La mesure simultanée de la réflectance des feuilles avec l’analyse de fluorescence de chlorophylle à l’aide du modèle végétal mutant déjà connu facilite l’établissement de nouveaux paramètres de réflectance. La construction de nouveaux paramètres de réflectance des feuilles par notre méthode permet une surveillance en temps réel de l’évolution des comportements des plantes dans des conditions environnementales naturelles. Avant de commencer une expérience mis en place un système de mesure comme le montre ce schéma.
Avec un stade d’échantillon, une source lumineuse, un fluoromètre PAM et un radiomètre spectral. Ensuite, fixez une plaque d’acier carrée de 10 cm avec un trou d’un cm de diamètre à l’étape de l’échantillon sur mesure. Et s’adapter à deux sondes minces en fibre étroitement ensemble.
Envelopper les sondes de ruban adhésif en plastique. Ensuite, utilisez un support pour couper les sondes enregistrées sur l’étape de l’échantillon. Placez les sondes verticalement jusqu’au stade de l’échantillon.
Et fixez un guide lumineux biforked fait de fibres de verre à la source de lumière halogène. Puis effacer l’étape de l’échantillon des deux directions à environ 45 degrés d’angle. Réglage de la source lumineuse de sorte que la lumière illumine uniformément le stade de l’échantillon sans projeter d’ombres.
Pour la mesure simultanée de la réflectance gauche et de l’analyse de la florescence chlorophylle mise en place, dans une pièce sombre avec la lumière vert de cellophane placer une plante d’essai au porte-feuilles de l’étape de l’échantillon et toucher la feuille contre le trou de plaque d’acier sur la scène. Après avoir éteint la faible lumière verte, allumez le fluoromètre PAM et effacez l’échantillon de feuilles avec une lumière de mesure. Déplacez l’ajusteur de sorte que l’intensité de la florescence mesure environ 100 et mesure la distance entre la sonde et la feuille.
Fixez l’ajusteur en place et enregistrez la valeur de la distance sur l’ajusteur. Éteignez ensuite la lumière de mesure et retirez la plante d’essai. Pour la mesure de l’intensité lumineuse actinique, placez un quantimètre lumineux à la position où la feuille de l’échantillon sera placée.
Et irradier la lumière de la source de lumière halogène pour mesurer l’intensité de la source lumineuse. Déterminez quelles positions du cadran source lumineuse génèrent des intensités de 30, 60, 120, 240 et 480 protons micromolaires par mètre carré par seconde. Placez une plaque blanche comme norme réflectante à la position de l’échantillon de feuilles.
Et allumez un radiomètre spectral. Ajustez la réflectance spectrale entre 350 et 850 nanomètres. Il n’y a pas de données spectrales pour le moment car il n’y a pas de lumière irradiante.
Allumez la lampe halogène pour irradier avec 480 photons micromolaires par mètre carré par seconde. L’intensité d’irradiation la plus élevée dans ce test et ajuster la force de détection du radiomètre pour éviter la saturation. Enregistrez ensuite la réflectance spectrale sous illumination avec 30, 60, 120, 240 et 480 photons micromolaires par mètre carré par seconde.
Pour la mesure simultanée de la réflectance des feuilles et de l’analyse de la florescence de la chlorophylle, transférez la plante de la chambre de croissance à la chambre noire avec la même température et humidité. Après une heure, placez une plante Arabidopsis à la position de l’échantillon de feuilles. Et fixer la feuille d’échantillon à la feuille de sorte que la surface de la feuille est perpendiculaire aux sondes de détection.
Allumez le fluoromètre PAM et lancez l’enregistrement de la courbe. Cette valeur s’appelle zéro. Allumez la lumière de mesure et attendez environ 30 secondes que la courbe réponde.
Cette valeur s’appelait F zéro. Offrez une impulsion saturée de 4000 photons micromolaires par mètre carré par seconde pendant 0,8 seconde à partir du PAM et obtenez la valeur la plus élevée du pic dans la courbe avec une intensité de fluorescence accrue. Cette valeur est appelée Fm.Then utiliser la formule pour calculer le rendement quantique maximum du système photo deux dans l’obscurité.
Pour mesurer les comportements photosynthétiques à l’état stable, après avoir enregistré Fm irradier l’échantillon de feuilles avec les photons de 30 micromolaires par mètre carré par seconde. Tout en ralnonciant le radiomètre spectral pour surveiller la réflectance des feuilles. Attendez au moins 20 minutes pour que la réaction photosynthétique atteigne un état stable.
Pendant cette période de réaction, l’impulsion de saturation sera fournie à intervalles d’une minute. L’intensité de florescence de l’état stable est appelée Fs.La valeur maximale de florescence atteinte après 20 minutes de lumière pulsée est appelée Fm prime. Enregistrez la réflectance spectrale à ce stade.
Pour calculer l’activité de photosynthèse à l’état stable calculer les rendements quantiques du système photo deux qui peuvent être estimés en irradiant avec des impulsions saturées sous la lumière actinique. Estimer le flux d’électrons linéaires à partir du système photo deux centre de réaction. Calculez ensuite l’assaisage non photochimique et calculez l’indice de réflectance photochimique à partir de 531 et 570 nanomètres.
Après l’acquisition de Fs et la réflectance des feuilles éteindre la lumière actinique et de fournir une impulsion saturante à intervalles d’une minute pendant la relaxation sombre. La valeur maximale de florescence induite par l’impulsion de saturation sous l’obscurité est appelée Fm double prime. Et enregistrer les données fm double prime à deux et 10 minutes après avoir éteint la lumière actinique.
Pour calculer les paramètres de l’assaison non photochimique des connecteurs de relaxation, estimez le qE avec les deux minutes d’adaptation sombre Fm double données de premier choix. Calculez l’assaisons dépendant zanthoxylum, qZ, avec l’adaptation sombre de 10 minutes Fm données double prime. Calculez ensuite l’état inhibiteur de la photo.
Comme une prochaine mesure allumer la lumière actinique à 60 photons micromolaires par mètre carré par seconde et répéter la même mesure. Dans cette expérience représentative, des plantes de type sauvage et mutantes d’Arabidopsis ont été comparées. Le changement dans l’indice de réflectance photochimique, PRI, calculé à partir de la réflectance des feuilles, a été tracé par rapport au flux linéaire d’électrons dépendant de la lumière du système photo deux tel qu’estimé par le fluoromètre PAM.
Dans cette expérience, le changement dans le PRI a été négativement corrélé avec le flux linéaire d’électrons dans les plantes de type sauvage, mais pas dans les plantes mutantes. qZ qui représente le cycle de xanthophylle a été fractionné des connectics foncés de relaxation de l’assèchement non photochimique et a également été tracé contre le changement dans le PRI. Dans cette analyse, le qZ a également été fortement corrélé avec le changement de PRI pour les deux souches végétales, ce qui implique que le PRI reflète le cycle xanthophylle.
Pour la mesure simultanée de la même zone foliique à l’aide de la même source de lumière ou de la même intensité, utilisez la même fibre de détection dans le dispositif de fixation pour positionner la feuille verticalement. La spectroscopie de réflectance a le potentiel d’être utilisée dans l’analyse d’une variété de phénotypes, dans le type sauvage et les plantes mutantes pour élucider les mécanismes moléculaires des plantes.
