artère pulmonaire.

Afin d’éviter de générer des données artificielles, des segments avec du bruit ont été exclus de l’analyse des données et des corrections ont été apportées si le niveau zéro du cathéter avait dérivé. RVP et PAP ont été mesurés chez les souris avec l’hypoxie chronique induite, et les résultats ont été comparés à ceux obtenus d’un groupe témoin. Pap systolique, PAP diastolique, PAP moyen, et pression systolique ventriculaire droite ont été tous sensiblement augmentés dans le groupe chronique d’hypoxie.

La chose la plus importante à retenir est d’insérer le cathéter transducteur de pression dans le ventricule droit avec soin, en s’assurant d’éviter les dommages au cathéter et de confirmer la forme d’onde RVP lisse apparaît sur l’écran.